段雅倩
- 作品数：9 被引量：29H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家临床重点专科建设项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- p300介导高糖和甲基乙二醛糖化终产物致人系膜细胞氧化应激及纤维连接蛋白表达被引量：1
- 2013年
- 目的观察转录共激活子p300和蛋白激酶C(PKC)β2在高糖及甲基乙二醛糖化终产物(AGEs)诱导人系膜细胞(HMCs)活性氧(ROS)产生和纤维连接蛋白(FN)蛋白表达中的作用及相互关系。方法将培养的HMCs分为以下几组:①正糖组(NG)、高糖组(HG)、渗透压组(LG)、正糖+血清白蛋白组(BSA)、正糖+糖化终产物组(AGEs);②高糖+空载体组(HN)、高糖+PKCβ2转染组(PO)、高糖+PKCβ2抑制剂CGP53353组(PI)、糖化终产物+空载体组(AN)、糖化终产物+PKCβ2转染组(APO)、糖化终产物+PKCβ2抑制剂CGP53353组(API);③正糖+p300抑制剂组(NG+Gar)、高糖+p300抑制剂组(HG+Gar)、血清白蛋白+p300抑制剂组(BSA+Gar)、糖化终产物+p300抑制剂组(AGEs+Gar),以上各组细胞均培养2 d。荧光显微镜及荧光酶标仪检测细胞内ROS水平;Western blot法检测各组细胞p300、PKCβ2及FN蛋白表达。结果 HG组及AGEs组p300、PKCβ2蛋白表达及ROS水平增加,分别较NG组及BSA组增加了1.04倍、1.26倍、0.78倍和1.45倍、1.07倍、0.71倍(P<0.05)。同HG组及AGEs组相比,HG+Gar组及AGEs+Gar组ROS水平显著降低,分别为HG组及AGEs组的43%和39%(P<0.05)。PO组及APO组分别较HG组和AGEs组p300、PKCβ2蛋白表达进一步上调,分别为HG组及AGEs组的1.19倍、1.73倍和1.23倍、1.69倍(P<0.05);PI组和API组p300、PKCβ2蛋白表达显著下调(P<0.05);HN组和AN组p300、PKCβ2蛋白表达分别较HG组及AGEs组差异无统计学意义;HG+Gar组及AGEs+Gar组p300、FN蛋白表达显著下降,分别为HG组及AGEs组的31%、43%和37%、29%(P<0.05)。结论高糖及MGO-糖化终产物通过诱导HMCs转录共激活子p300激活参与系膜细胞氧化应激水平上调及FN蛋白表达。
- 苏红周波段雅倩杜超
- 关键词：P300糖化终产物氧化应激
- miR-150在高糖致心肌肥大中的作用及机制
- 目的：转录共激活子p300在心肌肥大的病理过程中起到重要作用。然而，其表达调控机制尚不明确。本研究旨在探讨潜在调控p300表达的微小RNA(miRNA)miR-150在p300转录后调控和高糖诱导的心肌肥大中的作用。 ...
