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克隆化反向杂交探针的制备被引量：2: 1996年; 反向斑点杂交是将寡核苷酸探针固定在膜上，用标记的靶序列与固定在膜上的探针进行杂交．与正向杂交相比，它通过一次杂交即可确定多种基因型，是一种快速筛查ＤＮＡ点突变的诊断方法我们选择β－地中海贫血基因－２８（Ａ→Ｇ）、ＣＤ１７（Ａ→Ｔ）、ＣＤ４１～４２（－ＴＴＣＴ）三种点突变为模型采用ＰＣＲ扩增产生串联多拷贝序列探针并将其克隆化．将克隆化探针固定于尼龙膜上，与同位素标记的β－珠蛋白基因ＰＣＲ片段进行杂交，检测β－地贫患者的基因型．; 李卫国栾旭东黄涛朱宁宁秦学斌黄尚志龙桂芳沈岩吴冠芸; 关键词：反向杂交探针克隆 Β-地中海贫血

人工染色体载体系统──基因组与基因功能研究的重要工具: 1995年; 以ＹＡＣ为代表的人工染色体载体系统，包括ＢＡＣ，ＰＡＣ，在基因组研究，特别是基由克隆中起到了不可替代的作用。这些载体系统各具优点，但也都有一些局限性，应用时应注意扬长避短，相互补充。目前，ＹＡＣ已用于基因功能和基因治疗的研究。现正在发展更加完善的人工染色体载体系统。; 秦学斌黄涛沈岩; 关键词：基因组基因治疗人工染色体 YAC

绿色荧光蛋白──一种新的基因表达标记物被引量：11: 1995年; 绿色荧光蛋白──一种新的基因表达标记物黄涛（中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室，北京１００００５）关键词绿色荧光蛋白，基因表达标记物发育生物学家一直想找到一种可以直接在活组织或细胞生长和分化的任何时刻随时被检测到的细胞标记物（ｃ...; 黄涛; 关键词：绿色荧光蛋白基因表达标记物

选择剪接:一种基因表达的调控方式被引量：1: 1996年; 选择剪接是一种在转录后水平直接调节基因表达的调控方式,既可以直接在RNA水平上调节基因的表达过程,也可以改变基因的表达产物,对蛋白质的功能和活性进行调节。选择剪接在生物体发育过程中也起着重要的调控作用。; 黄涛沈岩; 关键词：基因表达

脆性X综合征基因在人胎盘组织中的两种选择剪接表达被引量：1: 1995年; 脆性X综合征是遗传性智力低下最常见的病因,与Xq27.3脆性位点相关.1991年在该脆性位点附近发现脆性X智力低下基因(fragile X mental retardation l,FMR1).FMR1基因突变和表达异常是脆性X综合征的直接原因.FMR1基因cDNA的长度为4.4kb,由17个外显子组成,有不同的mRNA剪接方式存在,含有B,C,D,E四个可变区,其中C可变区包括C1,C2两个亚可变区.Verkerk和Ashley等发现FMR1基因可能有12种不同的选择剪接形式,在成人胰脏、睾丸、白细胞、胎儿胰脏。; 黄涛沈岩范钰吴冠芸; 关键词：脆性X综合征胎盘组织基因

大鼠FMR1同源基因cDNA的克隆、测序与选择剪接的初步分析被引量：2: 1997年; 应用ＲＴ－ＰＣＲ方法，从新生大鼠脑组织总ＲＮＡ扩增大鼠ＦＭＲ１同源基因的ｃＤＮＡ片段，克降至ｐＵＣ１８质粒中进行序列分析．获得从终止密码子起共１６８１ｂｐ的编码序列，尚缺少约２００ｂｐ的５′序列．所克隆的这部分大鼠ＦＭＲ１ｃＤＮＡ，不含有对应于人ＦＭＲ１基因的外显子１２及外显子１７第一和第三剪接受点之间的序列，提示大鼠ＦＭＲ１基因也有选择剪接表达．同源性分析显示，大鼠ＦＭＲ１与小鼠ＦＭＲ１基因的同源性为９７．７％，与人ＦＭＲ１基因的同源性为９４．９％；与小鼠ＦＭＲＰ（ＦＭＲ１蛋白）的氨基酸序列同源性为９８．４％，与人ＦＭＲＰ的氨基酸序列同源性为９７．９％．以大鼠ＦＭＲ１ｃＤＮＡ片段为探针检测到大鼠不同组织中ＦＭＲ１基因的选择剪接表达．上述结果为以大鼠为动物模型深入研究ＦＭＲ１基因功能奠定了基础．; 季红黄涛朱宁宁朱宁宁沈岩吴冠芸J-L.Mandel; 关键词：基因 FMR1基因 CDNA 分子克隆脆性X综合征

外周淋巴细胞FMR－1mRNA的检测: 1995年; 采用逆转录ＰＣＲ技术检测了人外周淋巴细胞ＦＭＲ－１ｍＲＮＡ表达。对１０名在临床筛查中被认为可能患有脆性Ｘ综合征的男性学生进行了检测，其中２例可疑男性样品中未检测出ＦＭＲ－１ｍＲＮＡ表达。ＤＮＡ印迹杂交和异常甲基化ＰＣＲ检测证实这２例患者同时伴有ＦＭＲ－１基因５＇ＣｐＧ岛异常甲基化和（ＣＧＧ）ｎ扩展。上述方法的建立为诊断脆性Ｘ综合征提供了一种新的分子生物学手段，并可用于ＦＭＲ－１基因表达研究。; 郑霖范钰黄涛朱宁宁沈岩吴冠芸; 关键词：FMR-1基因甲基化基因表达

FMR－1同源基因在大鼠脑发育过程中持续表达: 1995年; 以克隆的人ＦＭＲ－１ｃＤＮＡ片段为探针，进行ＲＮＡ印迹杂交，检测发育过程中大鼠脑组织ＦＭＲ－１同源基因的表达．结果显示从胚胎早期至出生后一个月该基因有持续表达，其中在胚胎发育晚期表达量较高，提示ＦＭＲ－１基因可能参与胎脑发育的调节．; 季红黄涛沈岩吴冠芸; 关键词：脑发育 FMR-1基因基因表达

FMR1基因结构与功能被引量：8: 1995年; ＦＭＲｌ基因无时空特异性地表达提示它具有管家基因性质，其正常表达对于每个细胞发挥正常的功能都是必不可少的，而与增殖过程和表型发生过程无关。ＦＭＲ１基因在某些组织的时空特异性表达又提示，它也是一种在发育过程起重要作用的调节基因，对于中枢神经系统、生殖系统及其它许多组织的正常发育是必不可少的，可能在细胞的迁移和分化过程中起重要的调控作用。ＦＭＲ１基因表达一种定位于胞浆中的ＲＮＡ结合蛋白ＦＭＲＰ。ＦＭＲＰ可能是一种转录后水平的调控因子，与胞浆中的ｍＲＮＡ结合，在ｍＲＮＡ的转录后加工、转运、翻译以及细胞内定位过程中起调控作用，能够特异性地调控多种下游基因，因而该基因的表达异常能够导致脆性Ｘ综合征所具有的广泛的病理学改变。; 黄涛沈岩吴冠芸; 关键词：脆性X综合征基因表达 FMR1基因

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黄涛