韩静 作品数:11 被引量:18 H指数:3 供职机构: 新疆医科大学附属肿瘤医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 新疆医科大学科研创新基金 新疆维吾尔自治区自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 经济管理 更多>>
UPLC法测定人血清中的顺铂 被引量:3 2015年 目的采用超高效液相色谱法(UPLC)测定人血清中的顺铂。方法色谱柱为Acquity UPLC BEH C18柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为75%甲醇,检测波长254 nm,流速1.0 m L·min^-1,柱温35℃。结果顺铂的标准曲线为:Y=3.1×10-3X+0.0685(r=0.9999),顺铂0.1~10μg·m L^-1与峰面积的线性良好;最低检测限为50 ng·m L^-1,日内、日间RSD分别小于5.0%、10.0%,提取回收率〉70.0%。结论所用方法快速、灵敏、准确、专属性强,适用于顺铂血药浓度的监测及药动学研究。 韩静 柳惠斌关键词:顺铂 超高效液相色谱法 血清 药动学 衍生化 SKA1对肾细胞癌细胞增殖凋亡的影响及其分子机制研究 被引量:1 2020年 目的研究SKA1在肾细胞癌中的表达情况,探讨其表达对肾细胞癌细胞增殖凋亡的影响及其分子机制。方法从癌症基因组图谱(TCGA)数据库收集肾细胞癌数据集,分析SKA1在肾细胞癌组织和正常肾组织中的表达差异及其与临床病理特征的关系和对预后的影响。收集2016年1月—2018年9月在新疆医科大学附属肿瘤医院就诊的72例肾透明细胞癌患者切除的肿瘤组织及癌旁组织,利用实时荧光定量PCR法检测SKA1的表达水平。体外培养的人肾细胞癌细胞系786-O和ACHN分别用shSKA1干扰慢病毒和对照病毒载体感染。CCK-8法检测细胞增殖活性;平板克隆实验检测细胞克隆形成能力;Annexin V-FITC检测细胞凋亡率。运用IPA@在线生物信息学软件,对基因表达谱芯片检测的差异基因进行信号传导通路及生物学功能分析。Western blot法检测各组细胞TNF-α、cleaved-caspase 3、cleaved-caspase 9、p-Akt、p-mTOR蛋白水平变化。结果在各病理亚型肾细胞癌组织中SKA1的表达水平明显高于正常肾组织(P<0.01),与肾透明细胞癌和肾乳头状细胞癌患者的T、N、M(TNM)及AJCC分期有关(P<0.01)。SKA1高表达患者总生存期明显短于低表达患者(P<0.001)。组织样本研究结果证实,SKA1在肾透明细胞癌组织中表达水平高于癌旁组织,与TCGA数据库分析结果一致。与对照组相比,感染shSKA1慢病毒的肾细胞癌细胞增殖能力明显下降,凋亡细胞比例增加(P<0.01)。IPA@分析发现,生物功能富集排名第一的是细胞生长与增殖,TNF被强烈激活,PI3K/Akt/mTOR通路信号分子被显著抑制。Western blot实验结果证实,SKA1干扰组中TNF-α、Caspase 3和Caspase 9表达水平显著上升,而与细胞增殖相关的通路信号分子Akt和mTOR的磷酸化表达水平显著下调,与富集分析结果相一致。结论SKA1是肾细胞癌预后不良因素。降低肾细胞癌中SKA1表达能减弱肾细胞癌细胞增殖,同时促进凋亡,其机制可� 韩静 蒲艳 柳惠斌关键词:肾细胞癌 细胞增殖与凋亡 分子机制 优化的HPLC法测定人血清中甲氨蝶呤的浓度及临床应用 被引量:5 2014年 目的:建立及优化测定人血清中甲氨蝶呤(MTX)浓度的方法。方法:血样采用15%高氯酸溶液处理后采用高效液相色谱法(HPLC)进样测定。