- 段雅倩
- 关键词：心肌肥大微小RNA糖尿病
- 转录共激活子p300及表观修饰在高糖致人系膜细胞代谢记忆中的汇聚作用被引量：3
- 2013年
- 目的以人系膜细胞(HMCs)作为体外模拟代谢记忆的研究对象,观察转录共激活子p300及组蛋白乙酰化蛋白H3(Ac-H3)、Ac-H4的表达规律,并探讨p300在其中的潜在汇集点作用。方法将培养的HMCs按以下分组处理:①高糖诱导代谢记忆模型,分为正糖组(NG,5.5mmol/L D-葡萄糖×2d)、渗透压组(LG,NG+20mmol/L L-葡萄糖×2d),高糖组(HG,25mmol/L D-葡萄糖×2d)、记忆组(M1、M2、M3组,25mmol/L D-葡萄糖×2d+5.5mmol/L D-葡萄糖×3、6、9d)、持续正糖组(NC,5.5mmol/L D-葡萄糖×9d)。②糖其化终产物记忆模型,分为正糖组(NG,5.5mmol/L D-葡萄糖×2d);正糖+AGEs组(AGEs,5.5mmol/L D-葡萄糖+250μg/ml AGEs×2d);AGEs记忆组(AGEs-M,5.5mmol/L D-葡萄糖+250μg/ml AGEs×2d+5.5mmol/L D-葡萄糖×3d);BSA组(NG+BSA,给予同浓度BSA对照)。③H2O2模拟氧化应激记忆模型,分为正糖组(NG,5.5mmol/L D-葡萄糖×30min);正糖+H2O2组(H2O2,5.5mmol/L D-葡萄糖+100μmol/L H2O2×30min);H2O2记忆组(H2O2-M,5.5mmol/L D-葡萄糖+100μmol/L H2O2×30min+5.5mmol/L D-葡萄糖×3d);正糖对照组(NG3,5.5mmol/L D-葡萄糖×3d)。④蛋白激酶C(PKC)β2激活记忆模型,分为正糖组(NG,5.5mmol/L D-葡萄糖×2d);高糖组(HG,25mmol/L D-葡萄糖×2d);记忆组(M,25mmol/L D-葡萄糖×2d+5.5mmol/L D-葡萄糖×3d);空载体记忆组(HN,25mmol/L D-葡萄糖+Ad5-null×2d+5.5mmol/L D-葡萄糖×3d);PKCβ2激活记忆组(PO,25mmol/L D-葡萄糖+Ad5-PKCβ2×2d+5.5mmol/L D-葡萄糖×3d);PKCβ2抑制剂记忆组(PI,25mmol/L D-葡萄糖×2d+10μmol/L CGP53353+5.5mmol/L D-葡萄糖×3d)。采用二氢二氯荧光素(DCFDA)及酶标仪检测细胞内活性氧(ROS)的表达。Western blotting检测各组细胞p300、Ac-H3和Ac-H4及PKCβ2蛋白的表达水平。结果 HG组p300、Ac-H3和Ac-H4蛋白表达增加,分别较NG组增加了1.15倍、0.93倍和0.87倍(P<0.05),同时伴有PKCβ2蛋白及胞内ROS水平上调;M1、M2、M3组p300、Ac-H3、Ac-H4、PKCβ2蛋白水平及ROS表达水平与NG组比较仍显著升高,即使M3组亦较N
- 苏红周波段雅倩杜超
- 关键词：代谢记忆氧化性应激糖基化终产物
- 基于血浆醛固酮/肾素浓度比的联合策略在原发性醛固酮增多症中的筛查价值被引量：13
- 2015年
