张奇兵
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：四川大学华西药学院靶向药物及释药系统教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
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- 诱导蛋白酶K去折叠过程的热力学研究
- 2013年
- 目的研究诱导蛋白酶K的去折叠过程,尝试阐明构象与酶活力的关系。方法蛋白酶K经过盐酸胍处理后,以变性酪蛋白为底物测定酶活力,采用荧光光谱法研究酶分子的构象变化,计算相关的热力学参数。结果随着盐酸胍浓度升高,蛋白酶K的酶活力和荧光强度降低,峰位红移,碘化钾对酶分子的内源性荧光猝灭作用增强,去折叠分数增大;蛋白酶K的热变性中点温度和最大稳定温度降低;去折叠过程的熵变大于0。结论蛋白酶K对低浓度的盐酸胍较为稳定,3.5 mol·L-1为盐酸胍诱导蛋白酶K变性的临界浓度;空间构象的稳定性是维持酶活力的基础;蛋白酶K的热稳定性随盐酸胍浓度增大而降低;盐酸胍诱导蛋白酶K的去折叠过程是熵驱动的。
- 张奇兵那馨竹尹宗宁
- 关键词：荧光光谱热力学参数
- 片剂成型对蒜酶稳定性的影响
- 2014年
- 目的研究片剂成型对蒜酶稳定性的影响。方法以Heckel方程评价蒜酶的压缩成型性,研究成型过程中压力、填充剂、崩解剂及水分含量等因素对蒜酶活性的影响。结果蒜酶在压缩成型过程中主要发生弹性形变,可压性较差。蒜酶的活性开始随压力升高而降低,在720 Mpa时活性达到最低,继续增加压力后活性基本保持不变,表明压力可能是通过改变空间位阻使蒜酶的构象发生改变,进而影响其活性。填充剂和崩解剂均能缓解蒜酶活性的降低;一定的水分含量有助于蒜酶片剂的稳定。结论蒜酶压缩成型性较差且不稳定,塑性填充剂、崩解剂可改善其压缩行为,增强片剂的稳定性。
- 王忠霞张奇兵胡晓娟王晓娜尹宗宁
- 关键词：活性
- 光谱法表征蛋白酶K的热变性过程被引量：4
- 2013年
- 用不同温度处理蛋白酶K,以变性酪蛋白底物法测定酶活力,稳态/瞬态荧光光谱法和圆二色谱法测定空间构象和二级结构,研究温度对蛋白酶K酶活力和构象的影响。温度由25℃升高至65℃过程中,蛋白酶K的酶活力逐渐降低,半衰期缩短;发射光谱荧光强度降低,峰位由335nm红移至354nm;色氨酸残基同步荧光强度降低,酪氨酸残基同步荧光强度增大;色氨酸残基荧光寿命由4.427 1ns降低至4.032 4ns;α-螺旋百分含量降低。结果表明:采用稳态/瞬态荧光光谱法和圆二色谱法能较简便、准确的描述蛋白酶K的热稳定性变化;蛋白酶K的热变性过程符合三态模型,存在一个中间态;蛋白酶K分子内部存在酪氨酸残基对色氨酸残基的共振能量转移作用;α-螺旋是维系蛋白酶K活性中心构象稳定性的主要结构。
- 张奇兵那馨竹尹宗宁
- 关键词：热稳定性圆二色谱
