陈雯
- 作品数：12 被引量：26H指数：3
- 供职机构：扬州大学园艺与植物保护学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 江苏省扬州市水仙病毒检测鉴定与序列分析被引量：2
- 2019年
- 水仙属于石蒜科水仙属,是重要的观赏花卉之一。2016年-2017年,在江苏省扬州市采集的水仙上发现典型的花叶、条斑等病毒病症状。利用已报道的水仙病毒通用引物对疑似病样进行RT-PCR检测,结果表明,扬州采集到的3份病样上均能扩增到与预期大小相同的DNA片段。经克隆测序和序列分析发现,所得序列包含3种不同的类型,分别与水仙普通潜隐病毒Narcissus common latent virus(NCLV)、水仙退化病毒Narcissus degeneration virus(NDV)和水仙黄条病毒Narcissus yellow stripe virus(NYSV)有93%、98%和99%的相似性,表明江苏水仙受到了NCLV、NDV、NYSV 3种病毒侵染。这是江苏水仙上第一次发现NCLV、NDV、NYSV。在系统树中,NCLV可分为两个组,本研究所得NCLV-YZ与上海分离物位于同一组中;NDV也可分为两个组,本研究所得NDV与其他中国分离物均位于第二组;而NYSV具有很高的多样性,可分为4个组,本研究所得NYSV与其他部分中国分离物和日本分离物位于第一组。NCLV和NDV分组具有清晰的地理差异性,而NYSV受到地理隔离的影响不明显。
- 张坤陈雯甘海峰罗云建陈夕军贺振
- 雀麦花叶病毒外壳蛋白基因原核表达及抗血清制备
- 雀麦花叶病毒(Brome mosaic virus,BMV)寄主范围广泛,多为害禾本科、豆科等植物,因此,建立快速有效的检测方法对于BMV的防控有着重要意义。本研究依据BMV外壳蛋白(Coat protein,CP)基因...
- 甘海锋陈雯陈夕军张坤贺振
- 关键词：雀麦花叶病毒外壳蛋白原核表达抗血清
- 文献传递
- 我国水生蔬菜主要病害研究进展
- 近年来,水生蔬菜病害多发,严重影响产品的产量和品质,制约了水生蔬菜产业的持续健康发展.从病害类型、症状、病原物、发生分布和防治等方面,综述了中国栽培面积大、经济价值高的莲藕、慈姑、芡实、水芹、茭白、芋和荸荠7种水生蔬菜主...
- 陈雯陈夕军陈春峰刘娴李良俊贺振
- 关键词：水生蔬菜病害类型病害症状病原物
- 莲藕中甘薯潜隐病毒实时荧光定量PCR检测技术的建立及应用被引量：7
- 2020年
- 甘薯潜隐病毒莲藕分离物(sweet potato latent virus-lotus,SPLV-lotus)在江苏省莲藕产区普遍引起发病,并且该分离物序列与已报道的SPLV甘薯分离物存在较大差异。为进一步监测SPLV-lotus在莲藕上的发生情况,针对SPLV-lotus的CP基因设计并优化特异性引物QSPLV-lotus3-F/QSPLV-lotus3-R,通过优化引物浓度和退火温度条件,构建标准曲线,建立了SPLV-lotus实时荧光定量PCR(Real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测技术。该方法特异性强,可以快速检测出SPLV-lotus,灵敏度为普通PCR的100倍,可广泛应用于脱毒莲藕SPLV-lotus的精确检测。
- 贺振董婷婷吴伟文陈雯李良俊
- 关键词：莲藕实时荧光定量PCR
- 植物病毒混合侵染研究进展
- 2019年
- 混合侵染是病毒为害作物时存在的一种普遍现象,给农业生产带来严重威胁,并常造成重大的经济损失。目前,已报道了多种病毒混合侵染的相关研究。本文综述了近年来对植物病毒混合侵染现象以及内在机制的研究现状,从基因沉默抑制子、小RNA、进化博弈等方面探讨了影响植物病毒混合侵染的因素,以期为病毒病害的有效防控提供依据。
- 贺振甘海峰陈雯
- 关键词：植物病毒混合侵染进化博弈
- 雀麦花叶病毒外壳蛋白基因原核表达及抗血清制备被引量：3
- 2020年
- 雀麦花叶病毒(brome mosaic virus,BMV)为正义单链RNA病毒。BMV寄主范围广泛,在波兰等地均有发现(Trzmiel et al.,2015),大多危害禾本科、豆科、茄科等植物,感病植株常表现出褪绿、轻微花叶症状。因此,为减轻BMV造成的经济损失和丰富BMV的检测方式,本研究拟构建BMV的外壳蛋白(coat protein,CP)基因的原核表达载体,在大肠杆菌Escherichia coli中表达BMV的外壳蛋白,制备高特异性和高灵敏度的抗血清,以期用于BMV的有效检测与防治。
- 贺振甘海锋陈雯陈夕军张坤
- 关键词：雀麦花叶病毒外壳蛋白抗血清制备寄主范围花叶高特异性
- 扬州蚕豆病毒病的鉴定及野豌豆潜隐病毒M扬州分离物基因组克隆及其序列分析被引量：3
- 2020年