- 目的探讨最适于临床筛查原发性醛固酮增多症(PA)的方案。方法收集疑诊PA的病例303例,分为PA组、原发性高血压组和无功能性肾上腺皮质意外瘤组。利用血浆醛固酮/肾素浓度比值(ARR)绘制受试者工作特征(ROC)曲线,获取最佳诊断界值。进一步对目前临床关于PA筛查的方案进行对比分析。结果立位ARR的ROC曲线下面积明显高于卧位ARR及立、卧位血浆肾素、醛固酮。立位ARR诊断PA的最佳诊断界值[(pg/ml)/(μIU/ml)]为43.45,两次立、卧位试验中至少一次立位ARR>43.45时诊断PA的灵敏度最高,达0.94;两次立位ARR均<43.45时,其除外PA的灵敏度为0.74,特异度为0.94,准确度为0.81。结论在高危人群中筛查PA,推荐行两次立位血浆肾素、醛固酮浓度测定,在两次中只要有一次立位ARR>43.45即需考虑PA可能,并进一步进行确诊试验以避免漏诊。
- 孙明芳杨珊何小群周波李启富段雅倩
- 关键词：原发性醛固酮增多症筛查试验
- 代谢性胰岛素抵抗对肥胖大鼠心肌缺血/再灌注耐受性的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨代谢性胰岛素抵抗(Insulin resistance,IR)对肥胖大鼠心肌缺血/再灌注(Myocardial ischemia/reperfusion,MI/R)耐受性的影响。方法将Wistar大鼠随机分为对照组(Cont组)、罗格列酮组(Rosi组)和肥胖组(Obes组),Rosi组给予高脂饲料喂养的同时灌胃罗格列酮,Obes组给予高脂饲料喂养,并灌胃相同剂量的生理盐水。检测各组大鼠血浆中各项生化指标、心肌组织总甘油三酯(Triglyceride,TG)的含量及胰岛素敏感性。制备大鼠MI/R模型,并取Obes组和Rosi组大鼠,输注磷脂酰肌醇-3羟基激酶(PI3K)抑制剂渥曼青霉素,分别记为Obwt组和Wort组,检测各组大鼠心脏血流动力学指标的变化;伊文蓝染色测定大鼠心肌缺血面积,2,3,5一氯化三苯四氮唑(TTC)染色测定心肌梗死面积;原位末端标记凋亡细胞(TUNEL)法分析心肌细胞凋亡;Western blot法检测心肌中PKB/Akt和GluT-4蛋白的表达水平。结果 MI/R前,与Cont组相比,Obes组大鼠心肌TG及血浆中游离脂肪酸(Free fatty acid,FFA)、TG和空腹胰岛素(Fasting insulin,FINS)水平均显著升高(P<0.05或P<0.01),葡萄糖输注率(Glucose infusion rate,GIR)显著降低(P<0.01);而Rosi组大鼠血浆中TG、FFA和FINS水平较Obes组显著降低(P<0.01),GIR显著升高(P<0.01)。与Cont组相比,Obes组大鼠MI/R后,心功能恢复差,梗死面积扩大,心肌细胞凋亡增多,并伴PKB/Akt和GluT-4表达水平下降;Rosi组与Obes组比,MI/R恢复能力增强,梗死面积缩小,细胞凋亡减少,PKB/Akt和GluT-4表达水平增加。Wort组大鼠可逆转Rosi组的抗凋亡作用,下调PKB/Akt和GluT-4的表达水平;而Obwt组大鼠MI/R后,心功能、心肌细胞凋亡数及PKB/Akt和GluT-4表达水平与Obes组相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论肥胖大鼠心肌IR增加了MI/R时的易损性,与PI3K-PKB-GluT-4信号通路下调、心肌细胞凋亡增加及心功能恶化密切相关。
- 段雅倩周波孙芳毛锦宁吴豪杰陈运贞张素华
- 关键词：肥胖胰岛素抵抗
- 二甲双胍下调ROS-PKCβ_2通路对高糖波动加重的人内皮细胞损伤的干预作用被引量：2
- 2011年
