童国军
- 作品数：7 被引量：18H指数：2
- 供职机构：南方医科大学南方医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学天文地球更多>>
- 甲状旁腺激素通过非依赖PLC的PKC途径抑制成骨细胞的凋亡被引量：2
- 2016年
- 目的观察甲状旁腺激素的非依赖PLC的PKC转导通路(PTH/non PLC/PKC)是否会对成骨细胞(MC3T3-E1)的凋亡以及细胞数量具有影响。方法培养MC3T3-E1细胞,以1.5×104密度接种到96孔板,然后置于培养箱培养3 d直到细胞达到汇合状态,随机分为5组:按100 nmol/L[Gly1,Arg19]h PTH(1-28);100 nmol/L[Gly1,Arg19]h PTH(1-34);100 nmol/L[Gly1,Arg19]h PTH(1-34)+1μmol/L Go6983,1μmol/L Go6983;空白对照组加入等体积的去离子水,分别刺激细胞1、24、48 h,然后使用细胞计数试剂盒(CCK-8)和Caspase-Glo®3/7试剂盒(caspase-3)检测细胞的细胞数量与凋亡。结果 CCK-8检测结果显示,[Gly1,Arg19]h PTH(1-34)组与[Gly1,Arg19]h PTH(1-34)+Go6983组相比,在1 h和24 h具有提高细胞数量的趋势,但结果并没有统计学差异,48 h[Gly1,Arg19]h PTH(1-34)组与[Gly1,Arg19]h PTH(1-28)组相比,可以明显提高细胞的数量(P<0.05)。进一步的研究发现在[Gly1,Arg19]h PTH(1-34)组添加抑制剂Go6983后,细胞数量增多的效应消失(P<0.05)。Caspase-3检测凋亡结果显示,[Gly1,Arg19]h PTH(1-34)组与[Gly1,Arg19]h PTH(1-34)+Go6983组相比,在1 h和24 h具有抑制细胞凋亡(细胞凋亡受到抑制),但是差异无统计学意义。48 h检测细胞凋亡显示,[Gly1,Arg19]h PTH(1-34)组与[Gly1,Arg19]h PTH(1-28)组相比,前者可以明显抑制细胞凋亡(P<0.05),给予PKC抑制剂Go6983后,其抑制凋亡现象消失。结论 PTH的non PLC/PKC信号转导通路可能在长时间(48 h)作用于MC3T3-E1细胞时,可抑制细胞凋亡,提高细胞的数量。
- 胡少宇童国军孟越郝松李威许伏龙何友华陈建庭杨德鸿
- 关键词：甲状旁腺激素凋亡信号转导通路
- 磷脂酶C非依赖的PKC信号通路PTH模拟肽对去势小鼠腰椎骨骼的作用及其机制研究
- 目的 观察NonPLC/PKC通路 PTH模拟肽MY-1、MY-2对去势小鼠腰椎骨骼的影响，并初步研究其成骨作用机制.方法 80只8周龄C57BL/6雌性小鼠，体重(19.0±0.5)g分为假手术组(SHAW)、模型组(...
- 何友华李明翰童国军杨德鸿
- 关键词：甲状旁腺素腰椎退变
- 非PLC依赖PKC通路特异性甲状旁腺素模拟肽的建立及其对骨代谢作用的研究
- 目的：PTH通过激活cAMP/PKA、PLC/PKC等信号通路发挥其促骨合成作用，研究者以往的工作提示PTH可诱导PLC非依赖PKC信号通路，但其机理和对骨代谢的影响不清楚。本文总结进一步的深入研究结果。
- 杨德鸿郝松胡少宇童国军孟越陈建庭
- 特立帕肽保守治疗骨质疏松性脊柱骨折:12例报告被引量：13
- 2016年
- 目的根据随访病例分析在保守治疗骨质疏松性脊柱骨折中特立帕肽的促骨折愈合作用。方法 12例绝经后女性患者,年龄73±4.8岁。所有患者接受6个月特立帕肽皮下注射,并接受钙剂补充和对症止痛治疗。在治疗开始后0和6个月,双能X线骨密度仪测量骨密度,胸腰椎正侧位X片测量胸腰椎形态,P1NP/beta-CTX化验患者骨代谢情况,6例患者在治疗结束时复查MRI了解骨折愈合情况。0和6个月时,VAS疼痛和患者生存质量(ODI)评分在门诊完成,1个月时电话完成。结果所有的12例患者完成随访,在治疗中无新发骨折,无不良事件出现。治疗的第1个月末所有患者不再需要止痛剂辅助治疗。VAS评分从8±2降低至1±2。ODI评分从(76±12)%(注射前)降低至(20±5)%(注射后1月),然后至(5±4)%(6月)。伤椎前后柱高度百分比值从(75±20)%下降至(61±20)%。P1NP从20.9±11.4 ng/m L上升至80.0±41.2 ng/m L。CTX从0.30±0.17 ng/m L上升至0.51±0.3 ng/m L。骨密度增加(20±5)%。6例患者获得MRI复查,见骨折愈合。结论特立帕肽保守可以有效治疗骨质疏松性脊柱骨折。此方法可以促进骨折愈合,提高患者生存质量,防止骨折椎体塌陷。可以作为PVP或BV手术的替代方法。
- 杨德鸿胡少宇孟越童国军陈建庭
- 关键词：骨质疏松性脊柱骨折椎体成形术球囊成形术特立帕肽
- 一种新的具有促骨合成作用的多肽设计和临床前研究
- 目的 合成具有非PLC/PKC单一信号激活作用的PTH模拟肽(MY-1肽),通过体外细胞培养和去势雌性小鼠体内研究,探讨该肽的促骨合成、促骨吸收功能以及抗骨质疏松作用。方法 检测MY-1肽的cAMP/PKA,PLC和PK...
