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布莱凯特黑牛PDSS1基因单核苷酸多态性分析被引量：2: 2013年; 为研究布莱凯特黑牛PDSS1(decaprenyl diphosphate synthase subunit 1)基因与肉质性状的相关性,采用PCR-SSCP技术对96头布莱凯特黑牛进行单核苷酸多态性检测。经PCR-SSCP检测及克隆测序发现,布莱凯特黑牛PDSS1基因各扩增片段中,P4表现为AA、AB、BB 3种基因型,P9表现为CC、CD 2种基因型,且各存在1个SNP位点:第4个外显子122bp处发生A→G的碱基突变,并引起相应氨基酸的改变(N156S);第11个外显子6bp处发生C→T的碱基突变,但未引起氨基酸的改变。经肉质性状关联性分析发现,AA、AB、BB不同基因型间差异不显著(P>0.05),但AB型的综合肉质指标较好。研究表明,布莱凯特黑牛PDSS1基因各外显子核苷酸序列的稳定性极高;外显子4内的碱基突变可能会引起PDSS1蛋白质空间结构及功能的改变,但与肉质性状相关性不显著。; 杨莉董雅娟柏学进牛召珊宋少康赵仕全张新浩; 关键词：单核苷酸多态性肉质性状

CoQ10关键合成酶之dps相关基因的研究进展: 本文将对CoQ10的关键合成酶之一dps(decaprenyldiphosphate synthase)相关基因的研究意义、国内外研究现状和发展前景进行简要综述。; 杨莉牛召珊赵仕全宋少康董雅娟柏学进; 关键词：生理学辅酶Q10 合成酶生物合成遗传育种

布莱凯特黑牛COQ3基因克隆与多态性分析: 2015年; 辅酶Q10是一种醌环类化合物,在哺乳动物细胞内广泛存在并对机体多种生理功能的发挥起重要作用。COQ3基因编码的氧-甲基转移酶催化辅酶Q10合成过程中两步重要甲基化反应。为了检测COQ3基因的多态性,为其作为分子标记辅助育种的候选基因提供依据,首先对布莱凯特黑牛COQ3基因进行了测序分析,经其CDS序列与Gen Bank(ID:540298)数据中已公布的安格斯牛该基因序列进行比对,结果显示同源性为99.9%;将布莱凯特黑牛COQ3序列与山羊、马等9个物种的序列做进化树分析,结果显示布莱凯特黑牛与山羊处在进化树同一枝上并且距离也最近。其次以88头布莱凯特黑牛为试验材料,对每个外显子进行SNP分析,结果发现,只在第5号外显子上存在1处多态位点,但该位点的突变并未引起氨基酸序列的变化,结果显示COQ3基因在种内保守性较强。对COQ3基因编码蛋白质做了结构预测,以便分析该蛋白质如何发挥转甲基功能。; 张新浩董雅娟牛召珊赵仕全杨莉柏学进; 关键词：蛋白质结构预测

PHB-聚异戊烯转移酶(PPT)及其编码基因(ubiA/coq2)研究进展: 本文综述了CoQ10及其生物合成相关酶基因的研究主要集中在微生物上，在大型动物上的研究甚少。而牛肉营养丰富，同时含有大量的CoQ10，因此研究牛肉中PPT及其编码基因的表达对于提高其CoQ10含量具有重大意义。; 牛召珊董雅娟赵仕全杨莉柏学进; 关键词：编码基因辅酶Q10 蛋白质合成

布莱凯特黑牛CoQ10合成相关酶COQ2基因cDNA克隆及其遗传多态性分析: 引言 CoQ10广泛存在于机体各种组织中,在心肌细胞的线粒体中含量更为丰富.它在线粒体呼吸链即电子传递链中起到递氢体的作用,是细胞呼吸链的重要组成部分,它也是一种公认的氧自由基清除剂,如果线粒体中的CoQ10含量不足,会...; 牛召珊董雅娟赵仕全杨莉张新浩柏学进

