赵玉娇 作品数:32 被引量:55 H指数:5 供职机构: 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 云南省自然科学基金 云南省社会发展科技计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
2009年昆明地区流行的肠道病毒71型基因特征分析 被引量:1 2011年 目的分析2009年昆明地区肠道病毒71型分离株VP1的遗传特征。方法采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法从Vero细胞分离的病毒株基因组中扩增出VP1基因,并测序;分别用Mega4.1软件分析其遗传特征。结果中国昆明分离到的6株肠道病毒71型VP1基因的核苷酸和氨基酸同源性为95.4%~97.9%和97.3%~99.7%,与其他C基因型C1、C2、C3和C5的VP1的同源性为87.9%~89.1%和98.3%~99.1%,而与C4基因型的同源型为92.6%~98.5%和97.0%~99.7%,与SHZH98的同源性最低为92.6%和97.0%,与其他基因型的同源性为82.7%~84.6%和96.0%~97.6%。结论 2009年云南昆明流行的肠道病毒71型均为C4基因型;其VP1基因保守性较好。 陈俊英 潘玥 李华 施海晶 赵玉娇 孙强明 马绍辉关键词:肠道病毒71型 VP1基因 慢病毒介导的HIF-1α mODD在肿瘤细胞中的高表达 2011年 目的在肿瘤细胞中利用重组慢病毒介导缺氧诱导因子-1α突变体(HIF-1α mODD)在正常氧压下高表达,以模拟肿瘤缺氧微环境下肿瘤细胞中HIF-1α的高表达,为研究HIF-1介导的缺氧信号通路及其在肿瘤细胞中的作用提供实验模型。方法将含HIF-1αmODD基因片段的慢病毒表达质粒pWPI GW/HIF-1α mODD,与pVSVG及pSPAX质粒共转染人胚肾293T细胞,包装制备重组慢病毒,重组病毒经过纯化后直接感染GLC、H157和YTMLC等肿瘤细胞,并在正常氧压条件下培养,通过RT-PCR、免疫印迹等方法检测HIF-1α mODD在细胞中的表达水平。结果重组慢病毒介导HIF-1α mODD在GLC、H157和YTMLC细胞内获得高表达。结论成功模拟了肿瘤细胞在缺氧微环境下高表达HIF-1α的情况,为体外研究HIF-1α在肿瘤血管新生及肿瘤生长中的作用提供途径。 赵玉娇 龙海亭 潘玥 李华 陈俊英 施海晶 马绍辉 孙强明关键词:HIF-1Α 慢病毒 缺氧微环境 CpG ODN佐剂序列IMB-AC5的体外免疫刺激活性分析 被引量:1 2017年 目的对CpG ODN候选佐剂IMB-AC5进行体外免疫刺激活性分析。方法以目前国外进入临床研究的两种CpG ODN佐剂序列(Coley 7909和Dynavax ISS1018)为对照,采用~3H-TDR法检测IMB-AC5刺激人外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocytes,PBLs)的增殖活性;流式细胞术分析CD19+B活化细胞表面CD69表达水平;ELISA法检测刺激后GEN细胞产生的IL-6和IFNα水平。结果 3种CpG ODN佐剂均能明显刺激人PBLs的增生,IMB-AC5刺激增生能力优于Dynavax ISS1018,略低于Coley 7909;IMB-AC5活化CD19+B细胞表面CD69表达水平与Coley7909相似,Dynavax ISS1018活化效果略低于前二者;3种CpG ODN佐剂体外活化树突状细胞水平差异较大,且呈明显的剂量依赖,IMB-AC5的最佳活化浓度范围为0.15~1.5μmol/L,Coley 7909的最佳活化浓度范围为<0.25μmol/L,活化效果均优于Dynavax ISS1018。结论 IMB-AC5可作为有效的疫苗候选佐剂,且不低于国外同类佐剂的体外免疫刺激活性。 赵玉娇 蔡路奎 王晓丹 席珏敏 陈俊英 潘玥 邱丽娟 姜黎明 孙强明关键词:CPG ODN 佐剂 埃博拉病毒包膜糖蛋白的二级结构预测及可能性B细胞表位分析 研究背景:据世界卫生组织(WHO)公布的最新数据显示,最近在西非肆虐的埃博拉病毒(Ebolavirus,EBOV)已导致826人死亡,从2014年7月28日至7月30日3天内就有超过50人因感染这种病毒而死亡,最新数据似... 赵玉娇关键词:埃博拉病毒 B细胞表位 文献传递 CpG ODN佐剂序列IMB-AC5联合乙型肝炎疫苗的免疫原性分析 2016年 目的评价Cp G ODN佐剂序列IMB-AC5联合乙型肝炎疫苗的免疫原性,以评估IMB-AC5佐剂的应用前景。