党晓群
- 作品数：59 被引量：61H指数：4
- 供职机构：重庆师范大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市教育委员会科学技术研究项目重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程文化科学更多>>
- 家蚕微孢子虫表面蛋白NBO_33g0013的序列特征及亚细胞定位与功能分析被引量：2
- 2017年
- 选择家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)表面蛋白质谱数据库中新发现的假定表面蛋白NBO_33g0013进行研究,了解该蛋白质的功能及是否参与微孢子虫对宿主细胞的侵染过程。预测该蛋白质分子质量为26.1 k D,等电点为4.59,其序列N端具有信号肽,无跨膜螺旋结构,含3个N-糖基化位点,无O-糖基化位点,不具有典型的功能结构域,与柑橘凤蝶微孢子虫(Papilio xuthus)的一个假定蛋白序列相似度达到93%。以家蚕微孢子虫CQ1分离株的基因组DNA为模板克隆该蛋白质的编码基因,构建重组表达载体进行该蛋白质的原核表达,并制备获得多克隆抗体,通过间接免疫荧光分析确证该蛋白质定位在家蚕微孢子虫孢子表面。经体外细胞感染实验初步分析,尚未发现该蛋白质参与了微孢子虫孢子对宿主Bm E细胞的粘附过程,推测该蛋白质可能为家蚕微孢子虫孢壁的结构组成型蛋白质,在孢壁的构架形成中发挥作用。
- 刘泽锋马振刚王林玲游小林王李党晓群李治周泽扬
- 关键词：家蚕微孢子虫表面蛋白原核表达亚细胞定位
- 家蚕微孢子虫诊断方法研究进展被引量：2
- 2008年
- 家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)因其能经食下和胚种途径寄生于家蚕,引发严重的传染性微粒子病,造成巨大的经济损失,成为近100年来影响蚕业生产的难题,因而被世界各养蚕国家和地区列为蚕种生产的惟一检疫对象。多年来,广大学者对其病原、检测技术及防治方法等方面进行了大量的研究,取得了较大进展。本文主要从光镜检测、电镜观察、分子生物学技术以及血清学检测4个方面综述近几十年来关于微孢子虫诊断方面的研究进展,并展望新技术的诞生。
- 芦琨党晓群潘国庆周泽扬
- 关键词：微孢子虫光镜电镜分子生物学检测
- 东方蜜蜂微孢子虫环介导恒温扩增检测方法的建立
- 2016年
- 以从重庆酉阳分离到的东方蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)为研究对象,以该物种16SrDNA作为靶标,设计引物并采用环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术检测东方蜜蜂微孢子虫。实验结果显示,LAMP检测的最佳条件为内引物浓度5μmol·L^(-1),聚合酶用量800U;以研究对象16SrDNA质粒为模板,LAMP检测的最低质量浓度为1.735×10^(-2)ng·μL^(-1),PCR检测的最低质量浓度为1.735×10^(-1)ng·μL^(-1);以研究对象基因组DNA为模板,LAMP检测的最低质量浓度为1.475×10^(-3)ng·μL^(-1),PCR检测的最低质量浓度为1.475×10^(-1)ng·μL^(-1);以研究对象基因组DNA、正常中蜂(Apis cerana)中肠基因组DNA、正常意蜂(Apis mellifera ligustica)中肠基因组DNA、正常家蚕(Bombyx mori)中肠基因组DNA、蜜蜂球囊菌(Ascosphaera apis)孢子基因组DNA和中蜂囊状幼虫病毒cDNA作为模板进行检测,其中只有以研究对象基因组DNA为模板时,LAMP扩增才有条带。以上研究提示具有高灵敏度和高特异性的LAMP检测方法是东方蜜蜂微孢子虫检测的一个有效工具,可为后期在养蜂场建立快速有效的检测工具奠定基础。
- 何美妍史红霞宋珍珍党晓群
- 关键词：环介导等温扩增RDNA分子检测
- 家蚕微孢子虫经不同冻存条件处理后对家蚕胚胎细胞的侵染性变化被引量：2
- 2014年
- 为了解家蚕微孢子虫保存方法对其侵染性的影响及大量获得细胞感染实验材料,将采用不同冻存液及冻存法处理的家蚕微孢子虫分别接种于家蚕胚胎细胞(Bm E),调查家蚕微孢子虫对细胞的感染率及感染细胞的传代能力。与液氮直接冻存法处理和高温高压灭菌法处理的微孢子虫相比较,用液氮梯度冻存法处理的微孢子虫的粘附率和感染率均显著或极显著提高。采用液氮梯度冻存法以水作冻存液处理的微孢子虫对宿主细胞的感染率为64%,感染细胞能进行连续传代培养;而以含10%二甲基亚砜(DMSO)的胎牛血清作冻存液处理的微孢子虫虽然对宿主细胞的感染率达到80%,但感染细胞在培养7 d后大量破裂死亡。因此,选用以水作冻存液经液氮梯度冻存法处理的家蚕微孢子虫有利于感染Bm E细胞并在细胞内增殖,从而获得大量的细胞感染实验材料。
- 马强党晓群王营陈洁刘方燕赵丽芳曹琛福吕建强潘国庆周泽扬
- 关键词：家蚕微孢子虫侵染性
- 家蚕微孢子虫（Nosema bombycis）功能基因组研究
- 病原微生物的分泌蛋白酶主要参与自身发育和代谢调节。近年来,分泌性蛋白酶作为致病性真菌的重要毒力因子已经进行了深入的研究,发现这些酶不仅参与粘附和入侵过程,还可以与宿主的免疫系统相互作用。作为丝氨酸蛋白酶家族的枯草杆菌蛋白...