色谱柱为大连依利特ODSC18,流动相为甲醇.10mmol/L磷酸二氢钾(20:80,用氢氧化钠调pH6.5),流速为1.0ml/min,柱温为35℃,紫外检测波长为303nm。结果:MTX血药浓度在0.1~64μmol/L范围内线性关系良好(r=0.9995)。MTX低、中、高3种浓度的日内RSD分别为2.70%、1.08%、0.94%,日间RSD分别为4.36%、2.71%、1.95%(n=5),提取回收率分别为70.9%、78.3%、75.4%,最低检测限为O.03μmol/L。结论:优化后的方法准确可靠、灵敏度高、重现性好,适用于大剂量MTX血药浓度监测。 柳惠斌 韩静 买尔旦.马合木提关键词:甲氨蝶呤 高效液相色谱 血药浓度 KLF4在肾透明细胞癌侵袭和迁移中的作用及其与SKA1的靶向调控关系探讨 2023年 目的探讨肾透明细胞癌(ccRCC)组织中锌指转录调节因子4(KLF4)的表达变化,及其调控纺锤体和动粒相关复合体亚基1(SKA1)促进ccRCC细胞侵袭、迁移的作用。方法从癌症和肿瘤基因图谱(TCGA)数据库下载440例ccRCC原位癌组织和80例伴有远处转移的ccRCC组织的转录组测序数据,分析KLF4在原位癌组织和伴有远处转移癌组织中的表达差异。取人肾癌细胞786-O、ACHN,分为KLF4过表达组、空载体组、共表达KLF4/SKA1组,采用慢病毒载体技术,分别转染pCMV-KLF4、pCMV、pCMV-KLF4和pCMV-SKA1质粒;采用Transwell小室实验观察各组细胞侵袭和迁移能力,Western blotting法检测细胞上皮间质转化相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin表达。取786-0、ACHN细胞,分为KLF4干扰组及干扰对照组、KLF4过表达组及空载体组,KLF4干扰组和干扰对照组分别转染siKLF4和siNC,KLF4过表达组和空载体组分别转染pCMV-KLF4、pCMV质粒;采用实时荧光定量PCR法检测细胞SKA1 mRNA表达,Western blotting法检测细胞SKA1蛋白表达;利用Jaspar和ConTra V3在线工具分析预测KLF4在SKA1启动子区的结合位点,并采用双荧光素酶报告实验进行验证。结果KLF4在伴有远处转移的ccRCC组织中的表达低于ccRCC原位癌组织(P<0.01)。在786-O和ACHN细胞中,与空载体组相比,过表达KLF4组细胞侵袭和迁移能力降低(P均<0.01);与过表达KLF4组比较,共表达KLF4/SKA1组细胞侵袭和迁移能力增加(P均<0.01)。与空载体组相比,过表达KLF4组E-cadherin蛋白表达水平升高、N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平降低;与过表达KLF4组比较,共表达KLF4/SKA1组E-cadherin蛋白表达水平降低、N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平升高(P均<0.05)。与siNC组相比,siKLF4组SKA1 mRNA及蛋白表达水平均升高;与pCMV空载体组相比,pKLF4过表达组SKA1 mRNA及蛋白表达水平均下降(P均<0.01)。SKA1转录起始位点上游850~900 bp启动子序列中存在KLF4的结合位点。双荧� 张萌萌 刘盟雪 袁帅 韩静关键词:肾透明细胞癌 基于生物信息学数据库分析肾透明细胞癌SKA1表达及临床意义 2020年 目的探讨纺锤体和动粒相关蛋白复合体亚基1(SKA1)在肾透明细胞癌中的表达及临床意义。方法收集2018年1月至2018年12月在新疆医科大学附属肿瘤医院就诊的76例肾透明细胞癌患者术前和24例健康体检者的静脉血液标本,利用实时荧光定量PCR检测患者全血中SKA1的水平,分析SKA1的水平与临床病理特征的关系。