- 对田间疑似病毒侵染的蚕豆样品,提取总RNA,分离siRNA,建库并通过高通量测序,其结果经velvet拼接组装,经Blastn与NCBI比对分析,发现该样品感染4种病毒:野豌豆潜隐病毒M (vicia cryptic virus M,VCV-M)、野豌豆潜隐病毒(vicia cryptic virus, VCV)、紫云英矮宿病毒(milk vetch dwarf virus, MDV)和三叶草黄脉病毒(clover yellow vein virus, ClYVV)。其中,有14条VCV-M相关的contigs。RT-PCR扩增并拼接获得VCV-M-YZ基因组,其长度为3 434 nt,其5′-UTR和3′-UTR分别为142 nt和117 nt,各自形成与该属代表病毒南方番茄病毒(southern tomato virus, STV) 5′-UTR和3′-UTR相似的高级结构,且A+U含量均较高。VCV-M-YZ与已报道的VCV-M基因组序列一致性在98%以上。系统进化分析表明,VCV-M-YZ与已报道的VCV-M属于一个种,无明显的地理分布差异。本研究结果丰富了VCV-M群体的基因组遗传信息,为VCV-M的监测及深入研究提供了基础。
- 张坤徐红梅臧颖庄新建甘海峰陈雯贺振
- 关键词：核苷酸
- 快速灵敏的甘蔗线条花叶病毒免疫学检测体系的建立被引量：2
- 2020年
- 甘蔗花叶病广泛存在于我国甘蔗种植区,严重影响甘蔗产业的高质量发展。近年来甘蔗线条花叶病毒在蔗区肆虐,尽管针对其的血清学检测技术已经建立,但是快速、准确、高通量的检测方法亟待发掘。本研究制备了S CSMV CP的抗血清,特异性高,与引起甘蔗花叶病的另两种病原(高粱花叶病毒和甘蔗花叶病毒)间没有血清学交叉反应。基于该多克隆抗体,建立了直接抗原包被的ELISA、斑点杂交、Western blot和基于多抗的免疫试纸条检测技术。开发的免疫试纸条检测技术能快速、准确、高通量应用于田间病毒鉴定。本文提供了基于血清学的快速、准确、高通量,且便捷的甘蔗线条花叶病毒检测技术,有助于我国蔗区甘蔗花叶病的监测与防控。
- 张坤陈春峰徐红梅陈佳欢陈雯贺振
- 关键词：甘蔗花叶病
- 甘薯潜隐病毒莲藕分离物辅助成分-蛋白酶基因原核表达及抗血清制备
- 2022年
- 根据已报道的甘薯潜隐病毒莲藕分离物sweet potato latent virus-lotus(SPLV-lotus)核苷酸序列设计引物,采用RT-PCR从感病莲藕样品中扩增获得SPLV-lotus辅助成分-蛋白酶基因(HC-Pro),大小为1375 bp。通过序列测定和分析后,将其克隆到原核表达载体pGEX4T-1,转化大肠杆菌Rosetta(DE3),经IPTG诱导并纯化获得大小为74 kD的融合蛋白pGEX4T-1-HC-Pro^(SPLV-lotus)。SDS-PAGE结果显示,融合蛋白获得过量表达。以纯化蛋白为抗原免疫新西兰大白兔制备抗血清,采用ELISA和Western blot对抗血清效价和特异性进行检测,当HC-Pro抗血清稀释比为1∶256000时,ELISA显色后OD_(450)读数仍高于0.6,表明所制备抗血清合格;Western blot结果显示,在感染SPLV-lotus植株样品中仍能检测到单一目的条带。这些结果表明,制备的抗血清效价合格且可用于SPLV-lotus的特异性检测。
- 王凌琪董婷婷陈雯甘海锋徐小伟秦朗李良俊贺振
- 关键词：原核表达抗血清
- 水仙黄条病毒和水仙退化病毒的种群结构及遗传多样性特征被引量：2
- 2020年
- 为防控水仙黄条病毒(narcissus yellow stripe virus,NYSV)和水仙退化病毒(narcissus degen‐eration virus,NDV),于2017年4月在江苏省2个市采集24个水仙病样,通过逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-PCR,RT-PCR)检测,从6个水仙样品中获得与预期大小一致的核苷酸片段,通过克隆CP基因和序列分析,结合GenBank中已报道的相关序列对所获得的4条NYSV序列和2条NDV序列进行种群结构及遗传多样性分析。结果显示,仅在NYSV CP基因中发现4个重组位点;NYSV CP多样性程度很高,相似值高于75%,而NDV CP相似值高达96%;在系统发育树中,NYSV分离物被分为4组,NDV分离物被分为2组;日本NYSV分离物核苷酸多样性较高,为0.136,而NDV中国种群核苷酸多样性较高,为0.012;NYSV CP基因中II组与III组的遗传距离最高,为0.332,NDV中国分离物与日本分离物间的遗传距离差异明显,为0.104;NYSV中国种群与日本种群的遗传差异为0.166,存在一定的基因交流;NYSV与NDV的CP基因均处于负选择压力作用下。
- 甘海锋陈雯陈夕军张坤贺振
- 关键词：种群结构
