刘冬冬 作品数:6 被引量:16 H指数:3 供职机构: 江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室 更多>> 发文基金: 江苏省自然科学基金 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 生物学 化学工程 经济管理 更多>>
ARTP诱变选育高产海藻糖菌株及酶促反应条件优化 被引量:2 2017年 以实验室保藏的节杆菌属菌株Arthrobacter sp.SH为出发菌株,经常压室温等离子体(atmospheric and room temperature plasma,ARTP)诱变选育后,筛选到一株以淀粉为原料Tre Y-Tre Z途径生产海藻糖的高产突变菌株Arthrobacter sp.SH-52。该突变菌株酶催化能力达到129.6 U/m L,比出发菌株提高了46.1%。对菌株Arthrobacter sp.SH-52的酶促反应条件进行优化,结果表明,酶促反应最适温度45℃,最适反应时间30 h,最适初始p H 6.5,最适底物为浓度20%的淀粉液化液(DE值为11.9)。经酶促反应优化后,采用未经纯化的粗酶液进行催化,转化率达到37.6%。实验结果表明ARTP诱变是选育高酶活海藻糖生产菌的有效方法,研究结果对工业化生产海藻糖具有一定的借鉴价值。 田成福 张伟国 徐建中 刘冬冬 史仲平关键词:海藻糖 酶解条斑紫菜制备抗氧化肽及综合利用 被引量:3 2016年 将酶解反应与几种膜分离技术集成构建一种制备紫菜抗氧化肽,并同时分级分离其它活性物质以实现综合利用。先后采用截留相对分子质量10 000的超滤膜和500的纳滤膜对紫菜酶解液进行分离纯化,优化操作参数,抗氧化肽回收率达73.1%,多糖回收率达55%,膳食纤维回收率达85%,多肽得率达18%;考察该工艺所得紫菜抗氧化多肽的应用特性,结果表明:纳滤浓缩后多肽液0.5 mg/m L对DPPH自由基清除率可达68.5%,该多肽最适作用p H为8.5,经80℃处理6 h后的紫菜抗氧化肽仍保留83%左右的相对DPPH自由基清除率。 刘冬冬 田亚平关键词:紫菜 抗氧化肽 膜分离技术 综合利用 L-色氨酸的研究进展 L-色氨酸是生物体生命活动中的必需氨基酸之一,随着对色氨酸研究的不断深入,色氨酸的应用领域将越来越广泛,但色氨酸的工业生产规模却远远跟不上其市场需求.本文综述了L-色氨酸的主要生产方法、检测方法和L-色氨酸在食品、医药和... 刘冬冬 徐建中 张伟国不同葡萄糖转运途径相关基因的过表达对菌株葡萄糖代谢及产物合成的影响 2017年 磷酸烯醇式丙酮酸-葡萄糖磷酸转移酶系统(phosphoenolpyruvate-dependent glucose phosphotransferase system,PTS^(Glc))和不依赖于PTS^(Glc)系统葡萄糖转运系统在葡萄糖转运和磷酸化过程中起重要作用。该文通过在葡萄糖代谢缓慢的L-赖氨酸产生菌Corynebacterium glutamicum(C.glutamicum)ZL-8中过表达肌醇透性酶基因(iol T1)、葡萄糖激酶基因(ppgk)和EIIGlc基因(pts G),研究葡萄糖转运途径相关基因对葡萄糖代谢速率、L-赖氨酸及副产物合成的影响。与出发菌株C.glutamicum ZL-8相比,重组菌C.glutamicum ZL-8/p ECXK-99E-ppgkiol T1(葡萄糖激酶酶活力提高了768%)和C.glutamicum ZL-8/p DXW-8-pts G(PTS^(Glc)系统酶活力提高了62.7%)葡萄糖消耗速率分别提高了16.7%和27.3%,L-赖氨酸产量分别提高了24.7%和16.4%。此外,有机酸和氨基酸分析结果表明,过表达不同葡萄糖转运途径基因对有机酸(丙酮酸、乳酸和乙酸)和副产物氨基酸(丙氨酸、缬氨酸、天冬氨酸)具有不同的影响。 刘冬冬 张伟国 徐建中 田成福关键词:谷氨酸棒杆菌 L-赖氨酸 条斑紫菜蛋白酶解产物中抗菌肽的纯化及特征 被引量:6 2014年 以酶解产物对金黄色葡萄球菌的抑菌能力为指标,筛选出木瓜蛋白酶并优化确定酶解条件,酶解液中分子量在1000 Da以下的小分子肽类占96.68%;采用DEAE-52纤维素阴离子交换层析、Sephadex G-25凝胶层析得到纯化的紫菜蛋白抗菌肽(LPAP);液质联用分析该纯化抗菌肽中主要的多肽序列为FFDD(Phe-Phe-AspAsp);该LPAP对G+菌和G-菌都有抑制作用,具有相对广谱性,对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(Minimum inhibitory concentration,MIC)为0.25 mg/m L,抗菌肽作用金黄色葡萄球菌的电镜照片表明其抑菌机制可能是对细胞膜的破坏作用。 刘冬冬 周锋 周楠迪 田亚平关键词:紫菜 蛋白酶 水解产物 条斑紫菜蛋白酶解产物中α-葡萄糖苷酶抑制剂纯化及特性 被引量:6 2014年 以α-葡萄糖苷酶抑制活性为指标,优选出1398中性蛋白酶、碱性蛋白酶和氨肽酶在一定条件下复配酶解条斑紫菜蛋白制备α-葡萄糖苷酶抑制剂。酶解液加入乙醇至终浓度为60%以沉淀去除多糖,上清液为α-葡萄糖苷酶抑制剂粗品。该粗品利用SP Sepharose High Performance阳离子交换层析、Sephadex G-10凝胶层析和Mono Q阴离子交换层析进行分离纯化,获得一种肽类α-葡萄糖苷酶抑制剂(LGI)。LGI经反向高效液相层析测定纯度为62.4%,基本特性分析显示其具较好的温度和pH稳定性,对α-葡萄糖苷酶半抑制浓度IC50值为97.36μg/mL,属于一种非竞争性抑制剂。 周锋 刘冬冬 周楠迪 田亚平关键词:条斑紫菜 蛋白酶水解 Α-葡萄糖苷酶抑制剂 纯化