- 党晓群
- 关键词：家蚕微孢子虫酶活免疫定位
- 文献传递
- 从梨花浅粉蝶中分离得到一种微孢子虫的进化分析
- 本研究探讨从梨花迁粉蝶(Catopsilia pyranthe)中分离得到的一种微孢子虫的种属地位及进化关系,测定了其体内核糖体SSUrDNA、ITS及其微管蛋白基因alpha-tubulin序列.根据Nosema sp...
- 郑丽金何强党晓群李治许金山周泽扬
- 柞蚕微孢子虫长极丝型孢子总蛋白的鉴定及功能分析被引量：1
- 2014年
- 柞蚕(Antheraea pernyi Guerin-Meneville)是中国北方重要的吐丝经济昆虫,柞蚕微孢子虫(Nosema antheraeae)引起的柞蚕微粒子病是柞蚕产业毁灭性的病害。本研究采用梯度Percoll-NaCl溶液分离纯化柞蚕微孢子虫,提取柞蚕微孢子虫总蛋白,胰蛋白酶消化,然后通过LC-MS/MS精确获得各肽段分子量,经数据库比对后共鉴定到610个蛋白。对鉴定到的蛋白质进行GO蛋白质功能分析,发现孢子时期参与大分子复合物及结构分子活性的蛋白的较多,而参与细胞催化和绑定功能、细胞过程及代谢过程的表达蛋白的所占的比例明显低于预测基因的的比例。研究认为这一结果主要与孢子期的微孢子虫脱离宿主细胞,生理不活跃,处于相对静止的时期,没有能量和物质来源有关;微孢子虫通过降低细胞活动和物质代谢,从而适应所处的环境。
- 龚娟娟许金山李治党晓群周泽扬王林玲
- 关键词：柞蚕微孢子虫蛋白质功能分析
- 蜂蜜中原蜜黄酮类化合物HPLC图谱比较分析被引量：3
- 2017年
- 利用高效液相色谱比较分析不同蜂种、不同产地、加工与否以及不同蜜源蜂蜜中原蜜黄酮类化合物的种类及含量差异。结果表明,意大利蜜蜂油菜原蜜和中华蜜蜂油菜原蜜总峰数和峰形都比较相似,意大利蜜蜂油菜原蜜的总黄酮含量比中华蜜蜂油菜原蜜总黄酮含量高。不同产地的意大利蜜蜂油菜原蜜的图谱峰形整体相似,总黄酮含量和黄酮类化合物种类大致相同。加工后的商品蜜总黄酮含量减少,黄酮类化合物的种类也减少,商品蜜的高效液相色谱图显示其黄酮类化合物的出峰时间靠前,主要密集分布在水溶性的分离相中。3个不同蜜源蜂蜜原蜜黄酮类化合物高效液相色谱图的总峰数和峰形都有较大差异,油菜原蜜、洋槐原蜜及柑橘原蜜的总峰数分别为65、58、70个,柑橘原蜜的总黄酮含量最高,达161.62μg/100 g。单花蜂蜜原蜜黄酮类化合物的高效液相色谱图峰形具有一定的特异性,可以作为指纹图谱用于蜂蜜蜜源的鉴定。
- 王琴李治党晓群周泽扬王林玲
- 关键词：意大利蜜蜂中华蜜蜂黄酮类化合物蜜源
- 中华蜜蜂NPC1蛋白AcNPC1的原核表达、多克隆抗体制备及功能鉴定被引量：1
- 2020年
- 【目的】人类C型尼曼匹克病(Niemann-Pick disease type C,NPC)主要是由NPC1基因突变引起的一类遗传疾病。NPC1蛋白主要负责胞内胆固醇运输,同时也作为病毒侵染宿主细胞的重要受体之一近年来备受关注。本研究旨在探究NPC1蛋白与中华蜜蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV)感染的关系。【方法】通过PCR扩增中华蜜蜂Apis cerana cerana AcNPC1基因;将其克隆至pET-30a原核表达载体,转化至大肠杆菌Escherichia coli Rosetta TM(DE3)进行IPTG诱导表达,采用镍柱纯化重组蛋白,免疫小鼠制备多克隆抗体。设计并合成AcNPC 1 siRNA,添食中华蜜蜂幼虫;运用RT-qPCR检测和分析中华蜜蜂CSBV添毒幼虫中AcNPC1的表达量,以及RNAi干扰后不同时间AcNPC1基因和CSBV病毒衣壳蛋白VP1基因在感染CSBV的中华蜜蜂幼虫中的表达水平。