- 日本血吸虫可溶性虫卵抗原对B细胞的活化作用及其机制的初步研究
- 2013年
- 目的:观察日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)是否能够诱导小鼠B细胞活化及其机制。方法:SEA和脂多糖(LPS)分别体外刺激小鼠脾脏CD19+B细胞,72 h后用流式细胞术分别检测B细胞表面CD80、CD86及CD40的表达和B细胞细胞周期的改变;用荧光染料CFSE分裂法检测B细胞增殖;用ELISA法检测培养上清中白介素(IL-)10、IL-6、γ干扰素(IFN-γ)和转化生长因子β(TGF-β)的水平。同时利用ERK、JNK、p38MAPK和NF-κB信号转导抑制剂检测B细胞分泌细胞因子水平的变化。结果:SEA与LPS组可以活化小鼠脾脏CD19+B细胞,使其表面高表达CD80、CD86和CD40;同时诱导S/G2期的B细胞比例显著增加,SEA可以诱导B细胞增殖。SEA与LPS能刺激脾脏CD19+B细胞分泌高水平的IL-10、IL-6。分别阻断NF-κB、ERK、JNK和p38MAPK信号转导通路后可以抑制B细胞IL-10和IL-6的分泌。结论:SEA可以上调小鼠脾脏B细胞表面共刺激分子表达、促进其增殖。同时,SEA可以通过NF-κB、ERK、JNK和p38MAPK信号转导通路刺激小鼠B细胞分泌细胞因子。
- 田芳胡雪莉魏慧刘浩陈瑾钱莉杨维平
- 关键词：日本血吸虫可溶性虫卵抗原B细胞信号转导通路
- 日本血吸虫虫源性抗原诱导效应性B细胞
- 2013年
- 目的观察日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)和可溶性成虫抗原(SWAP)诱导小鼠效应性B细胞分化情况。方法 SEA、SWAP和脂多糖(LPS)分别体外刺激小鼠脾脏单个核细胞和脾脏CD19+B细胞,72 h后采用流式细胞术检测CD19+IL 6+及CD19+IFNγ+细胞比例;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗原刺激后脾脏B细胞培养上清中IL 6和IFNγ水平。用SEA、SWAP、PBS分别和不完全弗氏佐剂混合免疫小鼠,每周1次,共3次,末次免疫后7 d取小鼠脾脏,流式细胞术检测CD19+IL 6+及CD19+IFNγ+细胞比例,用ELISA法检测培养上清中IL 6和IFNγ水平。结果 SEA与LPS可以体外诱导脾脏单个核细胞和脾脏B细胞分化为CD19+IL 6+B细胞(F=5.099,P<0.05;F=6.951,P<0.05),并刺激脾脏B细胞分泌IL 6(F=55.184,P<0.01);SEA免疫小鼠后,可以在体内刺激小鼠脾脏B细胞分泌IL 6(F=19.244,P<0.01),并诱导小鼠脾脏单个核细胞分化为CD19+IL 6+B细胞(F=14.904,P<0.05)。SWAP可以体外诱导脾脏单个核细胞分化为CD19+IFNγ+B细胞(F=3.277,P<0.05),但不能单独诱导脾脏B细胞分化为IFNγ+B细胞,也不能刺激脾脏B细胞分泌IFNγ;SWAP免疫小鼠后,可以在体内刺激小鼠脾脏B细胞分泌IFNγ(F=31.886,P<0.01),并诱导其分化为CD19+IFNγ+B细胞(F=49.873,P<0.01)。结论日本血吸虫SEA可以优势诱导小鼠脾脏单个核细胞分化为CD19+IL 6+B细胞,而SWAP可以优势诱导小鼠脾脏单个核细胞分化为CD19+IFNγ+B细胞,但依赖于其他免疫细胞的参与。
- 田芳胡雪莉刘浩魏慧杨维平段秋芳钱莉严华
- 关键词：日本血吸虫可溶性虫卵抗原
- 日本血吸虫可溶性虫卵抗原诱导B10细胞产生的研究
- 2013年
- 目的观察日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)与成虫抗原(SWAP)是否能够诱导小鼠调节性B细胞的产生。方法SEA、SWAP和脂多糖(LPS)分别体外刺激小鼠脾脏单个核细胞和磁珠分选后的脾脏CD19+B细胞,72h后用流式细胞术分别检测CD19+IL-10+细胞比例,和细胞表面CD80、CD86及CD40的表达,用ELISA法检测培养上清中IL-10的水平。体内实验用SEA、SWAP、PBS分别和不完全弗氏佐剂混合免疫小鼠,1次/周,共3次,末次免疫后7d取小鼠脾脏,流式细胞术检测CD19+IL-10+细胞比例,用ELISA法检测培养上清中IL-10的水平。结果 LPS与SEA体外均能显著诱导小鼠脾脏单个核细胞分化为CD19+IL-10+细胞,两者无显著差异,而SWAP组不能诱导小鼠脾脏单个核细胞分化为CD19+IL-10+细胞;SEA与LPS能够诱导脾脏CD19+B细胞表面高表达CD80、CD86和CD40,而SWAP不能诱导脾脏CD19+B细胞活化;SEA与LPS诱导脾脏CD19+B细胞分化为IL-10+细胞的比例也显著升高,同时能刺激脾脏CD19+B细胞分泌高水平的IL-10,两者无显著差异;而SWAP不能诱导小鼠脾脏CD19+B细胞分化为IL-10+细胞并分泌IL-10。SEA体内免疫小鼠后,小鼠脾脏单个核细胞分化为CD19+IL-10+细胞比例显著升高,并且能够分泌高水平的IL-10,而SWAP和PBS免疫组均不能诱导小鼠脾脏单个核细胞分化为CD19+IL-10+细胞并分泌IL-10。结论 SEA体外体内均能诱导小鼠产生分泌IL-10的B10细胞,并且在体外不依赖于脾脏其他免疫细胞的参与,而SWAP体外体内均不能诱导B10细胞的产生。
- 田芳胡雪莉杨维平钱莉魏慧刘浩潘兴元季明春
- 关键词：日本血吸虫SEA调节性B细胞
