张萌萌
- 作品数：8 被引量：15H指数：3
- 供职机构：新疆医科大学附属肿瘤医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金新疆医科大学科研创新基金新疆维吾尔自治区科技支疆项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- KLF4在肾透明细胞癌侵袭和迁移中的作用及其与SKA1的靶向调控关系探讨
- 2023年
- 目的探讨肾透明细胞癌(ccRCC)组织中锌指转录调节因子4(KLF4)的表达变化,及其调控纺锤体和动粒相关复合体亚基1(SKA1)促进ccRCC细胞侵袭、迁移的作用。方法从癌症和肿瘤基因图谱(TCGA)数据库下载440例ccRCC原位癌组织和80例伴有远处转移的ccRCC组织的转录组测序数据,分析KLF4在原位癌组织和伴有远处转移癌组织中的表达差异。取人肾癌细胞786-O、ACHN,分为KLF4过表达组、空载体组、共表达KLF4/SKA1组,采用慢病毒载体技术,分别转染pCMV-KLF4、pCMV、pCMV-KLF4和pCMV-SKA1质粒;采用Transwell小室实验观察各组细胞侵袭和迁移能力,Western blotting法检测细胞上皮间质转化相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin表达。取786-0、ACHN细胞,分为KLF4干扰组及干扰对照组、KLF4过表达组及空载体组,KLF4干扰组和干扰对照组分别转染siKLF4和siNC,KLF4过表达组和空载体组分别转染pCMV-KLF4、pCMV质粒;采用实时荧光定量PCR法检测细胞SKA1 mRNA表达,Western blotting法检测细胞SKA1蛋白表达;利用Jaspar和ConTra V3在线工具分析预测KLF4在SKA1启动子区的结合位点,并采用双荧光素酶报告实验进行验证。结果KLF4在伴有远处转移的ccRCC组织中的表达低于ccRCC原位癌组织(P<0.01)。在786-O和ACHN细胞中,与空载体组相比,过表达KLF4组细胞侵袭和迁移能力降低(P均<0.01);与过表达KLF4组比较,共表达KLF4/SKA1组细胞侵袭和迁移能力增加(P均<0.01)。与空载体组相比,过表达KLF4组E-cadherin蛋白表达水平升高、N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平降低;与过表达KLF4组比较,共表达KLF4/SKA1组E-cadherin蛋白表达水平降低、N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平升高(P均<0.05)。与siNC组相比,siKLF4组SKA1 mRNA及蛋白表达水平均升高;与pCMV空载体组相比,pKLF4过表达组SKA1 mRNA及蛋白表达水平均下降(P均<0.01)。SKA1转录起始位点上游850~900 bp启动子序列中存在KLF4的结合位点。双荧�
- 张萌萌刘盟雪袁帅韩静
- 关键词：肾透明细胞癌
- 转化生长因子-β1诱导人肺腺癌细胞侵袭迁移的机制被引量：5
- 2018年
- 目的探讨转化生长因子-β1（TGF-β1）影响肺腺癌细胞侵袭迁移，以及对上皮-间充质转化（EMT）和自噬的影响。
方法Transwell检测体外TGF-β1对肺腺癌细胞A549和SK-LU-1迁移与侵袭能力的影响；免疫荧光检测TGF-β1引起的A549细胞自噬水平变化；Western blot实验检测在A549细胞中TGF-β1对EMT标志分子及自噬调控基因表达的影响。
结果在A549和SK-LU-1细胞中，sh-TGF-β1干扰效率约为60%，GV358-TGF-β1过表达组过表达效率均在4倍以上；迁移实验结果显示，A549细胞中，随机干扰对照组（shNC组）迁移率为1.02 ± 0.06，TGF-β1过表达组为5.14 ± 0.43（t＝16.440，P＝0.004）；SK-LU-1细胞中，shNC组迁移率为1.04 ± 0.08，TGF-β1过表达组为4.92 ± 0.48（t＝13.810，P＝0.005），差异均有统计学意义；侵袭实验结果显示，A549细胞中，随机干扰对照组（shNC组）侵袭率为0.96±0.07，TGF-β1过表达组为4.28±0.51（t＝11.170，P＝0.007）；SK-LU-1细胞中，shNC组侵袭率为1.03±0.05，TGF-β1过表达组为4.11±0.36（t＝10.410，P＝0.009），差异均有统计学意义；免疫荧光实验结果可见，与对照组比较，TGF-β1过表达组点状分布的自噬小体数目明显增多（t＝22.340，P＝0.000），荧光强度显著增强；Western blot实验结果显示，TGF-β1过表达组E-钙黏蛋白（E-cadherin）的表达量明显减少，波形蛋白（Vimentin）、Twist、Snail的表达显著增加；自噬相关蛋白Beclin1表达上调，磷酸化的雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）表达上调；而TGF-β1干扰组的结果则与过表达组相反。
