- 玉米大斑病菌St3 HNR基因真核表达载体构建及表达分析
- 2011年
- 本研究在克隆获得玉米大斑病菌1,3,8-三羟基萘还原酶基因(St3HNR)的基础上,拟对该基因编码产物进行异源表达分析,明确基因功能。试验利用毕赤酵母真核表达系统,构建了玉米大斑病菌St3HNR基因的真核表达载体pPIC9K-St3HNR,采用电击转化法将重组质粒转入表达宿主菌GS115中得到了重组酵母菌株,经甲醇诱导表达,SDS-PAGE检测发现,从诱导48 h开始有一个分子量约为28 kD的蛋白组分分泌,与St3HNR的编码产物分子量相近,且表达量随诱导时间的延长而逐渐增加,而对照及未诱导菌株中不存在该条带,推测St3hnr蛋白在宿主菌中分泌表达。该研究为进一步分析基因编码产物的催化活性,明确该基因在黑色素合成途径中的作用奠定了基础。
- 曹志艳温雷蕾李静宜陈晓旭王作英董金皋
- 关键词：玉米大斑病菌真核表达