- 杨德鸿童国军何友华孟越郝松胡少宇
- 关键词：骨质疏松临床前研究药物
- 连续应用特立帕肽对正常和去势小鼠骨代谢的影响被引量：2
- 2019年
- 目的探讨连续泵入特立帕肽(TPTD)对去势和正常小鼠骨代谢的影响,为研究TPTD及其相关肽破骨作用的动物模型选择提供实验依据。方法6周龄雌性C57BL小鼠24只,分别接受去势(OVX)或者假手术(SHAM),1周后用微量泵泵入TPTD或者等量的溶剂(VEH),分成SHAM-VEH,SHAM-TPTD,OVX-VEH,OVX-TPTD四组。2周后,获取胫骨组织经显微CT测量胫骨和皮质骨相关参数。并对胫骨组织行进行组织切片HE染色和TRAP染色,统计破骨细胞数目及生长板厚度。测量小鼠血清中的钙离子浓度。取部分颅骨原代成骨细胞加雌二醇(E2)和TPTD刺激培养48h后提取细胞总蛋白,分析β-catenin和RANKL蛋白的表达。结果OVX小鼠的骨小梁骨量较SHAM小鼠的骨量显著减少(P<0.05)。TPTD泵入显著减低SHAM小鼠松质骨骨量股骨中段皮质骨面积,与此相反,TPTD泵入增加OVX小鼠松质骨骨量,不改变皮质骨面积。TRAP染色结果发现,OVX较SHAM小鼠胫骨骨松质破骨细胞明显增多,SHAM-TPTD较SHAM小鼠增多(P<0.05)。细胞学蛋白分析结果显示,E2和TPTD持续刺激48h后,β-catenin表达量较TPTD单纯刺激降低,RANKL表达相对升高。结论TPTD的连续应用促进正常小鼠的骨吸收,但对去势小鼠不具有明显的促骨吸收作用,去势小鼠不适用于研究TPTD及相关肽的促破骨作用。
- 李明翰何友华童国军杨德鸿
- 关键词：甲状旁腺素骨质疏松
- 破骨细胞酸性磷酸酶染色后快速半定量分析被引量：1
- 2018年
- 目的寻求合适的溶剂,溶解破骨细胞的抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色产物,筛选溶液的最适检测波长,检测溶液吸光度值。比较该方法与TRAP活性检测试剂盒法相关性,并评价该快速半定量分析法的稳定性与可靠性。方法提取C57BL/6小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMMs),以1×10~4·mL^(-1)均匀种入胶原I包被处理24孔板,随机分为4组:10 nmoL/L PTH(1-34),100 nmoL/L PTH(1-34),1μmoL/L PTH(1-34),10μmoL/L PTH(1-34),给予甲状旁腺素[PTH(1-34)]刺激4 h后换成含10%胎牛血清完全培养基培养44 h,以4 h/44 h为1个周期,培养8 d后,进行常规破骨细胞TRAP染色,筛选合适的溶剂溶解,最终使用冰醋酸溶解TRAP原位染色产物,超声粉碎取上清,选取合适的波长检测吸光度(OD)值,此为冰醋酸溶解定量法。另一检测手段为目前常规使用的酶活性检测试剂盒法,试比较冰醋酸溶解定量法与酶活性检测试剂盒法两者的相关性。结果常规破骨细胞原位TRAP染色后,筛选出冰醋酸的溶解效果最优。溶解后测定波长在550 nm左右吸收峰理想,并排除溶剂冰醋酸本身的干扰。随着PTH(1-34)浓度增高,表现出破骨效应的增加,TRAP的活性增加,两者的OD值相应增加。冰醋酸溶解定量法与酶活性检测试剂盒法存在显著正相关,Pearson相关系数r=0.986(P<0.05)。结论采用冰醋酸溶解定量法,并用550 nm波长测定OD值,可实现破骨细胞TRAP染色后的快速半定量分析。
- 何友华童国军李明翰李威许伏龙杨德鸿
- 关键词：冰醋酸半定量分析破骨细胞甲状旁腺素
