杨海波
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 供职机构：广西大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：南宁市科学研究与技术开发计划项目广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学理学更多>>
- 复合诱变选育葡萄糖耐受型凝胶多糖高产菌株
- 2018年
- 凝胶多糖是一种不溶于水的线性β-1,3-葡聚糖,具有优良的成胶性能和流变特性。凝胶多糖已经在食品方面有了广泛应用,并且在制药、免疫等领域也有很好的应用前景。葡萄糖是凝胶多糖工业发酵生产的主要碳源,但是培养基中高浓度的葡萄糖会对菌体生长和多糖发酵产生一定的抑制作用。通过遗传突变选育葡萄糖耐受型凝胶多糖高产菌株,可以简化生产工艺,提高产率。本文以放射形土壤杆菌Agrobacterium radiobactersp.FD3-5为出发菌株,通过紫外线、硫酸二乙酯(DES)和常压室温等离子体(ARTP)交替复合诱变,在含有高浓度葡萄糖的苯胺蓝平板培养基上筛选得到高产菌株sp.A-15,其凝胶多糖产量比出发菌株提高了114.6%。结果表明,本文复合诱变方法对遗传改造放射形土壤杆菌与产多糖相关的代谢途径有较好效果。所得耐葡萄糖突变株可以作为遗传材料,值得将来进一步从分子遗传学角度研究其耐葡萄糖机理,并为深入研究凝胶多糖代谢调控机制及工业生产指导提供帮助。
- 谢晓旭侯媛媛仝秋平李文强杨海波朱萍梁海秋周河治杨辉
- 关键词：凝胶多糖复合诱变高浓度葡萄糖
- 重组耐热融合型左聚糖蔗糖酶的表达优化
- 2023年
- 为提高重组耐热融合型左聚糖蔗糖酶(TPS-SacB-T305A)在大肠杆菌中的表达量,在单因素条件优化的基础上,将重组耐热融合型左聚糖蔗糖融合酶的水解活力(OD_(540nm))作为响应值R进行Box-Behnken实验。所得优化条件为:接种量3.0%(v/v),诱导时间为20 h,IPTG浓度为0.9 mmol/L,诱导温度为23℃,此时响应值R=1.33。利用此优化条件在摇瓶中发酵产重组耐热融合型左聚糖蔗糖酶,经破细胞提取粗酶液,其水解活力的均值达123 U/mL,比单因素优化结果提高了28.65%。本研究为该新型重组酶的后续应用性质和耐热机理的深入研究提供了实验材料和研究基础。
- 黄叶梅杨海波郭晓磊李蕾赵资杨辉
- 关键词：耐热响应面
- 樟芝产生三萜类化合物的液体培养条件的响应面法优化被引量：2
- 2019年
- 樟芝(Antrodia cinnamomea)是一种非褶菌目、多孔菌科的多年生蕈菌类,樟芝子实体中含有多种生理活性物质包括三萜类化合物,但野生樟芝只生长在台湾特有的牛樟树树干腐朽的心材内壁和枯死倒伏的牛樟树表面,生长极其缓慢,很难获得,价格昂贵。本研究的目的是通过液体培养樟芝的菌丝体以产生三萜类化合物,用响应面法优化了樟芝产生三萜类化合物的液体发酵条件。首先对樟芝的液体发酵的培养基成分及培养条件进行了单因素优化,研究发现樟芝液体发酵产生三萜类化合物的最佳碳源和氮源分别为葡萄糖和酵母提取物,最佳浓度分别为100 g/L和9 g/L,优化的培养基配方为(g/L):葡萄糖100.0,酵母提取物9.0,Mg SO4·7H2O 0.5,KH2PO41.0。优化的培养条件为:初始pH值6.0,温度28℃,接种量10%(v/v),摇床转速180 r/min。在此基础上,用响应面法对樟芝液体发酵产生三萜类化合物影响最大的三个因素即碳源、氮源和培养温度进行了优化,结果优化的三种因素条件为:葡萄糖104.71 g/L,酵母提取物9.93 g/L,温度28.42℃。用优化的培养条件液体培养樟芝,其三萜类化合物的产量达到391.45 mg/L,比优化前的产量223.39 mg/L提高了75.23%,为进一步研究液体培养樟芝产生三萜类化合物奠定了基础。
- 任钰郭昊杨海波杨海波
- 关键词：樟芝三萜类化合物液体发酵响应面法
- 苯胺蓝比色法测定凝胶多糖含量的研究
- 2017年
- 利用苯胺蓝与凝胶多糖的β-1,3-D糖苷键特异性结合的原理,建立苯胺蓝比色法快速特异性测定凝胶多糖含量的方法。优化测定方法的样品制备、反应体系、温度和测定条件,比较分析各种多糖对测定结果的影响。将市售凝胶多糖标品溶液与苯胺蓝在碱性条件下35℃水浴30min,测定OD550值,得到R2=0.99788的标准曲线,检测浓度为0.05%-0.1%。从发酵液中提取凝胶多糖制作标准曲线,测定发酵液中凝胶多糖含量,与提取称重法比较其平均相对误差为4.98%。该方法克服目前常用的苯酚硫酸法、刚果红显色法测定凝胶多糖特异性差的缺点,又比提取称重法简单快速,对于跟踪发酵过程中凝胶多糖产量变化趋势进而更好地进行过程控制有很重要的意义。
- 李文强汪其林杨海波朱萍梁海秋周河治杨辉
- 关键词：凝胶多糖特异性
