吴洁
- 作品数：13 被引量：45H指数：5
- 供职机构：广东省职业病防治院更多>>
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- 三氯乙烯对Jurkat T细胞免疫毒性作用被引量：4
- 2016年
- 目的研究三氯乙烯（TCE）对Jurkat T细胞免疫毒性,探讨TCE对Jurkat T细胞的最大无作用剂量。方法 ①分别以不同浓度的TCE（0.10、0.50、1.00、2.00、5.00、10.00 mmol/L）作用于初始和活化Jurkat T细胞（以佛波酯和离子霉素进行活化处理）,并设TCE浓度为0.00 mmol/L的对照组和二甲基亚砜（DMSO）组（溶剂对照组）,在培养24、48、72 h后,光学显微镜下观察Jurkat T细胞形态,以CCK-8法检测Jurkat T细胞存活率。②分别采用不同剂量的TCE（0.00、0.02、0.20、2.00 mmol/L）作用于初始和活化Jurkat T细胞,分别在培养24、48、72 h后,以流式细胞术检测细胞凋亡情况,以酶联免疫吸附实验检测细胞培养上清中白细胞介素-2（IL-2）水平。结果 ①染毒24 h后,10.00 mmol/L TCE染毒组可见明显细胞毒性,表现为细胞分散、体积变小、胞膜破裂、胞质浓缩、胞质内容物外溢逐渐增多。细胞存活率在染毒剂量与染毒时间的交互效应上有统计学意义（P〈0.01）,其中,在3个时间点,与同时间点对照组和DMSO组比较,0.10、0.50、1.00和2.00 mmol/L TCE染毒组细胞存活率均无出现有统计学意义的下降（P〉0.05）,5.00和10.00 mmol/L TCE染毒组细胞存活率均下降（P〈0.01）。②以0.00~2.00mmol/L TCE染毒时,细胞凋亡率在染毒剂量主效应上以及其与细胞类型、染毒时间的交互效应上均无统计学意义（P〉0.05）。活化Jurkat T细胞IL-2水平均高于同时间点同组初始Jurkat T细胞（P〈0.01）;在3个时间点,活化Jurkat T细胞IL-2水平均随TCE染毒剂量增加而增加,呈剂量-效应关系（P〈0.01）;活化Jurkat T细胞IL-2水平随TCE染毒时间增加而增加,呈时间-效应关系（P〈0.01）。结论本研究条件下,TCE对Jurkat T细胞的最大无作用剂量为2.00 mmol/L。高剂量TCE（≥5.00 mmol/L）可对初始和活化Jurkat T细胞造成细胞毒性损伤;低剂量TCE（≤2.00 mmol/L）可刺激活化Jurkat T细胞IL-2分泌增
- 赵娜晏程吴洁黄永顺李宏玲李聪吴奇峰宋向荣阙冰玲王海兰黄汉林
- 关键词：三氯乙烯JURKATT细胞免疫毒性细胞存活率剂量-效应关系
- 骨髓间充质干细胞治疗矽肺小鼠肺纤维化效果
- 目的：观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)改善矽肺小鼠肺纤维化的效果.
方法：取无特定病原体级健康雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、矽肺组和治疗组,每组10只.采用气管暴露法,对照组小鼠予一次性注射0.90％...