挖掘Oncomine(v4.5)、The Human Protein Atlas(THPA)基因数据库、The Cancer Genome Atlas(TCGA)门户网站(cBioportal)和Gene Expression Omnibus(GEO)中关于SKA1的信息,基于cBioportal数据库中的肾透明细胞癌数据采用Kaplan-Meier法进行生存分析,log-rank检验进行生存率的比较,χ^2检验分析SKA1水平与临床病理特征的关系。采用ROC曲线评价SKA1 mRNA在肾透明细胞癌中的诊断价值,并采用KOBAS 3.0版在线工具对SKA1基因进行富集分析。结果Oncomine(v4.5)数据库中检索到2项关于SKA1 mRNA在人肾透明细胞癌组织中表达水平的研究,共38个样本,分析结果显示人SKA1 mRNA在肾透明细胞癌组织中呈高表达,进一步检测发现,与正常肾组织相比,SKA1 mRNA在肾透明细胞癌组织中的表达水平显著升高[-2.21(-3.56,-1.59)vs.-3.41(-4.55,-1.65)],差异具有统计学意义(Z=2.282,P=0.022)。利用THPA在线网站分析表明,SKA1蛋白在肾癌组织中呈明显中等强度染色,而在正常肾组织中极少部分弱阳性表达或不表达,SKA1主要定位于细胞质膜,这一检测结果与mRNA分析结果一致。cBioportal数据库分析结果表明,SKA1表达水平与AJCC分期(χ^2=21.352,P<0.001)、T分期(χ^2=19.967,P<0.001)、N分期(χ^2=11.323,P=0.003)及M分期(χ^2=27.248,P<0.001)显著相关。76例肾透明细胞癌患者外周血SKA1的水平为0.301±0.147,健康体检者为0.162±0.052,差异具有统计学意义(t=7.360,P<0.001),其水平与AJCC分期(t=2.445,P=0.017)和淋巴结转移(t=2.242,P=0.028)相关,该结果与cBioportal数据库中组织分析结果相符。生存分析显示,cBioport 韩静 袁帅 蒲艳 柳惠斌关键词:肾肿瘤 计算生物学 探析PBL联合CBL双向教学模式在药物制剂教学中的应用效果 2021年 探析问题导向教学法(PBL)联合案例教学法(CBL)双向教学模式在药物制剂教学中的应用效果。 方法:选取学院 2017 级药学专业共计 96 名学生,将其 1:1 随机分为对照组与研究组。 研究组使用 PBL CBL 教学模式进行教学,对照组使用传统教学模式进行教学。 以考核与调查问卷形式对教学效果进行统计分析,比较教学满意度、考核成绩、教学趣味性和学生思维能力。 结果:1)相较于对照组,研究组学生的教学满意度更高(95.83% vs54.17% ),有统计学差异(P<0.05)。 2)研究组学生主观题、客观题和考核总成绩为(45.63±5.69)分、(39.05±3.40)分、(84.15±4.07)分,高于对照组的(37.80±4.11)分、(25.67±2.78)分、(63.45±7.12),有统计学差异(P<0.05)。 3)相较于对照组,研究组学生的教学趣味性评分和 CTDI- CV 评分均更高,有统计学差异(P<0.05)。 结论:在药物制剂教学中融入 PBL 联合 CBL 双向教学模式,能更大程度上激发学生的学习兴趣,有助于培养分析问题、解决问题的思维能力,并改善课堂教学效果和考核成绩,值得推广使用。 柳惠斌 韩静关键词:PBL CBL 药物制剂 教学改革 满意度 思维能力 NDUFA4L2在肾透明细胞癌组织与外周血中的表达及意义 被引量:1 2019年 目的探讨NDUFA4L2在肾透明细胞癌(ccRCC)组织和外周血中的表达及意义。方法选择72例ccRCC患者,收集手术切除的肿瘤组织及相应癌旁组织(距离癌组织3cm)。