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ARTP诱变选育高产海藻糖菌株及酶促反应条件优化被引量：2: 2017年; 以实验室保藏的节杆菌属菌株Arthrobacter sp.SH为出发菌株,经常压室温等离子体(atmospheric and room temperature plasma,ARTP)诱变选育后,筛选到一株以淀粉为原料Tre Y-Tre Z途径生产海藻糖的高产突变菌株Arthrobacter sp.SH-52。该突变菌株酶催化能力达到129.6 U/m L,比出发菌株提高了46.1%。对菌株Arthrobacter sp.SH-52的酶促反应条件进行优化,结果表明,酶促反应最适温度45℃,最适反应时间30 h,最适初始p H 6.5,最适底物为浓度20%的淀粉液化液(DE值为11.9)。经酶促反应优化后,采用未经纯化的粗酶液进行催化,转化率达到37.6%。实验结果表明ARTP诱变是选育高酶活海藻糖生产菌的有效方法,研究结果对工业化生产海藻糖具有一定的借鉴价值。; 田成福张伟国徐建中刘冬冬史仲平; 关键词：海藻糖

L-苏氨酸工业研究进展: L-苏氨酸是哺乳动物必需氨基酸,因此在工业上有广泛的推广应用,有着快速增长的市场需求.生产L-苏氨酸的主要方法是微生物发酵法.提高L-苏氨酸产量最基本的解决方法是开发高生产率和稳定性的优良微生物菌株,同时降低污染物的排放...; 王颖妤徐建中张伟国; 关键词：生产管理

一株产甲萘醌-7(MK-7)菌的分离鉴定及产物合成条件的初步研究被引量：2: 2016年; 本文从豆豉中分离出了一株高产MK-7的菌株并对其进行了鉴定,同时对该菌合成MK-7的条件进行了初步研究。在参照《伯杰氏细菌鉴定手册》,并根据形态学特征、生理生化特性、并结合16S rDNA序列分析结果,该菌属于解淀粉芽孢杆菌。该菌合成MK-7的最佳条件为:发酵温度37℃、装液量为30 m L/250 m L、接种量为2%和摇瓶培养时间为3 h。研究发现,菌株Y-2合成的MK-7主要存在于细胞内。以上结果可为基于菌株Y-2选育高产MK-7菌株和实现MK-7的产业化提供理论依据。; 徐建中王颖妤严为留张伟国; 关键词：解淀粉芽孢杆菌

青稞酒曲微生物多样性分析及米根霉制曲条件优化被引量：22: 2018年; 采用高通量测序和分离培养相结合的方法对青稞酒曲进行微生物多样性分析,分离培养酒曲中的优势微生物,制作青稞酒纯种曲。结果表明,酒曲中真菌主要有根霉属、曲霉属、线虫草属和酵母属,其中米根霉是酒曲中真菌的优势菌株,同时也是主要糖化菌;细菌主要有库克菌属、球菌属、芽孢杆菌属、微球菌属等。随后,在利用米根霉制作纯种曲时发现,培养温度30℃、麸皮青稞粉配比2∶1、料水比40%、培养时间72 h、种曲接种量3.5%时糖化酶活力为1 246.9 U/g,液化酶活力为61.4 U/g,比原曲酶活力分别提高了9.2、2.4倍。; 袁亦舟张伟国徐建中; 关键词：高通量测序米根霉

L-赖氨酸合成代谢中NADPH代谢的研究进展被引量：6: 2012年; L-赖氨酸是人类和动物所必需的但自身不能合成的氨基酸之一,它对平衡氨基酸组成、调节体内代谢平衡、提高体内对谷类蛋白质的吸收、改善动物营养、促进生长发育均有重要作用。L-赖氨酸的发酵不同于L-谷氨酸的发酵,每形成1 mol的L-赖氨酸需要消耗4 mol的NADPH,而每生产1 mol的L-谷氨酸只需消耗1 mol的NADPH,因此在L-赖氨酸发酵过程中,提高代谢途径中的NADPH量是增加L-赖氨酸产量的关键因素之一。作者从谷氨酸棒杆菌中L-赖氨酸生物合成途径、NADPH代谢以及与NADPH代谢相关的酶三个方面概述了L-赖氨酸合成代谢中NADPH代谢的研究进展。; 张伟国徐建中; 关键词：L-赖氨酸代谢途径 NADPH 谷氨酸棒杆菌

L-异亮氨酸高产菌选育及其培养基优化被引量：11: 2019年; 旨在诱变选育L-异亮氨酸高产菌,并探索突变株最佳发酵条件。利用传统化学诱变结合常压室温等离子体生物诱变体系对实验室保藏的Brevibacterium flavum I-12进行逐级诱变,选育2-噻唑丙氨酸(2-TA)和磺胺胍(SG)高抗性和在琥珀酸平板上能快速生长的突变菌株。随后,在单因素实验的基础上,利用响应面设计优化出目的突变株摇瓶发酵培养基组分的最佳参数水平。结果显示,经过一系列诱变和筛选,成功选育出一株在40 g/L的2-TA和5 g/L的SG,且以琥珀酸为唯一碳源的培养基上快速生长突变株,命名为B. flavum TA-6,该菌株产酸达26.2±0.5 g/L,比出发菌株提高了44.75%,而副产物L-缬氨酸和L-亮氨酸积累量明显降低。经响应面法优化发酵条件后,突变株产酸可达27.8±0.5 g/L,比优化前提高了6.1%。通过传统化学诱变结合ARTP生物诱变体系,成功选育出一株杂酸降低的L-异亮氨酸高产菌TA-6,该菌株具有潜在生产应用价值。; 王壮壮魏佳于海波徐建中张伟国; 关键词：L-异亮氨酸化学诱变抗性筛选

