王林玲
- 作品数：70 被引量：218H指数：7
- 供职机构：重庆师范大学更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金国家高技术研究发展计划重庆市教育委员会科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学文化科学轻工技术与工程更多>>
- 用于青枯劳尔氏菌快速检测的靶标内切葡聚糖酶抗体制备与检测试验被引量：2
- 2016年
- 桑青枯病是一种土传性细菌病害,其病原为青枯劳尔氏菌(Ralstonia solanacearum)。内切葡聚糖酶(EGL)是青枯劳尔氏菌在胞内合成后分泌、吸附于细胞壁周围的一个重要毒力因子,研究以其为靶标的桑青枯病快速检测诊断技术,可以为病害防控提供技术支持。从青枯劳尔氏菌G12-50菌株中克隆了egl基因,将青枯劳尔氏菌与土壤常见的4种细菌以及植物常见的4种病原细菌的内切葡聚糖酶进行氨基酸序列多重比对,其同源性较低。构建重组质粒p ET32a-EGL转化大肠杆菌BL21融合表达EGL蛋白,制备的抗EGL多克隆抗体经ELISA检测其效价达1∶20 000,Western blot分析亦呈现单一的特异性条带。用制备的抗体对培养的青枯劳尔氏菌G12-50菌液和感染桑青枯病的桑茎汁液进行Western blot检测,结果出现明显的特异性条带,而对照大肠杆菌则没有出现条带。研究结果表明,青枯劳尔氏菌的内切葡聚糖酶可以作为桑青枯病早期检测诊断的病原靶标,直接应用于对桑园土壤和桑树样品的快速检测。
- 白利叶范晓东周泽扬王林玲
- 关键词：桑青枯病胶体金免疫层析内切葡聚糖酶多克隆抗体
- 家蚕卵蛋白的SDS-PAGE分析被引量：1
- 2012年
- 本研究探讨了蛋白质提取方法、十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)条件对家蚕卵蛋白分离效果的影响。分别用裂解液提取法、TCA沉淀法、冷丙酮沉淀法和TCA-丙酮沉淀法制备蛋白质样品,然后进行6%～12%、6%～15%两种梯度胶的SDS-PAGE,获得了不同提取方法和电泳条件下的电泳图谱用以比较家蚕卵蛋白分离效果。结果表明用TCA-丙酮沉淀法除盐,再用含9 mol.L-1尿素、4%CHAPS、1%DTT的裂解液重悬,最适合家蚕卵蛋白提取;6%～12%梯度胶对家蚕卵蛋白的分离较为适宜。利用这一优化方法对家蚕感染微孢子虫的蚕卵和正常蚕卵进行了比较研究,在分子量66 kD和85 kD处找到了与感染微孢子虫相关的蛋白,为进一步进行正常蚕卵和感染微孢子虫蚕卵的蛋白质组学研究奠定了基础。
- 姜春宝王林玲王钰王丽君
- 关键词：家蚕卵微孢子虫蛋白质提取
- 生物医学类硕士研究生基础实验教学课教学内容设置的改进
- 2014年
- 生命科学是建立在实验基础上的学科，实验教学在生物医学类硕士研究生的培养中具有十分重要的作用。有针对性地设置基础实验教学内容，既能让硕士研究生打下坚实的实验基础，同时又能促其紧跟生物科学发展的前沿。将生物医学类硕士研究生的基础实验教学内容统一设置为分子生物学实验、蛋白质组学实验、生物信息学实验和大型仪器设备使用四大类：每大类实验教学又分别设置验证性实验、综合性实验和自主研究性实验三小类项目。通过提高大型仪器设备的开放程度，改进教学手段，完善硕士研究生基础实验课的考核评价方式等；培养其实验技能、研究和创新能力，从而提高实验教学质量。
- 安欢迎熊青山白利叶王林玲
- 关键词：基础实验课教学内容设置
- 一种手术机器人手术器材
- 本发明公开了一种手术机器人手术器材，属于手术机器人领域，包括：钳头，其和人体组织接触，用于对人体组织进行直接操作；器材管，所述的器材管连接钳头；固定部，其和器材管连接，固定部内设有至少两个电机，固定部通过器材管驱动钳头张...
- 王林玲
- 雷公藤甲素人工抗原及制备方法和多克隆抗体
- 本发明公开了一种雷公藤甲素人工抗原及制备方法和多克隆抗体，涉及免疫学领域。雷公藤甲素人工抗原由雷公藤甲素、对氨基苯甲酸以及载体蛋白偶联而成。其制备方法其包括：将对氨基苯甲酸重氮化；将重氮化的对氨基苯甲酸与雷公藤甲素偶联，...
