贺振
- 作品数：51 被引量：130H指数：7
- 供职机构：扬州大学园艺与植物保护学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学文化科学化学工程医药卫生更多>>
- 李属坏死环斑病毒扬州分离物CP基因的原核表达及抗血清制备
- 2023年
- 李属坏死环斑病毒(prunus necrotic ringspot virus,PNRSV)严重危害蔷薇科植物,在世界范围内普遍分布。为建立快速有效的PNRSV检测方法,依据PNRSV CP基因序列设计引物,并从桃叶片上扩增PNRSV-CP片段,将双酶切产物插入原核表达载体pET28a中,获得重组质粒pET28a-CP^(PNRSV),转化大肠埃希菌Rosetta菌株,IPTG诱导重组蛋白表达。SDS-PAGE电泳检测显示,在分子量约25 ku处有蛋白质条带,符合预期大小。镍柱亲和纯化PNRSV CP蛋白,以其纯化蛋白质免疫健康新西兰白兔,制备多克隆抗血清。Western blot、ELISA、Dot blot检测结果显示,制备的抗血清能检测到PNRSV CP基因在感病植物叶片中表达,而在健康植株中未检测到;制备的抗血清滴度稀释至1∶64000时,仍能与纯化蛋白质发生特异性反应。综上,制备的PNRSV抗血清特异性强、效价高,可用于PNRSV的快速检测。
- 王智磊纪开燕赵景奎丁诗文徐小伟秦朗张坤贺振
- 关键词：李属坏死环斑病毒原核表达抗血清
- 甘薯潜隐病毒莲藕分离物辅助成分-蛋白酶基因原核表达及抗血清制备
- 2022年
- 根据已报道的甘薯潜隐病毒莲藕分离物sweet potato latent virus-lotus(SPLV-lotus)核苷酸序列设计引物,采用RT-PCR从感病莲藕样品中扩增获得SPLV-lotus辅助成分-蛋白酶基因(HC-Pro),大小为1375 bp。通过序列测定和分析后,将其克隆到原核表达载体pGEX4T-1,转化大肠杆菌Rosetta(DE3),经IPTG诱导并纯化获得大小为74 kD的融合蛋白pGEX4T-1-HC-Pro^(SPLV-lotus)。SDS-PAGE结果显示,融合蛋白获得过量表达。以纯化蛋白为抗原免疫新西兰大白兔制备抗血清,采用ELISA和Western blot对抗血清效价和特异性进行检测,当HC-Pro抗血清稀释比为1∶256000时,ELISA显色后OD_(450)读数仍高于0.6,表明所制备抗血清合格;Western blot结果显示,在感染SPLV-lotus植株样品中仍能检测到单一目的条带。这些结果表明,制备的抗血清效价合格且可用于SPLV-lotus的特异性检测。
- 王凌琪董婷婷陈雯甘海锋徐小伟秦朗李良俊贺振
- 关键词：原核表达抗血清
- 参与式教学模式在植物病害诊断教学中的应用研究被引量：2
- 2019年
- 文章将参与式教学与研究型教学相结合,建立了基于参与式教学框架,结合网络教学平台、自带设备、虚拟现实等新技术的研究型教学模型。通过植物病害诊断课程教学,进行了具体的教学实践研究。结果表明,该教学模型切实可行,取得了较好的教学效果,为高等农业院校实践类专业研究型教学的开展提供了借鉴。
- 贺振陈夕军
- 关键词：参与式教学研究型教学师生互动
- 河南温县地黄上瓜类褪绿黄化病毒的鉴定及其CP序列分析
- 地黄（Rehmannia glutinosa Libosch.）为玄参科（Scrophulariaceae）多年生草本植物,其根部为传统中药材。地黄栽培中使用块根进行无性繁殖,易导致病毒病发生严重,从而严重影响地黄的产量...
- 庄新建郭枭丁诗文董卓倬贺振张坤
- 关键词：地黄高通量测序
- 地黄花叶病毒河南分离物的检测鉴定
- 地黄（Rehmannia glutinosa Libosch.）,又名生地,为玄参科（Scrophulariaceae）多年生草本植物,其根部可入药。地黄感染病毒后,其块根不能正常膨大,随着病症的加重,产量逐年下降,病毒...
- 郭枭庄新建丁诗文董卓倬贺振张坤
- 关键词：分离物
- 云南省甘蔗花叶病病原分子检测与鉴定
- 甘蔗花叶病是一种重要的世界性病害,广泛发生于世界各大甘蔗产区,给甘蔗生产带来严重为害。2009～2010年,在云南省甘蔗产区和国家甘蔗种质资源圃内采集到表现花叶症状的甘蔗样品120份,利用RT-PCR法对其病原进行了检测...
