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钱莉: 作品数：66 被引量：83H指数：6; 供职机构：扬州大学医学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>

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双表达外源性4-1BBL／CD86的k562细胞活化外周血淋巴细胞的研究: 目的:为肿瘤过继免疫治疗开发体外激活T细胞、NK细胞的高效途径,研究双表达外源性4-1BBL和 CD86的K562细胞刺激外周血淋巴细胞活化的能力。方法:采用分子克隆技术,分别将4-1BBL和CD86基因插入双表达载体p...; 龚卫娟曹正锋刘丹王丽珩钱莉季明春; 文献传递

从黑色素瘤荷瘤小鼠中分离纯化髓系抑制性细胞: 2014年; 目的从黑色素瘤荷瘤小鼠脾脏中分离得到CD11b+Gr-1+的髓系抑制性细胞(Myeloid derived suppressor cells,MDSCs)。方法给C57BL/6小鼠注射LPS或者小鼠黑色素瘤细胞株B16BL6后,取小鼠的脾脏细胞,检测其中CD11b+Gr-1+的MDSCs细胞的比例。通过流式细胞仪(flow cytometry,FCM)分选出CD11b+Gr-1+的细胞,培养24小时后,CBA(cytometric bead array)法检测其分泌IL-10的情况;提取CD11b+Gr-1+细胞的总RNA,利用RT-PCR的方法检测其表达IFN-β、TGF-β、iNOS、ARG-1和IDO的情况。结果与注射LPS相比,注射B16BL6细胞株的小鼠脾脏中CD11b+Gr-1+的MDSCs细胞的比例更高;利用FCM分选得到CD11b+Gr-1+的MDSCs,进一步鉴定发现其表达IL-10、IFN-β、TGF-β、iNOS、ARG-1和IDO。与先前报道的MDSCs的特征相一致。结论可从B16BL6荷瘤小鼠脾脏中获得高纯度的MDSCs用于实验研究。; 芮程磊秦宏超陈文艳薛冰川田芳龚卫娟季明春钱莉; 关键词：髓系抑制性细胞黑色素瘤脾脏

REV分离株囊膜糖蛋白基因的克隆及序列分析被引量：9: 2003年; 根据网状内皮组织增生症病毒 ( REV) SNV株 env基因的序列 ,设计并合成了 2对引物 ,利用该引物 ,以中国地方分离株 SD990 1、HA990 1前病毒基因组 c DNA为模板 ,通过 PCR技术 ,成功地从国内分离的 2株 REV毒株中扩增出env基因 ,并将其克隆到 p UCm-T载体中测序。将所得序列与 SNV株进行比较 ,分析其同源性。结果表明 :在核苷酸水平上 ,参考株 SNV株的 env基因与 2株中国分离株的同源性分别为 97.7%和 95 .0 % ;在氨基酸水平上 ,其同源性分别为 96.9%和 92 .7%。分析进化关系 ,HA990; 吉荣赵文明钱莉李余慰崔治中; 关键词：禽网状内皮组织增生症病毒囊膜糖蛋白基因克隆 REV

Bcr-abl融合基因片段的克隆及在原核细胞中的融合表达被引量：3: 2004年; 目的 :克隆和表达Bcr abl融合基因融合位点周围的基因片段。方法 :以慢性粒细胞白血病 (CML)K5 6 2细胞株总RNA作为模板 ,采用RT PCR方法扩增包含Bcr abl(b3a2 )融合位点周围的基因片段。将RT PCR产物按正确的阅读框架 ,定向克隆进pGEX 6P 1载体谷胱甘肽 S 转移酶 (GST)的下游 ,将重组质粒转化大肠杆菌BL2 1菌株 ,以 1.0mmol/LIPTG诱导Bcr abl融合基因片段的表达。结果 :原核细胞融合表达产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定 ,证实该融合蛋白为 4 2 0 0 0大小。用该表达产物免疫ICR小鼠 ,所制备的抗血清可与K5 6 2细胞特异性结合。结论 :原核细胞表达的p4 2 Bcr abl融合蛋白具有p2 10 Bcr abl融合蛋白的特异抗原性 ,为进一步实验研究奠定了基础。; 姜扬文季明春钱莉; 关键词：慢性粒细胞白血病 BCR-ABL融合基因原核细胞基因克隆

慢性粒细胞白血病bcr-abl融合基因克隆与真核细胞表达的研究被引量：7: 2003年; 目的　为研究慢性粒细胞白血病 (CML)的肿瘤基因疫苗 ,克隆和表达CML的bcr abl融合基因片段。方法　根据bcr abl(b3a2 )融合基因序列自行设计一对寡核苷酸引物 ,以CMLK5 6 2细胞株的总RNA为模板 ,通过RT PCR扩增包含bcr abl融合位点周围 4 5 0bp的基因片段 ,并将其克隆进pGEM Teasy载体。经序列测定证实其阅读框架正确后 ,将bcr abl融合基因片段正向插入真核细胞表达载体 pcDNA3 1。以脂质体介导重组质粒pcDNAbcr abl转染中国仓鼠卵巢 (CHO)细胞 ,用间接免疫荧光法 (IFA)检测基因表达情况。结果　成功构建了包含融合位点基因片段的bcr abl融合基因真核细胞表达载体 pcDNAbcr abl,pcDNAbcr abl转染的CHO细胞的免疫荧光强度高于K5 6 2阳性对照细胞。结论　bcr abl融合基因片段在真核细胞中能高效表达 ,pcDNAbcr abl真核细胞表达载体的构建为进一步研究bcr abl融合基因在CML防治中的作用奠定了基础。; 姜扬文季明春钱莉龚卫娟万兵; 关键词：慢性粒细胞白血病 BCR-ABL融合基因真核细胞肿瘤基因疫苗间接免疫荧光法