- 赵娜吴洁宋向荣李宏玲蔡学敏王海兰
- 关键词：肺纤维化矽肺骨髓间充质干细胞治疗羟脯氨酸转化生长因子-Β辅助性T细胞17
- 三氯乙烯对人活化T细胞免疫毒性作用及机制研究被引量：4
- 2017年
- 目的研究三氯乙烯(TCE)对人活化T细胞的免疫毒性及其作用机制。方法 1取经分化抗原(CD3)和CD28活化的人T细胞,分别予不同剂量(0.32、0.63、1.25、2.50、5.00、10.00 mmol/L)的TCE染毒,并设二甲基亚砜(DMSO)组(溶剂对照组)和对照组(不予TCE和DMSO处理);培养24 h后,以CCK-8比色法检测T细胞的存活率。2以不同剂量TCE(0.00、2.50和5.00 mmol/L)染毒活化T细胞24 h后,以流式细胞术检测细胞凋亡情况。3取活化T细胞,分别予不同剂量(0.00、0.32、0.63、1.25、2.50、5.00 mmol/L)的TCE染毒24 h后,以酶联免疫吸附实验检测培养上清中白细胞介素(IL)-2和IL-6等细胞因子水平。4对照组、TCE染毒组活化T细胞分别予剂量为0.00和5.00 mmol/L的TCE染毒,于染毒0、30、60和120 min时收获细胞,以免疫印迹法检测信号传导蛋白和转录激活物3(STAT3)及磷酸化STAT3(p-STAT3)的蛋白表达情况。结果 1染毒24 h后,10.00 mmol/L TCE染毒组活化T细胞的存活率分别低于对照组和DMSO组(P<0.05)。2 0.00、2.50和5.00 mmol/L剂量的TCE作用于活化T细胞时,细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05)。3 0.32、0.63、1.25、2.50和5.00 mmol/L TCE染毒组活化T细胞培养上清液中IL-2与IL-6水平均高于对照组(P<0.05);随着TCE染毒剂量的增加,活化T细胞分泌的IL-2和IL-6水平均上升(P<0.01),均呈剂量-效应关系。5个TCE染毒组活化T细胞培养上清液中IL-17A、IFN-γ和TGF-β表达水平分别与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。4对照组活化T细胞在各个时间点p-STAT3蛋白的表达均较低;TCE染毒组活化T细胞p-STAT3蛋白表达在0 min时间点较低,在30、60和120 min时间点均上调,且各个时间点p-STAT3蛋白表达均高于对照组。2组活化T细胞在各个时间点的STAT3总蛋白表达水平较为一致,且均相对高于p-STAT3蛋白。结论 TCE对活化T细胞的最大无作用剂量为5.00mmol/L。高剂量TCE(≥10.00 mmol/L)可对活化T细胞造成细胞毒性损
- 吴洁王海兰吴奇峰宋向荣李宏玲赵娜
- 关键词：三氯乙烯T细胞免疫毒性细胞存活率STAT3
- 异种及同种异体间充质干细胞移植免疫排斥及免疫调节作用研究
- 【目的】体内实验研究异种及同种异体间充质干细胞(MSC)移植是否引起受体动物免疫排斥,体外实验研究异种及同种异体MSC是否引起异基因T细胞活化增值,为开展MSC移植提供理论依据。【材料和方法】分离纯化人脐带间充质干细胞(...
- 赵娜李宏玲李聪吴奇峰吴洁王海兰
- 关键词：间充质干细胞免疫排斥免疫调节
- 文献传递
- 骨髓间充质干细胞对染矽尘小鼠肺部早期炎症抑制作用被引量：6
- 2016年
- 目的研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对染矽尘小鼠肺部早期炎症的影响。方法取5只无特定病原体级健康雄性C57BL/6小鼠,采用全骨髓贴壁法分离培养BMSCs。取30只同类小鼠随机分为对照组、二氧化硅组和BMSCs移植组3组,以气管暴露法建立动物模型,对照组小鼠予气管内一次性注射0.90%氯化钠溶液20.0μL;二氧化硅组和BMSCs移植组小鼠先予气管内一次性注射20.0μL质量浓度为250 g/L的二氧化硅混悬液,6 h后再分别经尾静脉输注500.0μL的0.90%氯化钠溶液或细胞密度为1×109/L的BMSCs悬液。造模后第7天处死小鼠,观察肺组织病理学改变情况,采用酶联免疫吸附实验检测小鼠血清中白细胞介素(IL)-1β、IL-6和IL-10水平,采用实时定量聚合酶链反应仪检测小鼠肺组织中上述细胞因子mRNA的表达情况。