宋少康
- 作品数：7 被引量：3H指数：1
- 供职机构：青岛农业大学更多>>
- 发文基金：山东省自主创新成果转化重大专项项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 布莱凯特黑牛PDSS1基因单核苷酸多态性分析被引量：2
- 2013年
- 为研究布莱凯特黑牛PDSS1(decaprenyl diphosphate synthase subunit 1)基因与肉质性状的相关性,采用PCR-SSCP技术对96头布莱凯特黑牛进行单核苷酸多态性检测。经PCR-SSCP检测及克隆测序发现,布莱凯特黑牛PDSS1基因各扩增片段中,P4表现为AA、AB、BB 3种基因型,P9表现为CC、CD 2种基因型,且各存在1个SNP位点:第4个外显子122bp处发生A→G的碱基突变,并引起相应氨基酸的改变(N156S);第11个外显子6bp处发生C→T的碱基突变,但未引起氨基酸的改变。经肉质性状关联性分析发现,AA、AB、BB不同基因型间差异不显著(P>0.05),但AB型的综合肉质指标较好。研究表明,布莱凯特黑牛PDSS1基因各外显子核苷酸序列的稳定性极高;外显子4内的碱基突变可能会引起PDSS1蛋白质空间结构及功能的改变,但与肉质性状相关性不显著。
- 杨莉董雅娟柏学进牛召珊宋少康赵仕全张新浩
- 关键词：单核苷酸多态性肉质性状
- RNAi抑制牛朊病毒基因表达的相关试验研究
- 牛海绵状脑病俗称疯牛病，其主要症状是患牛精神状态失常、共济失调、感觉过敏和中枢神经系统灰质空泡化等。疯牛病给世界的畜牧业以及人们的生活带来极大危害，经济损失惨重。疯牛病的病原是朊病毒(PrPsc),它是由机体正常的朊蛋白...
- 宋少康
- 关键词：疯牛病RNAI技术重叠延伸PCR法
- 文献传递
- CoQ10关键合成酶之dps相关基因的研究进展
- 本文将对CoQ10的关键合成酶之一dps(decaprenyldiphosphate synthase)相关基因的研究意义、国内外研究现状和发展前景进行简要综述。
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- 关键词：生理学辅酶Q10合成酶生物合成遗传育种
- H-FABP基因遗传标记与肉质性状的相关性研究概述
- 本文就H-FABP基因的结构与定位、遗传变异及其与部分生产性能的关系，综合多家学者的研究结果，论述H-FABP的遗传标记在遗传育种上的重要作用与进展，并提出今后研究前景，为深入研究该基因提供参考。
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- 关键词：畜禽遗传育种H-FABP基因肉质性状
- 牛朊蛋白基因真核表达载体的构建及其在牛骨髓间充质干细胞中的稳定表达
- 2012年
- 试验构建牛朊蛋白(prion protein,PRNP)基因的真核表达载体,为进一步研究牛朊蛋白的生理功能和从细胞水平研究抗疯牛病转基因克隆牛奠定基础。采用重叠延伸PCR(splicing overlap extension PCR,SOE-PCR)法扩增获得牛PRNP基因序列,并克隆到带有DsRED2报告基因的真核表达载体pDsRED2-N1中,将双酶切、PCR、测序鉴定的阳性质粒经脂质体转染牛骨髓间充质干细胞(BMSC);通过荧光显微镜观察转染细胞,并用800μg/mL G418对转染的细胞进行药物筛选。琼脂糖凝胶电泳显示基因合成的片段大小和构建的载体大小与预期相符;重组表达载体转染BMSC后有红色荧光出现;通过药物筛选出了稳定转染的细胞单克隆。通过SOE-PCR成功扩增了牛PRNP基因序列,并构建成真核表达载体,得到稳定表达目的蛋白的BMSC细胞。
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- 关键词：疯牛病SOE-PCRBMSC
- 利用RNAi抑制布莱凯特黑牛骨髓间充质干细胞中朊蛋白基因(PRNP)表达的试验研究
- 抑制牛骨髓间充质干细胞中朊蛋白基因的表达,为抗疯牛病转基因克隆牛的制作提供体细胞来源.利用RNAi技术,根据NCBI数据库中牛源PRNP基因cDNA序列,运用生物学软件设计3段siRNA序列和1个阴性对照序列,分别将其连...
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- 关键词：朊蛋白基因抗疯牛病供体细胞转基因动物
- 利用RNAi抑制牛骨髓间充质干细胞中朊蛋白基因(PRNP)的表达被引量：1
- 2012年
- 利用RNAi技术,根据牛源PRNP基因cDNA设计3段siRNA序列和1个阴性对照序列,分别将其连接到RNA干扰载体pRNAT-U6.1/Neo上构建成shRNA载体,并将shRNA载体转染牛骨髓间充质干细胞(BMSC);通过Real-time PCR和Western Blotting筛选抑制效果最佳的载体;并用800mg/L G418对转染最佳载体的细胞进行药物筛选。结果显示:成功构建了3个靶向shRNA载体和1个阴性对照shRNA载体;转染后48h在荧光镜下检测各组均可观察到绿色荧光的表达;Real-time PCR和Western Blotting结果显示,3个靶向shRNA载体在不同时间段均在一定程度上下调了PRNP mRNA的表达,抑制了朊蛋白PrPC的生成,得到了1个最佳干扰载体sh3;通过药物筛选出了稳定转染的细胞单克隆。本研究获得了1个有效抑制朊蛋白基因表达的shRNA载体,并筛选出稳定转染的细胞单克隆,上述结果可为抗疯牛病体细胞核移植提供供体细胞。
- 宋少康董雅娟柏学进王文明刘玮牛召姗赵仕全杨莉
- 关键词：PRNPBMSC