扩增片段长度多态性技术对淋球菌的基因分型被引量：2: 2003年; 目的 :评价扩增片段长度多态性技术 ( AFL P)分析对淋球菌分离株进行基因分型的能力。方法 :2 6株淋球菌分离株基因以 Eco RI和 Mes I酶切及 AFL P分析。结果 :同一地区的淋球菌分离株之间存在相当大的 DNA多态性。结论 :AFL P是鉴别淋球菌临床分离株有用而敏感的分子技术 ,有助于了解菌株来源。; 季明春钱莉陈红菊严华申厚凤; 关键词：淋球菌基因分型 AFLP

膜型IL-15联合RAE-1ε增强小鼠NK细胞的杀伤活性被引量：1: 2011年; 目的:探讨视黄酸早期转录因子1ε(retinoic acid early transcript 1ε,RAE-1ε)和膜型IL-15对小鼠NK细胞杀伤功能的影响。方法:前期研究以小鼠原B淋巴细胞株BaF3为基础构建了3株BaF3工程细胞株,即表达膜型IL-15的BaF3/mb15细胞、表达RAE-1ε的BaF3/RAE细胞和同时表达膜型IL-15和RAE-1ε的BaF3/mb15/RAE细胞。将γ射线灭活后的3株BaF3工程细胞株作为刺激细胞,分别刺激小鼠NK细胞。流式细胞术检测刺激后NK细胞表面分子的表达,胞内染色法检测NK细胞穿孔素和颗粒酶B的分泌,流式细胞术检测NK细胞对小鼠淋巴瘤YAC1细胞的杀伤活性。结果:与BaF3/mb15和BaF3/RAE细胞相比,BaF3/mb15/RAE细胞可有效上调NK细胞表面CD25、CD44、FasL和CD107a的表达,但对穿孔素和颗粒酶B的分泌没有明显刺激作用。当效靶比为20:1时,BaF3/mb15、BaF3/RAE和BaF3/mb15/RAE细胞刺激后NK细胞对靶细胞YAC1的杀伤率分别为(39.7±2.9)%、(45.3±2.3)%和(59.0±6.9)%,均高于BaF3组的(28.3±1.5)%(P<0.01),且BaF3/mb15/RAE组高于BaF3/mb15和BaF3/RAE组(P<0.05)。结论:膜型IL-15联合RAE-1ε可促进NK细胞活化并增强NK细胞的杀伤活性。; 钱莉陆家辉傅奕郑月娟佟大可龚卫娟潘兴元季明春; 关键词：NK细胞淋巴瘤

不忘办刊初心无悔编辑人生——记中国高校优秀科技期刊主编刘明寿: 2024年; 刘明寿从事科技期刊编辑工作40多年,不忘初心,践行服务宗旨。他在办刊中吃苦耐劳,深入读者、深入社会、深入市场,提供“全套服务”,获得个人成绩与期刊效益双丰收;在编校工作中一丝不苟,精益求精,多次获得各级表彰;在科研中善于观察,勤于思考,多角度研究编辑学,取得丰硕成果;在期刊策划中善于整合资源,规范运作,所办期刊堪称优秀;在学习中注重积累,博闻强识,潜精研思,不断提升综合素养。; 钱锋吴年华钱莉龚卫娟; 关键词：科技期刊策划

RAE+DC诱导的CD4+NKG2D+DX5-T细胞分泌TGF-β介导肿瘤免疫逃逸: 韩森蔺志杰钱杏杏肖炜明钱莉丁岩冰季明春龚卫娟

双表达外源性4-1BBL/RANTES的K562细胞活化外周血淋巴细胞的研究: 2007年; 目的探讨K562细胞表达外源性蛋白4-1BBL/RANTES后,对T细胞、NK细胞有无活化作用,为进一步构建人工抗原提呈细胞提供前提。方法采用分子克隆技术,分别将4-1BBL和RANTES基因插入双表达载体pVITRO-2,命名为pV4-1BBL-RANTES。经测序鉴定后,利用脂质体介导的转染及潮霉素筛选,获得稳定双表达4-1BBL、RANTES分子的K562细胞(K562/4-1BBL/RANTES)。经流式细胞仪(FACS)分选后,K562/4-1BBL/RANTES细胞用丝裂霉素C处理,与外周血淋巴细胞孵育24,FACS检测淋巴细胞表面活化性受体CD69的表达;对NK细胞同时检测了活化性受体NKG2D的表达情况。结果受K562/4-1BBL/RANTES细胞刺激后,CD3+T细胞、CD4+T细胞、γδT细胞和NK细胞的活化性受体CD69的表达与未受刺激前相比,均有明显上调;但与单纯K562细胞刺激组相比,无显著差异。另外,CD8+T细胞CD69的表达及NK细胞NKG2D的表达无明显变化。结论将4-1BBL和RANTES共表达于K562细胞,不具备活化淋巴细胞的效应。; 王丽珩张俊钱莉曹正峰龚卫娟季明春; 关键词：4-1BBL RANTES K562 活化

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