- 王林玲刘佳
- 文献传递
- 家蚕羧酸酯酶基因克隆及差异表达被引量：13
- 2006年
- 家蚕浓核病毒(Bombyx moridensonucleosis virus,BmDNV)是蚕业生产上危害比较严重的一类病毒。用完全抗浓核病中国镇江株(BmDNV-Z)的家蚕品系秋丰、感性品系华八及以华八为轮回亲本回交8代和自交8代构建的近等基因系BC8为材料,采用mRNA荧光差显技术首次分离克隆了家蚕羧酸酯酶(B.moricarboxylesterase,BmCarE)基因全长cDNA,并用实时荧光定量PCR检测了添毒后12h、36h、72h BmCarE在感、抗BmDNV-Z家蚕品系中肠内的表达差异。结果表明:(1)添毒后12h不同品系家蚕中肠BmCarE表达差异最大,抗性品系BC8和秋丰分别是感性品系华八的17.714倍和3.602倍,三者彼此间的差异达到极显著水平;(2)同一品系添毒后12h与添清水后12hBmCarE表达也有较大差异,BC8添毒是BC8添清水的15.08倍,秋丰添毒是秋丰添清水的3.39倍,差异达到极显著水平,而华八添毒和添清水的BmCarE表达量均低,二者差异不显著;(3)同一品系添毒后不同时间BmCarE表达也有较大差异,BC8和秋丰添毒后12h BmCarE表达量最高,显著高于各自添毒后36h和72h表达水平,而添毒后36h与72h表达无显著差异;华八添毒后12h、36h和72h,BmCarE表达无显著差异。上述结果提示羧酸酯酶基因可能与家蚕抗浓核病毒有一定关系。
- 高贵田陈克平姚勤王林玲陈慧卿
- 关键词：家蚕近等基因系RT-PCR
- 柞蚕微孢子核糖体基因和转录间隔区的序列及系统进化分析被引量：7
- 2006年
- 目的研究柞蚕微孢子(Nosemaantheraeae)的核糖体基因,转录间隔区(ITS)以及它们的排列顺序,为柞蚕微孢子的分类和系统进化分析提供分子生物学方面的依据。方法采用特异引物进行PCR扩增,克隆和测序。用DNAStar软件,用ClustalW的比对方法得到遗传距离和系统进化树。结果得到柞蚕微孢子的核糖体小亚基rRNA(SSUrRNA),转录间隔区(ITS),5SrRNA的全长,得到核糖体大亚基rRNA(LSUrRNA)的部分序列。结论柞蚕微孢子的核糖体基因排列顺序为LSU-ITS1-SSU-ITS2-5S与Nosemabombycis相同,是一种比较特殊的排列方式。将微孢子SSUrRNA基因和ITS结合起来分析微孢子的亲缘关系是一个新的尝试。
- 王林玲陈克平姚勤高贵田赵远
- 关键词：核糖体基因转录间隔区
- 鱼鳞胶原蛋白的提取与应用研究进展被引量：1
- 2017年
- 本文从中国当前渔业经济未完整、充分开发鱼类资源的现状出发,综述了鱼鳞中胶原蛋白的常规提取方法,即水提取、热提取与酶提取的最优工艺。列举了其在医学、美容与食品三大领域的应用情况,希望能为我国鱼类资源的充分回收与进一步开发提供可操作性的参考途径,为农业经济的可持续发展助力。
- 郑雪丽王林玲
- 关键词：渔业经济胶原蛋白
- 柞蚕微孢子虫长极丝型孢子总蛋白的鉴定及功能分析被引量：1
- 2014年
- 柞蚕(Antheraea pernyi Guerin-Meneville)是中国北方重要的吐丝经济昆虫,柞蚕微孢子虫(Nosema antheraeae)引起的柞蚕微粒子病是柞蚕产业毁灭性的病害。本研究采用梯度Percoll-NaCl溶液分离纯化柞蚕微孢子虫,提取柞蚕微孢子虫总蛋白,胰蛋白酶消化,然后通过LC-MS/MS精确获得各肽段分子量,经数据库比对后共鉴定到610个蛋白。对鉴定到的蛋白质进行GO蛋白质功能分析,发现孢子时期参与大分子复合物及结构分子活性的蛋白的较多,而参与细胞催化和绑定功能、细胞过程及代谢过程的表达蛋白的所占的比例明显低于预测基因的的比例。研究认为这一结果主要与孢子期的微孢子虫脱离宿主细胞,生理不活跃,处于相对静止的时期,没有能量和物质来源有关;微孢子虫通过降低细胞活动和物质代谢,从而适应所处的环境。
- 龚娟娟许金山李治党晓群周泽扬王林玲
- 关键词：柞蚕微孢子虫蛋白质功能分析
- 意大利蜜蜂铁蛋白基因AmFer3HCH的克隆及其在温度胁迫下的应答被引量：1
- 2018年
- 【目的】本研究旨在克隆鉴定意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica铁蛋白基因Am Fer3HCH,分析其在意大利蜜蜂应对温度胁迫时的组织表达变化,探讨铁蛋白Am Fer3HCH在蜜蜂应对环境温度胁迫中的作用。【方法】PCR扩增意大利蜜蜂铁蛋白基因Am Fer3HCH的cDNA序列,并对其编码氨基酸序列进行生物信息学鉴定;实时定量PCR分析该基因在不同温度(40℃和5℃)胁迫下的意大利蜜蜂工蜂成虫胸、中肠和脂肪体中的表达变化。【结果】PCR扩增获得意大利蜜蜂铁蛋白基因Am Fer3HCH,cDNA片段大小为507 bp,其核苷酸序列与GenBank意大利蜜蜂基因组数据库中的铁蛋白基因Fer3HCH(GenBank登录号:GB55416)的完全一致,确认为Am Fer3HCH基因序列。Am Fer3HCH鉴定为重链型铁蛋白,在系统进化上聚类于重链型铁蛋白分支,其氨基酸序列具有重链型铁蛋白特有的Fe2+氧化酶活性中心,含有铁蛋白家族成员所共有的水合氧化铁成核中心和铁离子通道。实时定量PCR分析显示,与对照组相比在短时高温(40℃,0~48 h)胁迫过程中,Am Fer3HCH在意大利蜜蜂工蜂成虫胸、中肠和脂肪体中的表达水平整体呈先上升、后下降再上升的趋势;在低温(5℃,0~6 h)胁迫处理过程中,中肠和脂肪体中Am Fer3HCH基因的表达量呈先上升后下降趋势,而在胸中表达量逐渐下降。【结论】意大利蜜蜂铁蛋白Am Fer3HCH为重链型铁蛋白,在意大利蜜蜂对极端温度胁迫的应答中扮演了重要的角色。
- 马荣琴王林玲衡惠周泽扬李治
- 关键词：意大利蜜蜂铁蛋白基因克隆温度胁迫
