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牛召姗
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
供职机构:
青岛农业大学
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相关领域:
农业科学
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合作作者
王文明
青岛农业大学
董雅娟
青岛农业大学
宋少康
青岛农业大学
柏学进
青岛农业大学
杨莉
青岛农业大学
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作者
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赵仕全
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刘玮
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杨莉
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柏学进
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宋少康
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董雅娟
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王文明
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牛召姗
传媒
1篇
中国兽医学报
年份
1篇
2012
共
1
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利用RNAi抑制牛骨髓间充质干细胞中朊蛋白基因(PRNP)的表达
被引量:1
2012年
利用RNAi技术,根据牛源PRNP基因cDNA设计3段siRNA序列和1个阴性对照序列,分别将其连接到RNA干扰载体pRNAT-U6.1/Neo上构建成shRNA载体,并将shRNA载体转染牛骨髓间充质干细胞(BMSC);通过Real-time PCR和Western Blotting筛选抑制效果最佳的载体;并用800mg/L G418对转染最佳载体的细胞进行药物筛选。结果显示:成功构建了3个靶向shRNA载体和1个阴性对照shRNA载体;转染后48h在荧光镜下检测各组均可观察到绿色荧光的表达;Real-time PCR和Western Blotting结果显示,3个靶向shRNA载体在不同时间段均在一定程度上下调了PRNP mRNA的表达,抑制了朊蛋白PrPC的生成,得到了1个最佳干扰载体sh3;通过药物筛选出了稳定转染的细胞单克隆。本研究获得了1个有效抑制朊蛋白基因表达的shRNA载体,并筛选出稳定转染的细胞单克隆,上述结果可为抗疯牛病体细胞核移植提供供体细胞。
宋少康
董雅娟
柏学进
王文明
刘玮
牛召姗
赵仕全
杨莉
关键词:
PRNP
BMSC
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