结果 BMSCs表面分子分化抗原(CD)29、CD34、CD90、CD105、CD106的阳性率分别为67.70%、0.12%、39.00%、37.10%和20.10%。肺组织病理学观察显示,二氧化硅组小鼠肺泡壁增厚,肺泡间隔增宽,肺泡结构破坏;BMSCs移植组肺组织结构无明显破坏,肺泡腔大小均匀,肺泡结构完整。二氧化硅组小鼠血清中IL-1β、IL-6水平以及肺组织中IL-1β、IL-6 mRNA相对表达水平分别高于对照组和BMSCs移植组(P<0.05),BMSCs移植组小鼠血清中IL-1β水平和肺组织中IL-1βmRNA相对表达水平均高于对照组(P<0.05)。各组小鼠血清中IL-10水平和肺组织中IL-10 mRNA相对表达水平分别比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 BMSCs可通过下调促炎因子IL-1β和IL-6的表达减轻染矽尘小鼠肺部早期炎性损伤。
- 吴洁宋向荣唐媛李延利左大明赵娜王海兰
- 关键词：骨髓间充质干细胞白细胞介素小鼠
- 骨髓间充质干细胞减轻染矽尘小鼠肺泡炎机制研究被引量：10
- 2016年
- 目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)减轻染矽尘小鼠肺泡炎的机制。方法取无特定病原体级健康雄性C57BL/6小鼠5只,以全骨髓贴壁法分离培养BMSCs,通过三系分化诱导实验鉴定其多向分化能力。取45只同类小鼠随机分为对照组、二氧化硅(SiO_2)组和BMSCs移植组。经气管软骨间隙,对照组小鼠予一次性注射0.90%氯化钠溶液20.0μL;SiO_2组和BMSCs移植组小鼠先予一次性注射质量浓度为250 g/L的SiO_2混悬液20.0μL,6 h后经鼠尾静脉分别一次性输注500.0μL的0.90%氯化钠溶液或BMSCs(细胞密度为1×109/L)。造模后第3天处死小鼠,检测肺系数并观察肺部组织病理学改变情况,采用酶联免疫吸附实验检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞因子表达情况,瑞氏-吉姆萨染色BALF中细胞并计数,流式细胞仪(FCM)检测小鼠BALF中巨噬细胞百分比。结果 BMSCs经成骨、成脂、成软骨诱导分化后成功培育出骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞。染尘后第3天,SiO_2组小鼠出现肺泡炎的组织病理学改变;BMSCs移植组小鼠的肺组织结构正常,无明显炎性改变。SiO_2组小鼠肺系数高于对照组(P<0.05),BMSCs移植组小鼠肺系数低于SiO_2组(P<0.05),且与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。SiO_2组小鼠BALF中白细胞介素(IL)-1β、IL-6和趋化因子配体3表达水平均较对照组上调(P<0.05),BMSCs移植组小鼠上述3个指标均较SiO_2组下调(P<0.05),恢复至对照组的水平(P>0.05)。SiO_2组和BMSCs移植组小鼠BALF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平均高于对照组(P<0.05),BMSCs移植组小鼠TNF-α表达水平与SiO_2组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。3组小鼠BALF中IL-10表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。瑞氏-吉姆萨染色细胞结果显示:SiO_2组小鼠BALF中总细胞和巨噬细胞数目均高于对照组(P<0.05),BMSCs移植组小鼠上述2个指标均低于SiO_2组(P<0.05),与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)�
- 吴洁王海兰宋向荣陈晓燕蔡婷峰唐媛黄钊霞李会方蔡学敏李宏玲左大明赵娜
- 关键词：骨髓间充质干细胞炎症巨噬细胞小鼠
- 三氯乙烯对JurkatT细胞免疫毒性作用初步研究
- 目的：研究三氯乙烯(TCE)对Jurkat T细胞免疫毒性.
方法：分别采用不同剂量的TCE(10、5、2、1、0.5、0.1mmol/L)作用于初始Jurkat T细胞及用佛波酯(PMA)和离子霉素(IO)活...