- 贺振李文凤黄应坤李世访
- 中国常见水稻病毒病鉴定方法研究进展被引量：6
- 2020年
- 水稻是我国主要的粮食作物之一,其生长发育经常受到各种病虫害的影响。其中,水稻病毒病经常造成水稻的严重减产甚至绝收,而水稻病毒病的防治主要是通过筛选高抗品种,但是筛选高抗品种的过程比较复杂,要及时检测田间水稻和介体昆虫的带毒情况,并且应尽早清理发病的水稻植株,灭杀田间介体昆虫来降低病毒危害。因此,快速、灵敏、简便、准确的检测水稻病毒和介体昆虫带毒情况对预测病害的流行与病害防治非常重要。通过对已发表文章中水稻病毒病的发病症状、病毒粒子形态及检测方法进行了整理、归纳和总结,从而让广大植保工作者能在田间快速准确地识别病毒病害,并能迅速采用相应的方法进行简单快捷的检测。该研究对水稻病毒病的预测预报、田间防控提供了科学依据。
- 庄新建徐红梅甘海峰贺振刘芳张坤
- 关键词：水稻病毒病症状分子检测免疫学检测
- 雀麦花叶病毒外壳蛋白基因原核表达及抗血清制备被引量：3
- 2020年
- 雀麦花叶病毒(brome mosaic virus,BMV)为正义单链RNA病毒。BMV寄主范围广泛,在波兰等地均有发现(Trzmiel et al.,2015),大多危害禾本科、豆科、茄科等植物,感病植株常表现出褪绿、轻微花叶症状。因此,为减轻BMV造成的经济损失和丰富BMV的检测方式,本研究拟构建BMV的外壳蛋白(coat protein,CP)基因的原核表达载体,在大肠杆菌Escherichia coli中表达BMV的外壳蛋白,制备高特异性和高灵敏度的抗血清,以期用于BMV的有效检测与防治。
- 贺振甘海锋陈雯陈夕军张坤
- 关键词：雀麦花叶病毒外壳蛋白抗血清制备寄主范围花叶高特异性
- 3种生物源物质对番茄的促生与防病作用被引量：4
- 2017年
- 将S-诱抗素、寡聚糖和有机肥稀释成不同浓度梯度,进行浸种、催芽与喷施番茄植株和果实处理,研究其对番茄的促生和防病作用。结果表明:浸种处理番茄种子,除高浓度S-诱抗素(稀释倍数<2 500倍)对番茄的出芽率以及胚根、胚芽的伸长有明显抑制作用外,其他处理均对番茄有一定的促进作用。叶面喷施生物源物质,可有效提高番茄苗的株高、鲜重和叶绿素含量,促进番茄植株体内防御酶活性的增加,导致抗性相关物质含量的变化。生物源物质喷施番茄植株表面48 h后,其体内抗性相关基因PAL基因和β-1,3-葡聚糖酶基因的表达量均明显上调。防效测定表明,间隔24 h,连续喷施2次生物源物质,可有效降低番茄果实表面灰霉病病斑的扩展,但对苗期番茄灰霉病的防效较差;若将生物源物质与生防放线菌5X4配合使用,可明显提高防治效果。
- 张璐张孝然陈夕军陈孝仁贺振魏利辉黄奔立
- 关键词：番茄灰霉病防病促生
- 江苏省建兰齿兰环斑病毒的鉴定和遗传多样性分析被引量：5
- 2019年
- 为防控江苏省建兰上的齿兰环斑病毒(Odontoglossum ring spot virus,ORSV),采用酶联免疫吸附反应(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)和反转录-聚合酶链锁反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)对采自江苏省扬州市的16份具有典型感染ORSV病害症状的建兰叶片样品进行检测鉴定,并结合GenBank中已报道的相关序列对其进行多样性和系统发育树分析。结果显示,扬州市建兰上ORSV检出率高达100%;所获得的ORSV分离物与GenBank中其它141个分离物的核苷酸序列一致率均在94%以上,所有ORSV分离物只能形成1个分组,且组内多样性水平低,不具备典型的寄主和地理特异性;6个ORSV种群间差异较小,种群多态性均较低,其中ORSV印度尼西亚种群的种群多态性最高,为0.025,ORSV德国种群和ORSV印度尼西亚种群之间的遗传距离最高,为0.0244。表明不同地区、不同寄主种群ORSV分离物的遗传差异很小,种群内不同分离物有很高的相似性。
- 吴伟文贺振刘娴李良俊
- 关键词：建兰齿兰环斑病毒系统发育分析