【结果】成功构建重组表达质粒pET-30a-AcNPC 1,在大肠杆菌中获得高效表达的重组蛋白,目的蛋白大小约为36 kD,经亲和纯化获得了纯度较高的重组蛋白,免疫小鼠成功制备了多克隆抗体,免疫印迹分析发现AcNPC1抗体能杂交到两条带,有可能是在提取膜蛋白过程中该蛋白发生了部分降解。中华蜜蜂CSBV添毒幼虫中AcNPC1表达与正常幼虫中的相比,在12,24和48 h并无显著变化,在72 h出现显著上调。RNAi实验结果表明,中华蜜蜂正常幼虫添食24 h后AcNPC1的3个干涉片段(siRNA1,siRNA2 and siRNA3)均对AcNPC 1具有显著性下调作用,AcNPC1表达分别下调了73.20%,72.81%和54.78%;给CSBV添毒幼虫分别添食3个干涉片段,AcNPC1表达分别下调了43.90%,59.85%和57.67%。CSBV VP1基因在干扰AcNPC1基因72 h后表达下调了67.65%。【结论】利用原核表达系统能有效地在体外表达中华蜜蜂AcNPC1,并制备了其多克隆抗体。利用体外合成的siRNA对中华蜜蜂幼虫中AcNPC1的表达进行干扰,表明在蜜蜂中通过饲喂的方式进行RNAi可以成功下调靶标基因表达水平。不过,RN
- 刘永梅史红霞李颜马振刚王林玲许金山周泽扬党晓群
- 关键词：中华蜜蜂原核表达表达谱RNA干扰SIRNA
- 中华蜜蜂囊状幼虫病毒和东方蜜蜂微孢子虫顺序感染对中华蜜蜂营养和免疫的影响
- 2023年
- 【目的】中华蜜蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV)和东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae都是严重威胁蜜蜂健康的重要病原,本研究旨在探究2种病原顺序感染对中华蜜蜂Apiscerana cerana存活率、营养代谢和免疫的影响。【方法】设置中华蜜蜂取食正常食物、先喂食CSBV后喂食东方蜜蜂微孢子虫和先喂食东方蜜蜂微孢子虫后喂食CSBV3个处理,利用PCR检测中华蜜蜂在取食第2天和第4天后体内病原增殖情况;通过RT-qPCR检测中华蜜蜂感染病原后第2天和第4天后体内CSBV数量以及营养代谢基因(ilp1、ilp2、hexamerin70b和hexamerin70c)和免疫应答基因(toll、relish、jra、apidaecin、abaecin、defensin、hymenoptaecin和JAK)的表达情况。【结果】先喂食CSBV后喂食东方蜜蜂微孢子虫组的中华蜜蜂体内孢子量高于先喂食东方蜜蜂微孢子虫后喂食CSBV组,而先喂食CSBV后喂食东方蜜蜂微孢子虫组的中华蜜蜂体内CSBV拷贝数显著高于先喂食东方蜜蜂微孢子虫后喂食CSBV组。先喂食CSBV后喂食东方蜜蜂微孢子虫组的中华蜜蜂营养代谢基因ilp1、ilp2、hexamerin70c和hexamerin70b的表达水平随感染时间延长逐渐呈现下调,而先喂食东方蜜蜂微孢子虫后喂食CSBV组中显著上调。先喂食CSBV后喂食东方蜜蜂微孢子虫组中华蜜峰免疫基因toll和relish表达量呈现先增加后下降,而jra、JAK、apidaecin、abaecin、defensin和hymenoptaecin的表达量显著增加,而先喂食东方蜜蜂微孢子虫后喂食CSBV组中8个免疫基因的表达量均显著增加。【结论】在顺序感染过程中,东方蜜蜂微孢子虫的感染抑制CSBV的增殖,而CSBV的感染则有助于东方蜜蜂微孢子虫的增殖。先喂食CSBV比先喂食东方蜜蜂微孢子虫对中华蜜蜂营养和生长发育的影响更显著,且更易引起宿主的免疫防御,表明CSBV与东方蜜蜂微孢子虫顺序感染中蜂后引起的免疫应答及营养代谢更为复杂。
- 王程程张真李小青郭悦马振刚周泽扬党晓群
- 关键词：中华蜜蜂营养免疫