不同辅因子NADPH水平对谷氨酸棒杆菌生长及产物合成的影响被引量：1: 2021年; 由谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)分泌的初级代谢产物赖氨酸,其合成与胞内NADPH水平密切相关,但目前对谷氨酸棒杆菌中赖氨酸的生物合成与辅因子NADPH之间调节机制的理解仍然有限。作者以赖氨酸高产菌C.glutamicum XQ-5为出发菌株,通过阻断磷酸戊糖途径构建了低NADPH水平的重组菌C.glutamicum XQ-5Δzwf::pgi,使胞内每1万个细胞的NADPH量从3.57×10^(-8)μmol降低至1.12×10^(-8)μmol。接着通过强化磷酸戊糖途径构建了高NADPH水平的工程菌C.glutamicum XQ-5Δpgi::(zwf-gnd),使胞内每1万个细胞的NADPH量从3.57×10^(-8)μmol提高至1.80×10^(-7)μmol。通过摇瓶发酵,不同NADPH水平下菌株的菌体生长情况、菌体量和胞内副产物积累明显不同。利用转录组学和其他实验,发现重组菌C.glutamicum XQ-5Δpgi::(zwf-gnd)中的panD基因表达水平明显提高。当panD基因被敲除后,重组菌C.glutamicum XQ-5ΔpanDΔpgi::(zwf-gnd)的赖氨酸质量浓度从41 g/L提高至55 g/L,比出发菌C.glutamicum XQ-5提高了14.3%。数据表明,通过过表达磷酸戊糖途径来提高NADPH水平导致赖氨酸水平下降的原因之一,是panD基因表达水平的提高。这为进一步探究辅因子NADPH对赖氨酸生物合成的调控机制提供了坚实基础。; 王路平徐建中张伟国; 关键词：谷氨酸棒杆菌 NADPH L-赖氨酸

L-精氨酸生物合成机制及其代谢工程育种研究进展被引量：6: 2016年; L-精氨酸是人体半必需的氨基酸,在生命代谢过程中起着非常重要的作用,且具有广泛的应用价值及市场需求。目前,L-精氨酸主要采用微生物发酵法进行生产,为了提高L-精氨酸的产量和稳定性,最有效的方法是优化L-精氨酸生产菌株,通过代谢工程改造微生物菌株有望达到这一目的。本文分析了微生物中L-精氨酸的代谢途径和调控机制,并综述了构建高产L-精氨酸的代谢工程策略。此外,展望了菌株稳定性和底物扩展利用的未来研究方向。; 程功徐建中张伟国; 关键词：L-精氨酸代谢工程生物合成途径

一株高效降解青霉素菌的筛选及鉴定被引量：2: 2020年; 从青霉素生产企业附近的土壤中筛选出耐受青霉素钠质量浓度为20 g/L的菌株,利用高效液相色谱法筛选到一株高效降解青霉素钠的菌株Anti-Pen20。根据菌落及菌体形态特征和基于18S r RNA基因序列的分析鉴定,结果表明,菌株Anti-Pen20属粘质红酵母属(Rhodotorula mucilaginosa)。当菌株Anti-Pen20的接种体积分数为15%、青霉素钠初始质量浓度为20 g/L时,30℃恒温培养24 h,对青霉素钠的降解率可达到85%。菌株Anti-Pen20在高质量浓度的青霉素钠培养基中表现出高效的降解率,有望应用于高质量浓度青霉素钠菌渣的处理回收,为AntiPen20在动物饲料添加剂以及果业中作为防病变添加剂的应用提供研究依据。; 王礼君冯丽妍徐建中张伟国; 关键词：青霉素钠菌株鉴定高效降解

工程化大肠杆菌的烟酰胺单核苷酸生产及发酵优化: 2023年; 烟酰胺单核苷酸(nicotinamide mononucleotide,NMN),是一种生物活性核苷酸,其在改善身体机能、修复运动损伤以及延缓细胞衰老等方面发挥积极作用。本研究以实验室先前保藏的大肠杆菌(Escherichia coli)Z1为出发菌株,经系统的代谢工程改造:削弱竞争途径、弱化产物降解途径以及增加底物葡萄糖的转化,获得一株能够有效生物合成NMN的工程菌株Z5,NMN的产量达到252.2 mg/L。在单因素实验的基础上,通过响应面法设计优化菌株Z5的发酵培养基成分,在最佳条件下的NMN产量为265.4 mg/L,相比出发菌株提高75.1%。随后,对菌株培养条件进行优化,最佳培养条件为pH=7.5,接种量4%,摇床转速150r/min。5L发酵罐的补料分批发酵,菌株Z5的NMN产量在发酵24 h达到4.21 g/L,烟酰胺转化率为48.7%。因此,经过对菌株的代谢工程改造和发酵条件优化,NMN的产量得到有效提升,为规模化生产NMN提供一定的参考价值。; 黄文章徐建中张伟国; 关键词：生物工程大肠杆菌代谢工程

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徐建中

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