- 目的观察波动性高糖与持续性高糖对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)血管内皮生长因子(VEGF)、血管细胞黏附分子1(VCAM-1)mRNA表达的影响,探讨活性氧(ROS)和蛋白激酶Cβ2(PKCβ2)在其中的作用及二甲双胍的干预作用。方法将培养的HUVECs分为7组:①正常糖(NG,5mmol/L D-葡萄糖)组,②正常糖空载体转染组(NN,NG+Ad5-null)组,③持续性高糖(SHG,15mmol/L D-葡萄糖)组,④波动性高糖(I HG,5mmol/L D-葡萄糖与25mmol/L D-葡萄糖每24h更换一次)组,⑤波动性高糖+PKCβ2转染(I HGB,I HG+Ad5-PKCβ2)组,⑥波动性高糖+二甲双胍(I HGM,I HG+20μmol/L二甲双胍)组,⑦波动性高糖+选择性的PKCβ2抑制剂CGP53353(I HGI,I HG+10μmol/L CGP53353)组或波动高糖+α-硫辛酸(ALA)(I HGA,I HG+62.5μmol/L ALA)组。RT-PCR法检测细胞VEGF、VCAM-1 mRNA表达水平,荧光酶标仪测定细胞ROS水平,激光共聚焦显微镜下检测PKCβ2蛋白表达和转位情况。结果与NG组比较,NN组的空载体转染对细胞无明显生物学意义(P>0.05)。SHG组和I HG组VEGF、VCAM-1mRNA表达及ROS水平增加,分别为NG组的2.16倍、2.30倍、1.75倍和2.57倍、3.32倍、3.20倍,且I HG组增加更明显(P<0.05)。SHG组和I HG组PKCβ2核转位激活,定量分析显示胞质/胞核荧光强度比值较NG组分别下降了21%和26%,且I HG组下降更加明显(P<0.05);I HGB组PKCβ2核转位较I HG组更显著,胞质/胞核荧光强度比值为I HG组的75%,同时I HGB组VEGF、VCAM-1 mRNA表达以及ROS水平亦显著增高,分别为I HG组的1.38倍、1.45倍和1.25倍(P<0.05)。I HGM组VEGF、VCAM-1mRNA表达及ROS水平均较I HG组明显降低,为I HG组的44%、53%和39%;I HGM组PKCβ2核转位亦较I HG组减少,胞质/胞核荧光强度比值为I HG组的1.20倍(P<0.05)。结论波动高糖较持续高糖更易损伤HUVECs,该作用与ROS-PKCβ2活化密切相关;二甲双胍可通过抑制PKCβ2激活,减轻波动性高糖诱导的HUVECs损伤。
- 陈芳芳周波林雪波段雅倩孙芳
- 关键词：氧化性应激脐静脉内皮细胞二甲双胍
- 非诺贝特通过阻断局部醛固酮系统抑制短期波动高糖诱导的人系膜细胞活性氧及癌胚纤维连接蛋白的产生被引量：1
- 2012年
- 目的观察短期波动高糖与持续高糖对人系膜细胞（HMCs）癌胚纤维连接蛋白（Oilcofetal FN）mRNA、活性氧（ROS）表达的影响，探讨局部醛固酮系统在其中的作用及非诺贝特的干预作用。方法将培养的HMCs分为8组：正糖组（NG）、渗透压波动组（0F）、平均葡萄糖负荷组（MGL）、持续高糖组（SHG）、波动高糖组（IHG）、波动高糖＋依普利酮组（IHGE）、波动高糖＋非诺贝特组（IHGF）、正糖＋非诺贝特组（NGF），以RT—PCR法检测醛固酮合酶（CYP11B2）、11β-羟基类固醇脱氢酶Ⅱ（11βHSD2）、oncofetal FN mRNA表达水平，Western—blot检测CYP11B2蛋白表达水平。放射免疫法分析细胞培养液醛固酮水平。激光共聚焦显微镜观察盐皮质激素受体（MR）蛋白表达及转位，荧光显微镜和荧光酶标仪测定细胞内ROS水平。结果（1）与NG组对比，MGL、SHG和IHG组诱导人系膜细胞CYP11B2 mRNA及其蛋白分别为NG组的2．41倍、3．63倍、4．45倍和1．83倍、2．15倍、2．78倍．MGL、SHG和IHG组细胞上清液醛固酮含量分别为NG组的1．49倍、2．04倍、2．54倍，且IHG组增加更明显（P值均〈0．