朱威
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
- 供职机构：江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：江苏省卫生厅科研基金国家高技术研究发展计划食品科学与技术国家重点实验室科研基金更多>>
- 相关领域：生物学化学工程农业科学轻工技术与工程更多>>
- 重组毕赤酵母生产β-葡萄糖苷酶发酵条件初步研究被引量：1
- 2010年
- 为提高重组毕赤酵母(P.pastoris KM71/pPIC9K-bgl)生产β-葡萄糖苷酶的产量,在摇瓶条件下对重组P.pastoris产β-葡萄糖苷酶的发酵过程进行了优化,得到最佳的条件:生长阶段甘油浓度为30 g/L,接种量为10%,诱导阶段甲醇的初浓度为4%,过程补加甲醇0.5%,诱导温度30℃,pH7.5,诱导周期120 h,酶活可达到245 U/mL。在此基础上,在3 L发酵罐上进行初步放大,流加甘油提高细胞密度至OD_(600)为170,开始流加甲醇诱导,最终BGL酶活达到1 175 U/mL。比摇瓶提高了4.8倍,为β-葡萄糖苷酶工业化生产打下了坚实的基础。
- 刘玲玲吴丹朱威陈晟陈坚吴敬
- 关键词：Β-葡萄糖苷酶重组毕赤酵母发酵优化
- 人GCSF-白蛋白融合蛋白的构建及在毕赤酵母中的表达被引量：6
- 2008年
- 制备人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)与人血清白蛋白(HSA)的融合蛋白。从新鲜人外周血中分离单核细胞,给予大肠杆菌脂多糖刺激后,RT-PCR制备G-CSF cDNA,以其为模板扩增得到人G-CSF的编码区序列(525 bp)。重叠PCR拼接HSA-GCSF融合基因(2277 bp),序列测定正确,中间未加入任何连接肽。插入表达载体pPIC9K中α交配因子的开放阅读框内,构建分泌型表达重组质粒pPIC9K-HSA-GCSF。电击转化毕赤酵母菌KM71,G418筛选得到高拷贝转化子。甲醇诱导表达融合蛋白,SDS-PAGE鉴定融合蛋白的相对分子质量约为84 k,Western blot分析融合蛋白为G-CSF与HSA的杂合分子,NFS-60细胞/MTT比色法测定融合蛋白具有G-CSF的生物学活性。结果:构建了可分泌表达HSA-GCSF融合蛋白的毕赤酵母工程菌,为进一步对其进行药学研究奠定了基础。
- 徐钰孙钧铭张莲芬窦文芳李洁朱威朱书峰金坚
- 关键词：人粒细胞集落刺激因子人血清白蛋白融合蛋白毕赤酵母
- 羟喜树碱结合肽的结合作用分析被引量：1
- 2009年
- 目的:对羟喜树碱结合肽进行结合作用分析,为进一步研究阐明羟喜树碱的抗癌机制、耐药机制以及毒理机制提供帮助。方法:使用生物信息学软件对羟喜树碱结合肽序列进行比对分析,寻找羟喜树碱结合肽同源保守性模式,对羟喜树碱结合肽进行结合作用分析。结果:羟喜树碱结合肽原始序列的保守性模式为xxxxxLxPxxxx。其中L、P皆为疏水脂肪族氨基酸。依据氨基酸可以分为疏水脂肪族氨基酸、疏水芳香族氨基酸、极性带电氨基酸和极性不带电氨基酸的原则,分别以G、F、R、N四个符号来代表四大类氨基酸,对羟喜树碱结合肽原始序列进行了简并转换,羟喜树碱结合肽简并序列的保守性模式为xGxxGGGNxGGx。结论:预测羟喜树碱结合肽可能通过形成疏水口袋区与羟喜树碱发生相互作用,而疏水口袋中的易形成氢键的极性不带电氨基酸则可能与羟喜树碱形成氢键,进一步稳定加强其相互作用。
- 朱威张莲芬雷楗勇金坚
- 关键词：羟喜树碱结合肽
- 羟喜树碱结合肽的研究被引量：2
- 2009年
- 酯化脱水法制备生物素化羟喜树碱,使用Resourse 15反相柱纯化,液质联用分析确证。磺酰罗丹明B染色法鉴定生物素化羟喜树碱的抗癌活性。采用噬菌体展示技术筛选得到14条羟喜树碱结合肽。构建并优化了羟喜树碱结构模型。构建并通过分子动力学优化了羟喜树碱结合肽结构模型。使用分子对接验证并分析了羟喜树碱结合肽与羟喜树碱的结合作用。
- 朱威张莲芬雷楗勇顾健德金坚
- 关键词：羟喜树碱结合肽噬菌体展示分子动力学分子对接