另收集同期相同入组标准的102例ccRCC患者术前的静脉血液标本作为肾癌组,以同期体检无肿瘤病史的68例健康者静脉血液标本为对照组。采用RT-PCR法检测NDUFA4L2在ccRCC组织及相应癌旁组织中的表达,RT-PCR方法检测肾癌组及对照组外周血中NDUFA4L2水平。分析NDUFA4L2在ccRCC组织和外周血中的表达与患者临床病理特征的关系;通过绘制受试者工作特征(ROC)曲线评价NDUFA4L2诊断ccRCC的效能。结果ccRCC组织中NDUFA4L2表达较癌旁组织升高(P<0.05),肾癌组外周血NDUFA4L2表达高于对照组(P<0.05);ccRCC组织及外周血中NDUFA4L2表达均与肿瘤分期、Fuhrman分级相关(P均<0.05);外周血NDUFA4L2诊断ccRCC的ROC曲线下面积(AUC)为0.876(95%CI:0.816~0.933,P<0.01),当诊断界值为0.235时,其灵敏度为81.4%,特异度为91.2%;诊断TNMⅠ~Ⅱ期肾癌的AUC为0.817(95%CI:0.718~0.917,P<0.01),灵敏度为85.3%,特异度为61.8%。结论NDUFA4L2在ccRCC组织及外周血中表达升高,NDUFA4L2表达与肿瘤分期及分级有关,可能是ccRCC的一个新型潜在肿瘤标志物。 韩静 董志红 蒲艳 宋建忠 张萌萌 柳惠斌关键词:肾透明细胞癌 肿瘤标志物 透明细胞肾细胞癌长链非编码RNA表达谱分析及初步验证 被引量:2 2017年 目的探讨及分析透明细胞肾细胞癌(ccRCC)长链非编码RNA(lncRNA)的表达谱,并进行初步验证。方法利用高通量lncRNA芯片技术分别检测3例ccRCC组织及对应癌旁组织中lncRNA表达谱的差异,对芯片结果进行基因本体论(Gene Ontology)分析,Pathway分析,建立lncRNA与靶基因的基因网络图,并利用实时荧光定量RT-PCR技术对高通量lncRNA芯片检测结果进行验证。结果 ccRCC患者癌组织与癌旁对照样本差异表达的lncRNA共3 862条,其中1 619条上调表达,2 243条下调表达(差异表达倍数≥2.0,P<0.05)。荧光定量RT-PCR结果显示,筛选出的6个lncRNA,在87例ccRCC样本中的表达差异与芯片检测结果一致。结论ccRCC存在明显的lncRNAs差异性表达,这些lncRNAs及某些信号通路可能在肾癌发生和发展中发挥重要作用。 古再丽努尔.阿不都热依木 买尔旦.马合木提 韩静 张萌萌 马玉娇 柳惠斌关键词:长链非编码RNA 基因芯片 紫草素对Cx32蛋白组成的细胞缝隙连接功能的影响 被引量:3 2017年 目的探究紫草素对宫颈癌Hela细胞缝隙连接通讯功能(gap junctional intercellular communication,GJIC)和缝隙连接蛋白32(Cx32蛋白)表达水平的影响。方法将细胞分成两组培养,加多西环素为诱导组,不加多西环素为非诱导组,采用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法检测不同浓度紫草素对Hela细胞毒性的影响;采用细胞接种荧光示踪法(parachute assay)观察不同浓度紫草素对缝隙连接(gap junction,GJ)功能的影响;采用蛋白免疫印迹法(western-blot)研究紫草素在影响GJ功能浓度范围内对Cx32蛋白表达的影响。结果紫草素在0~4μmol/L浓度时对非诱导组Hela细胞无毒性作用;紫草素在0~3μmol/L浓度时对诱导组Hela细胞无毒性作用;诱导组细胞在紫草素1~3μmol/L浓度时荧光传递量会随浓度增加;紫草素(1~3μmol/L)能浓度依赖性增强GJ功能及Cx32蛋白表达量。结论紫草素能够增强Cx32组成的细胞GJ功能,这种增强作用可能与其增加Cx32蛋白表达水平有关。 艾力拜.阿布力孜 买尔旦.马合木提 韩静关键词:紫草素