牛朊蛋白基因真核表达载体的构建及其在牛骨髓间充质干细胞中的稳定表达: 2012年; 试验构建牛朊蛋白(prion protein,PRNP)基因的真核表达载体,为进一步研究牛朊蛋白的生理功能和从细胞水平研究抗疯牛病转基因克隆牛奠定基础。采用重叠延伸PCR(splicing overlap extension PCR,SOE-PCR)法扩增获得牛PRNP基因序列,并克隆到带有DsRED2报告基因的真核表达载体pDsRED2-N1中,将双酶切、PCR、测序鉴定的阳性质粒经脂质体转染牛骨髓间充质干细胞(BMSC);通过荧光显微镜观察转染细胞,并用800μg/mL G418对转染的细胞进行药物筛选。琼脂糖凝胶电泳显示基因合成的片段大小和构建的载体大小与预期相符;重组表达载体转染BMSC后有红色荧光出现;通过药物筛选出了稳定转染的细胞单克隆。通过SOE-PCR成功扩增了牛PRNP基因序列,并构建成真核表达载体,得到稳定表达目的蛋白的BMSC细胞。; 宋少康董雅娟柏学进王文明刘玮牛召珊赵仕全杨莉; 关键词：疯牛病 SOE-PCR BMSC

布莱凯特黑牛心脏型脂肪酸结合蛋白基因的研究进展被引量：2: 2013年; 肉质性状与肌内脂肪含量紧密相关。心脏型脂肪酸结合蛋白(heart fatty acid-binding protein,H-FABP)基因作为影响肌内脂肪含量的候选基因之一,成为布莱凯特黑牛分子育种改善肉质性状的研究重点。作者就H-FABP对脂肪酸转运的调控机理、H-FABP基因定位和结构等方面进行阐述,并结合在不同畜禽上的研究进展进行比较分析,为利用现代分子生物技术培育布莱凯特黑牛新品种提供理论参考。; 赵仕全董雅娟柏学进牛召珊杨莉; 关键词：心脏型脂肪酸结合蛋白 H-FABP基因肌内脂肪含量

H-FABP基因遗传标记与肉质性状的相关性研究概述: 本文就H-FABP基因的结构与定位、遗传变异及其与部分生产性能的关系，综合多家学者的研究结果，论述H-FABP的遗传标记在遗传育种上的重要作用与进展，并提出今后研究前景，为深入研究该基因提供参考。; 赵仕全牛召珊宋少康杨莉董雅娟柏学进; 关键词：畜禽遗传育种 H-FABP基因肉质性状

利用RNAi抑制牛骨髓间充质干细胞中朊蛋白基因(PRNP)的表达被引量：1: 2012年; 利用RNAi技术,根据牛源PRNP基因cDNA设计3段siRNA序列和1个阴性对照序列,分别将其连接到RNA干扰载体pRNAT-U6.1/Neo上构建成shRNA载体,并将shRNA载体转染牛骨髓间充质干细胞(BMSC);通过Real-time PCR和Western Blotting筛选抑制效果最佳的载体;并用800mg/L G418对转染最佳载体的细胞进行药物筛选。结果显示:成功构建了3个靶向shRNA载体和1个阴性对照shRNA载体;转染后48h在荧光镜下检测各组均可观察到绿色荧光的表达;Real-time PCR和Western Blotting结果显示,3个靶向shRNA载体在不同时间段均在一定程度上下调了PRNP mRNA的表达,抑制了朊蛋白PrPC的生成,得到了1个最佳干扰载体sh3;通过药物筛选出了稳定转染的细胞单克隆。本研究获得了1个有效抑制朊蛋白基因表达的shRNA载体,并筛选出稳定转染的细胞单克隆,上述结果可为抗疯牛病体细胞核移植提供供体细胞。; 宋少康董雅娟柏学进王文明刘玮牛召姗赵仕全杨莉; 关键词：PRNP BMSC

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杨莉