宋增璇
- 作品数：56 被引量：122H指数：6
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市科技发展战略研究计划项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 噬菌体展示抗体微型文库的构建被引量：1
- 2006年
- 用噬菌体展示技术构建抗神经钙粘连素(N-cadherin,N-cad)分子胞外结构域、CD34分子胞外结构域及AC133分子的噬菌体展示单链抗体库。将3种分子分别表达于噬菌体表面,再以此噬菌体免疫BALB/c小鼠,提取脾总RNA,RT-PCR扩增抗体重、轻链基因cDNA并插入噬菌体表达载体,构建分别抗N-cad分子胞外结构域、CD34分子胞外结构域及AC133分子的噬菌体表达文库。然后对文库的库容量、多样性、滴度及表达能力进行鉴定。结果显示,用噬菌体展示的3种分子免疫小鼠获得成功,所构建抗体文库的库容量、多样性、滴度及表达能力均能满足进一步筛选目的抗体基因的需要,为制备相应的特异性抗体奠定了基础。
- 黄跃龙李侠许静刘俊霞宋增璇卢光琇
- 关键词：CD34单链抗体
- KGla细胞免疫小鼠脾细胞scFv噬菌体展示文库的构建及其表达被引量：9
- 2000年
- 目的 :用噬菌体展示技术构建KGla免疫小鼠的脾细胞scFv表达文库。方法 :用人髓系白血病细胞系KGla细胞免疫小鼠 ,取其脾细胞 ,RT PCR扩增VH和Vκ基因并克隆入噬菌体展示表达载体 ,构建scFv文库 ,并测定文库的库容量和BstN1酶切单个克隆分析文库的多样性。用KGla作为固相抗原 ,进行四轮吸附 洗脱 富集的筛选 ,SDS PAGE检验筛选后文库scFv的呈示表达。结果 :文库的库容为 3× 10 6cfu ,单个克隆的BstN1Ⅰ酶切图谱显示多样 ,提示文库的容量和多样性均能满足进一步筛选分离目的基因的需要 ,筛选后的文库能很好地表达外源scFv。结论
- 隋建华宋增璇佘鸣张丽艳沈德诚韩忠朝
- 关键词：噬菌体展示抗体库SCFV白血病
- 质粒克隆载体研究进展被引量：1
- 1997年
- 质粒克隆载体研究进展靳卫东宋增璇（中国医学科学院、中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室，天津３０００２０）关键词质粒克隆载体质粒是基因工程重要的载体之一。它是细胞内的共生型遗传因子，它能在细菌中垂直遗传并且赋予宿主细胞一些特殊表型。质...
- 靳卫东宋增璇
- 关键词：质粒克隆
- 骨髓基质细胞对造血的调节
- 宋增璇
- 关键词：骨髓造血系统造血干细胞细胞
- 人红细胞生成素基因在哺乳动物细胞内的稳定表达
- 1994年
- 通过构建pN_2-EPO逆转录病毒载体,转染PA317包装细胞,收集病毒上清液,转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO),经G-418筛选及克隆建立了三株能稳定分泌人红细胞生成素(EPO)的细胞系。
- 陈雪妮张丽艳宋丹英柳柏林李彬宋增璇
- 关键词：红细胞生成素逆转录病毒载体基因转染
- 造血细胞对寡聚核苷酸的摄取
- 1994年