05），高糖可促进MR蛋白发生核转位，定量分析示MGL、SHG和IHG组胞浆／胞核荧光强度较正糖组分别降低15％、38％、53％，且IHG组下降更加明显（P值均〈0．05）。（2）与NG组对比，MGL、SHG、IHG刺激诱导人系膜细胞oncofetal FN mRNA及ROS表达上调，分别为NG组的1．54倍、2．31倍、3．65倍和1．26倍、1．91倍、2．48倍，IHG组作用更显著（P值均〈0．05），IHGE、IHGF组表达oncofetal FN mRNA及ROS较IHG组分别下降54％、53％和45％、39％（均P〈0．05）。（3）与IHG组比较，IHGF组CYP11B2mRNA及蛋白水平分别下降74％和59％，培养液醛固酮水平下降50％，MR蛋白胞浆／胞核荧光强度比值为IHG组的1．88倍（均P〈0．05）。结论短期波动高糖诱导HMCs表达onc
- 杜超周波段雅倩苏红
- 关键词：醛固酮系统非诺贝特
- 贝叶斯判别分析在原发性醛固酮增多症诊断中的价值研究被引量：4
- 2015年
- 目的探讨贝叶斯判别分析在诊断原发性醛固酮增多症中的价值。方法收集2008年7月至2013年12月近5年重庆医科大学附属第一医院疑诊原发性醛固酮增多症(原醛)病例321例,分为原发性醛固酮增多症组和原发性高血压组。利用贝叶斯判别函数获取原醛分类函数系数及原醛后验概率,根据受试者工作特征曲线(ROC),获取最佳切点。进一步对此法及立位血浆醛固酮/肾素浓度比值(ARR)在原醛筛查中的价值进行对比。结果原醛后验概率为0.34时,其诊断原醛的灵敏度和特异度最高,分别为0.84、0.84,立位ARR切点取43.45时灵敏度和特异度达最高,分别为0.88、0.76,原醛后验概率的ROC曲线下面积为0.911(0.870-0.951),大于立位ARR曲线下面积0.893(0.845-0.941)。结论贝叶斯判别分析诊断原醛的价值优于立位ARR。
- 杨珊周波何小群传丰宁李启富段雅倩严巨萍
- 关键词：原发性醛固酮增多症
- 醛固酮自分泌环在高糖致人系膜细胞损伤中的作用被引量：5
- 2012年
- 目的研究高糖环境下人系膜细胞(HMC)中醛固酮自分泌环及活性氧(ROS)、癌胚纤连蛋白(FN)表达水平的变化,进一步探讨醛固酮自分泌环与ROS、癌胚FN mRNA表达的关系。方法常规培养HMC,取对数生长期细胞分为5组:正糖组(5mmol/L D-葡萄糖),渗透压对照组(5mmol/L D-葡萄糖+20mmol/L L-葡萄糖),正糖+依普利酮组(5mmol/L D-葡萄糖+10μmol/L依普利酮),高糖组(25mmol/L D-葡萄糖),高糖+依普利酮组(25mmol/L D-葡萄糖+10μmol/L依普利酮)。采用RT-PCR法检测醛固酮合酶(CYP11B2)、11β-羟基类固醇脱氢酶Ⅱ(11βHSD2)、癌胚FN mRNA表达水平,Western blotting检测CYP11B2蛋白表达水平,放射免疫法分析细胞培养液中醛固酮水平,通过激光共聚焦显微镜观察盐皮质激素受体(MR)蛋白表达及转位情况,荧光显微镜和荧光酶标仪检测细胞内ROS水平。结果与正糖组比较,高糖组HMC细胞CYP11B2 mRNA及蛋白表达上调,ROS和癌胚FN mRNA表达亦上调,培养液中醛固酮浓度升高(P<0.05)。高糖可促进MR蛋白发生核转位,定量分析显示高糖组胞质/胞核荧光强度比值较正糖组降低30%(P<0.05)。与高糖组比较,高糖+依普利酮组ROS及癌胚FN mRNA表达下调(P<0.05)。结论高糖负荷可通过激活HMC局部醛固酮自分泌环而导致HMC损伤。
- 杜超周波段雅倩苏红
- 关键词：肾小球系膜细胞醛固酮自分泌环纤连蛋白类