- 赵娜晏程吴洁李宏玲李聪吴奇峰宋向荣阙冰玲王海兰
- 关键词：三氯乙烯免疫毒性
- 异种及同种异体间充质干细胞免疫排斥及细胞免疫调节作用研究被引量：5
- 2015年
- 目的观察异种及同种异体间充质干细胞(MSC)移植所致的免疫排斥反应,及其对异基因T细胞活化增殖的细胞免疫调节作用。方法分离、纯化人脐带间充质干细胞(h UC-MSC)及小鼠骨髓间充质干细胞(m BM-MSC),经流式细胞仪鉴定其表面标志物。在体实验:取20只无特定病原体级健康雌性BALB/C小鼠,随机分成h UC-MSC输注组和m BM-MSC输注组(分别于第1、4和15天经尾静脉注射2×106个相应的MSC),溶剂对照组(于相同时间点经尾静脉注射等体积质量分数为0.90%的氯化钠溶液)和空白对照组(不作任何处理),每组5只;上述处理结束后,继续饲养15 d,观察小鼠急性免疫排斥反应情况。离体实验:取初始T细胞或活化T细胞作为实验细胞,分为对照组、h UC-MSC组和m BM-MSC组,后2组以相应的MSC和T细胞共培养,对照组不加MSC培养;观察MSC对T细胞的细胞因子分泌、表面活化标志及增殖的影响。结果小鼠经多次尾静脉移植h UC-MSC及m BM-MSC后均未出现明显急性免疫排斥反应。初始T细胞离体实验中,h UC-MSC组、m BM-MSC组分别与对照组比较,T细胞培养上清中白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)水平,T细胞的早、中和晚期活化标志物分化抗原(CD)69、CD25和CD71的表达水平以及T细胞增殖率差异均无统计学意义(P>0.05)。活化T细胞离体实验中,h UC-MSC组、m BM-MSC组分别与对照组比较,T细胞培养上清中IL-2和IFN-γ水平均下降(P<0.01),T细胞的CD69、CD25和CD71的表达水平均下调(P<0.05),T细胞增殖率均下降(P<0.05)。结论 MSC不引起受体动物急性免疫排斥反应,不激活异基因T细胞,能抑制异基因T细胞活化与增殖,提示异种及同种异体MSC均无免疫原性,且能发挥细胞免疫调节作用。
- 赵娜吴洁李宏玲李聪吴奇峰王海兰
- 关键词：脐带骨髓免疫排斥免疫调节T细胞
- 骨髓间充质干细胞治疗矽肺小鼠肺纤维化效果被引量：15
- 2017年
- 目的观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)改善矽肺小鼠肺纤维化的效果。方法取无特定病原体级健康雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、矽肺组和治疗组,每组10只。采用气管暴露法,对照组小鼠予一次性注射0.90%氯化钠溶液20.0μL,矽肺组和治疗组小鼠均一次性注射质量浓度为250 g/L的矽尘混悬液20.0μL;于造模第4周,治疗组小鼠经鼠尾静脉一次性输注细胞密度为2×10~9/L的BMSCs混悬液250.0μL,矽肺组小鼠输注0.90%氯化钠溶液250.0μL,每周1次,连续治疗4周;对照组小鼠不予任何处理。末次治疗后2周,处死小鼠。观察肺组织病理学改变,进行肺纤维化评分(Aschcroft评分);检测肺脏脏器系数、肺组织中羟脯氨酸(HYP)和血清中转化生长因子-β(TGF-β)水平,检测脾脏和肺门淋巴结(HLN)中辅助性T细胞17(Th17细胞)和调节性T细胞(Treg细胞)比率。结果肺组织病理学检查结果显示:BMSCs移植疗程结束后,矽肺组小鼠肺部严重纤维化,见大量胶原纤维,且出现大量矽结节;治疗组小鼠肺部见轻度纤维化,见少量胶原纤维,矽结节数量明显减少。矽肺组小鼠肺脏器系数、Aschcroft评分、肺组织中HYP水平、血清中TGF-β水平以及脾脏和HLN中Th17细胞比率均高于对照组(P<0.05),治疗组小鼠上述指标均低于矽肺组(P<0.01)。矽肺组小鼠脾脏和HLN中Treg细胞比率均低于对照组(P<0.05);治疗组小鼠上述指标均高于矽肺组(P<0.01)。结论 BMSCs可有效改善矽肺小鼠的肺纤维化,且可纠正矽肺小鼠体内Th17/Treg失衡。
- 赵娜吴洁宋向荣宋向荣李宏玲蔡学敏
- 关键词：矽肺肺纤维化TH17细胞TREG细胞转化生长因子-Β
- 骨髓间充质干细胞减轻染矽尘小鼠肺泡炎机制研究
- 目的：探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)减轻染矽尘小鼠肺泡炎的机制.
方法：取无特定病原体级健康雄性C57BL/6小鼠5只,以全骨髓贴壁法分离培养BMSCs,通过三系分化诱导实验鉴定其多向分化能力.取同类小鼠随...
- 吴洁王海兰宋向荣陈晓燕蔡婷峰唐媛黄钊霞李会方蔡学敏左大明赵娜
- 关键词：矽肺骨髓间充质干细胞移植肺部炎症干预机制