- 本文以人类骨髓细胞为研究对象,采用短期孵育,单克隆抗体标记和流式细胞仪分析方法,观察了细胞对寡聚核苷酸的摄取。发现骨髓中的各种细胞摄取寡聚核苷酸的能力不同。增殖旺盛的CD33^+粒-单系祖细胞的摄取率高达89.4±3.0％,包括干细胞和部分祖细胞在内的CD34^+细胞群摄取率为47.7±7.2％。淋巴细胞对寡聚核苷酸的摄取显示高度异质性,以静止的成熟B细胞群摄取率较高。进一步分析发现成熟B细胞表面多有核苷酸受体,与其寡聚核苷酸摄取率相关。研究结果证明人类骨髓细胞通过多种机制摄取寡聚核苷酸。
- 宋增璇何一心杨少光
- 关键词：血细胞流式细胞仪分析
- 抗人纤维蛋白单克隆抗体重链和轻链可变区基因及其应用
- 本发明公开了抗人纤维蛋白单克隆抗体重链可变区基因和轻链可变区基因,由所述基因编码的多肽,含有所述基因的载体及所述的基因在制备血栓定位诊断试剂和溶血栓药物中的应用。
- 宋增璇
- 文献传递
- 人源化抗人纤维蛋白单链抗体-链亲和素融合蛋白的表达和功能被引量：1
- 2000年
- 目的 探索人源化抗人纤维蛋白单链抗体 链亲和素融合蛋白的表达和功能。方法 构建人源化抗人纤维蛋白单链抗体 (ScFv 8E5 )基因与链亲和素基因的重组表达载体 ,制备融合蛋白 ,ELISA观察其稳定性、与人及不同动物纤维蛋白的反应。结果 人源化融合蛋白可特异性识别人、大鼠、豚鼠纤维蛋白 ,同时有生物素的结合位点 ,且稳定性好 ,可耐受至少两周 4℃保存 ,数次反复冻融或一定时间的 37℃孵育。结论 此人源化融合蛋白适用于大鼠及豚鼠血栓病模型 ,是作临床前研究的有用材料。
- 李文平许静隋建华徐冬宋增璇
- 关键词：抗纤维蛋白人源化融合蛋白链亲和素单链抗体
- FLT3配基的研究及其进展被引量：1
- 1996年
- ＦＬＴ３配基的研究及其进展孙世华综述宋增璇审阅造血生长因子对造血的调控都是通过同靶细胞膜表面的特异受体相互作用影响靶细胞生长的。近几年研究表明，酪氨酸激酶受体及其配基在造血调控中起重要作用。由于配基的结合导致受体酪氨酸磷酸化及酪氨酸激酶的活化，从而传...
- 孙世华宋增璇
- 关键词：贫血造血生长因子配基再生障碍性贫血白血病
- 抗KG1a细胞噬菌体展示ScFv的筛选及鉴定被引量：8
- 2000年
- 目的 应用KG1a细胞 (髓系白血病细胞系 )筛选噬菌体抗体库 ,获得能以一定特异性结合KG1a细胞的单链抗体 (ScFv) ,克隆其基因并研究其对应抗原在不同细胞表面的分布。方法 用完整的KG1a细胞筛选一个经KG1a细胞免疫小鼠脾细胞的ScFv噬菌体抗体库 ,重复筛选 4轮 ;细胞ELISA鉴定了其中 96个克隆与KG1a细胞的结合反应 ;从 2 6个KG1a细胞ELISA阳性克隆中挑选了 3个克隆 ,进一步用免疫荧光染色、流式细胞仪分析其各自对应抗原在不同细胞表面的分布 ,并对其中2个克隆的ScFv编码基因进行序列测定。结果 流式细胞仪分析结果显示 ,3个克隆所识别的抗原均存在于不同白血病细胞表面 ,但比例分布不同 ,而 3个克隆之间又略有差异 ,其中 2个克隆的DNA序列测定结果显示其核苷酸序列和氨基酸顺序有所不同 ,均属小鼠免疫球蛋白同一可变区基因家族和亚群 ,重链可变区 (VH)属亚群Ⅱ、家族Ⅵ ,轻链可变区 (Vκ)属亚群Ⅲ、家族Ⅸ。结论 用完整细胞筛选噬菌体抗体库可有效分离细胞表面分子的抗体片段及其基因 ,这种方法对于筛选和获得此类难以分离纯化和未知的细胞表面分子的抗体具有良好的应用价值 ;用KG1a细胞筛选所得的抗体及其基因对于进一步研究和发现白血病细胞表面分子具有重要意义。
- 隋建华何一心许静宋增璇
- 关键词：噬菌体抗体库单链抗体表面分子
