朱书峰
- 作品数：2 被引量：20H指数：2
- 供职机构：江南大学生物工程学院生物制药系更多>>
- 发文基金：江苏省卫生厅科研基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：化学工程生物学农业科学更多>>
- 人GCSF-白蛋白融合蛋白的构建及在毕赤酵母中的表达被引量：6
- 2008年
- 制备人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)与人血清白蛋白(HSA)的融合蛋白。从新鲜人外周血中分离单核细胞,给予大肠杆菌脂多糖刺激后,RT-PCR制备G-CSF cDNA,以其为模板扩增得到人G-CSF的编码区序列(525 bp)。重叠PCR拼接HSA-GCSF融合基因(2277 bp),序列测定正确,中间未加入任何连接肽。插入表达载体pPIC9K中α交配因子的开放阅读框内,构建分泌型表达重组质粒pPIC9K-HSA-GCSF。电击转化毕赤酵母菌KM71,G418筛选得到高拷贝转化子。甲醇诱导表达融合蛋白,SDS-PAGE鉴定融合蛋白的相对分子质量约为84 k,Western blot分析融合蛋白为G-CSF与HSA的杂合分子,NFS-60细胞/MTT比色法测定融合蛋白具有G-CSF的生物学活性。结果:构建了可分泌表达HSA-GCSF融合蛋白的毕赤酵母工程菌,为进一步对其进行药学研究奠定了基础。
- 徐钰孙钧铭张莲芬窦文芳李洁朱威朱书峰金坚
- 关键词：人粒细胞集落刺激因子人血清白蛋白融合蛋白毕赤酵母
- 微生物转化方法生产香草酸与香草醛的初步研究被引量：14
- 2002年
- 从实验室保藏的菌种中筛选到一株黑曲霉 (Aspergillusniger)SW - 33,能够将 1g L的阿魏酸底物转化为 0 .2 3g L的香草酸 ,相应的摩尔转化率为 2 9.35 % ;流加四次底物阿魏酸后 ,产物浓度达到 1.11g L ,相应的摩尔转化率为 4 4 .9%。为了提高产物浓度 ,对培养基和发酵条件进行优化 ,使得该菌株能够将 1g l的阿魏酸底物转化为 0 .4 6g L的香草酸 ,相应的摩尔转化率为 5 7.81%。提取得到的香草酸 ,经HPLC测定 ,纯度为 85 .9% ;提取收率为 75 .2 %。用含香草酸的转化液 ,或者用提取的结晶香草酸 ,加入朱红密孔菌 (Pycnporuscinnabarnus)SW - 0 2 0 3发酵培养液 ,可得到转化产物香草醛。
- 郑志强朱书峰孙志浩
- 关键词：香草酸香草醛黑曲霉阿魏酸发酵生产