结论在肺腺癌细胞中，TGF-β1阳性表达诱导的自噬和EMT可能与其增强肺腺癌细胞侵袭迁移能力相关。
- 柳惠斌郭骏蒲艳张萌萌宋建忠王强
- 关键词：肺腺癌迁移上皮-间充质转化自噬
- 透明细胞肾细胞癌长链非编码RNA表达谱分析及初步验证被引量：2
- 2017年
- 目的探讨及分析透明细胞肾细胞癌(ccRCC)长链非编码RNA(lncRNA)的表达谱,并进行初步验证。方法利用高通量lncRNA芯片技术分别检测3例ccRCC组织及对应癌旁组织中lncRNA表达谱的差异,对芯片结果进行基因本体论(Gene Ontology)分析,Pathway分析,建立lncRNA与靶基因的基因网络图,并利用实时荧光定量RT-PCR技术对高通量lncRNA芯片检测结果进行验证。结果 ccRCC患者癌组织与癌旁对照样本差异表达的lncRNA共3 862条,其中1 619条上调表达,2 243条下调表达(差异表达倍数≥2.0,P<0.05)。荧光定量RT-PCR结果显示,筛选出的6个lncRNA,在87例ccRCC样本中的表达差异与芯片检测结果一致。结论ccRCC存在明显的lncRNAs差异性表达,这些lncRNAs及某些信号通路可能在肾癌发生和发展中发挥重要作用。
- 古再丽努尔.阿不都热依木买尔旦.马合木提韩静张萌萌马玉娇柳惠斌
- 关键词：长链非编码RNA基因芯片
- lncRNA NONHSAT113026在肾透明细胞癌中的表达及功能被引量：3
- 2019年
- 目的:本研究旨在探讨lncRNA NONHSAT113026(lncRNA 026)在肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)组织中的表达及对肾癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:采用荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)分别在83例肾透明细胞癌和对应癌旁组织、肾癌细胞株786-O及ACHN中检测lncRNA 026的表达水平,并分析其表达水平与患者临床病理参数的相关性。通过慢病毒载体技术构建稳定过表达lncRNA 026的肾癌细胞786-O及ACHN,采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞增殖活性,Transwell小室检测细胞转移能力,蛋白印迹法(Western blot)分析PI3K/Akt信号通路中相关蛋白的表达情况。结果:与癌旁组织相比,lncRNA 026在ccRCC组织中的表达水平显著下调(P<0.000 1);在肾癌细胞786-O和ACHN中过表达lncRNA 026能显著抑制细胞的增殖、迁移和侵袭(P<0.01);Western blot结果显示,过表达lncRNA 026可下调PI3K/Akt信号通路中p-PI3K、p-Akt、GSK-3β的表达(P<0.01)。结论:lncRNA 026在肾透明细胞癌组织中低表达,并且过表达lncRNA 026能显著降低肾癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力,其作用机制可能与其抑制PI3K/Akt信号通路活化有关。提示lncRNA 026在肾癌中发挥了重要作用,有望成为治疗肾癌的潜在药物作用靶点。
- 张萌萌田孟真宋建忠蒲艳柳惠斌
- 关键词：肾透明细胞癌增殖迁移
- NDUFA4L2在肾透明细胞癌组织与外周血中的表达及意义被引量：1
- 2019年
- 目的探讨NDUFA4L2在肾透明细胞癌(ccRCC)组织和外周血中的表达及意义。方法选择72例ccRCC患者,收集手术切除的肿瘤组织及相应癌旁组织(距离癌组织3cm)。另收集同期相同入组标准的102例ccRCC患者术前的静脉血液标本作为肾癌组,以同期体检无肿瘤病史的68例健康者静脉血液标本为对照组。采用RT-PCR法检测NDUFA4L2在ccRCC组织及相应癌旁组织中的表达,RT-PCR方法检测肾癌组及对照组外周血中NDUFA4L2水平。分析NDUFA4L2在ccRCC组织和外周血中的表达与患者临床病理特征的关系;通过绘制受试者工作特征(ROC)曲线评价NDUFA4L2诊断ccRCC的效能。结果ccRCC组织中NDUFA4L2表达较癌旁组织升高(P<0.05),肾癌组外周血NDUFA4L2表达高于对照组(P<0.05);ccRCC组织及外周血中NDUFA4L2表达均与肿瘤分期、Fuhrman分级相关(P均<0.05);外周血NDUFA4L2诊断ccRCC的ROC曲线下面积(AUC)为0.876(95%CI:0.816~0.933,P<0.01),当诊断界值为0.235时,其灵敏度为81.4%,特异度为91.2%;诊断TNMⅠ~Ⅱ期肾癌的AUC为0.817(95%CI:0.718~0.917,P<0.01),灵敏度为85.3%,特异度为61.8%。结论NDUFA4L2在ccRCC组织及外周血中表达升高,NDUFA4L2表达与肿瘤分期及分级有关,可能是ccRCC的一个新型潜在肿瘤标志物。
- 韩静董志红蒲艳宋建忠张萌萌柳惠斌
- 关键词：肾透明细胞癌肿瘤标志物