方法利用市售的单铝佐剂乙型肝炎疫苗,根据相同配比加入3种Cp G ODN(IMB-AC5及Coley 7909和Dynavax 1018),作为实验组(V-AC5、V-7909和V-1018),并以乙型肝炎疫苗为对照组,分别免疫BALB/c小鼠,于免疫后2、4、6、8周,经尾静脉采血,第10周处死小鼠采集全血,分离血清,采用乙肝表面抗体试剂盒检测anti-HBs抗体水平,ELISA法检测Ig G1/2a亚型抗体比例;ELISPOT法检测小鼠脾细胞IFNγ表达水平。结果免疫后0~4周内,各组小鼠血清抗体水平均无明显变化,第6周开始呈明显上升趋势,至第8周后趋于平缓;各实验组抗体水平均明显高于对照组(P〈0.05),V-AC5显示出与V-7909同样良好的体液免疫效果,略优于V-1018。免疫后各实验组小鼠血清中Ig G2a/Ig G1比例明显高于对照组。各实验组小鼠脾细胞斑点数明显高于对照组(P〈0.05);V-AC5斑点数介于其他两个实验组之间。结论 IMB-AC5佐剂能显著活化B细胞产生抗体并具有刺激细胞免疫的效果,可增强疫苗的免疫原性。 赵玉娇 蔡路奎 王晓丹 席珏敏 陈俊英 潘玥 邱丽娟 姜黎明 孙强明关键词:CPG ODN 佐剂 乙型肝炎疫苗 免疫原性 登革病毒通过IL-10非依赖性方式抑制NOS2表达介导抗体依赖增强感染 登革热病毒(DENV)是一种蚊媒病毒,在超过100多个国家中,尤其是亚洲和拉丁美洲,引起了巨大的公共卫生问题.据估计,每年有超过5000万人感染登革热病毒.一般认为登革热病毒感染的抗体增强效应(ADE)参与登革出血热(D... 黄新伟 李多 赵玉娇 孙强明关键词:登革热病毒 NOS2 一种I-IV型登革热病毒的通用检测试剂盒 本发明涉及一种I-IV型登革热病毒的通用检测试剂盒,属于病毒检测技术领域。该试剂盒包括酶标记板、阴性对照血清、阳性对照NS1重组蛋白、检测抗体、显色底物和终止液。所述酶标记板上的包被抗体为DV14抗体,检测抗体为连接了生... 孙强明 李多 王晓丹 潘玥 陈俊英 席珏敏 黄新伟 赵玉娇 邱丽娟 姜黎明文献传递 人Semaphorin 4D慢病毒载体的构建及鉴定 2011年 目的:构建并制备能够有效表达Semaphorin 4D的重组慢病毒。方法:从人急性T细胞白血病Jurkat细胞DNA扩增人Semaphorin 4D基因,克隆至pWPI GW慢病毒载体上,与pVSVG及pSPAX质粒共转染人胚肾293T细胞,包装出重组慢病毒,将纯化后的重组病毒直接感染293T和HUVEC细胞,通过免疫印迹、免疫荧光染色和血管内皮细胞迁移分析等方法检测Semaphorin 4D的表达和诱导血管内皮细胞迁移的作用。结果:重组慢病毒介导Semaphorin 4D在293T和HUVEC内获得表达,能介导血管内皮细胞迁移。结论:成功构建了表达Semaphorin 4D的重组慢病毒载体。 孙强明 潘玥 赵玉娇 陈俊英 施海晶 马绍辉关键词:SEMAPHORIN 慢病毒 血管新生 基因治疗 云南特色中药臭灵丹体外抗甲型H1N1流感病毒的实验研究 被引量:7 2015年 臭灵丹Laggera pterodonta,一种民间常用的治疗感冒的具有民俗特色的中药。为了检测臭灵丹不同溶剂萃取物对甲型H1N1流感病毒在体外的中和杀伤作用和增殖抑制作用,本研究采用中和抑制实验和增殖抑制实验,用狗肾传代MDCK细胞培养法观察臭灵丹萃取物抑制甲型H1N1流感病毒的致细胞病变作用(CPE),观察2种实验中臭灵丹萃取物在体外对甲型H1N1流感病毒血凝效价的影响,同时采用Real time RT-PCR定量检测流感病毒的拷贝数,比较臭灵丹不同溶剂萃取物对甲型H1N1流感病毒在体外增殖的影响。结果显示,臭灵丹乙酸乙酯萃取物及石油醚萃取物作用72 h后,中和实验组H1N1病毒血凝效价下降了8倍,而增殖抑制组,H1N1病毒血凝效价也分别下降了2倍和4倍;Real time RT-PCR的检测结果表明,臭灵丹乙酸乙酯萃取物中和H1N1病毒的抑制率为72.5%,而增殖抑制组的抑制率为25.3%,石油醚萃取物中和H1N1病毒的抑制率为60.2%,增殖抑制组为81.4%。由此可以得出,臭灵丹乙酸乙酯萃取物和石油醚萃取物在体外对甲型H1N1流感病毒有明显的中和作用及直接的抑制增殖作用。 夏晓玲 孙强明 王晓丹 赵玉娇 杨子峰 黄庆晖 姜志宏 王新华 张荣平关键词:臭灵丹 甲型流感病毒 抗病毒药物 中草药 Ⅱ型、Ⅲ型登革病毒基因拷贝数的绝对定量检测方法 本发明提供一种Ⅱ型、Ⅲ型登革病毒基因拷贝数的绝对定量检测方法,通过Ⅱ型、Ⅲ型登革病毒的接种培养,再构建Ⅱ型、Ⅲ型登革病毒标准品质粒,参照所得Ⅱ型、Ⅲ型登革病毒前膜蛋白区目的基因序列设计下列Ⅱ型、Ⅲ型登革病毒荧光定量PCR... 孙强明 黄新伟 席珏敏 赵玉娇 潘玥 陈俊英 王晓丹 李多 邱丽娟 姜黎明文献传递