曾文
- 作品数：7 被引量：5H指数：1
- 供职机构：中山大学附属第三医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程更多>>
- 沉默小窝蛋白1对棕榈酸作用下的胰岛β细胞存活的影响
- 2020年
- 目的探讨小窝蛋白1(Cav1)对棕榈酸作用下的胰岛β细胞存活的影响。方法通过慢病毒载体构建Cav1沉默的小鼠胰岛素瘤NIT-1细胞株和小鼠原代胰岛(Cav1-shRNA组),以空载体病毒组作为对照组(Ctrl-shRNA),并设空白对照组,各组均分别加入脱脂牛血清白蛋白和棕榈酸(0.5 mmol/L)处理24 h及48 h,通过四甲基偶氮唑蓝比色法及Hoechst33342/碘化丙啶(PI)双染色法检测细胞活性及细胞凋亡,实时荧光定量PCR、Western blot检测凋亡相关的mRNA及蛋白表达水平。结果采用t检验和单因素方差分析法进行统计学分析。结果与对照组比较,棕榈酸处理组的细胞存活率显著下降(0.89±0.10比0.24±0.04,t=13.49,P<0.01),P18、P19的mRNA和蛋白表达均上调(1.00±0.09比1.30±0.04、1.00±0.04比1.37±0.13,t=5.28、4.71,均P<0.05;0.87±0.04比1.48±0.05、1.02±0.06比1.41±0.07,t=16.50、7.33,均P<0.01);含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-6、Caspase-9和Caspase-12的mRNA表达水平明显上调(1.00±0.04比1.57±0.08、1.01±0.15比1.57±0.20、1.02±0.19比1.57±0.09,t=11.04、3.88、4.53,均P<0.05),蛋白表达也明显上调(0.86±0.10比1.28±0.11、0.69±0.01比0.86±0.06、0.70±0.02比1.18±0.01,t=4.89、4.84、37.18,均P<0.01)。而Cav1-shRNA+棕榈酸组细胞存活率较Ctrl-shRNA+棕榈酸组显著上升(0.53±0.10比0.26±0.08,t=4.71,P<0.01),P19的mRNA和蛋白表达均下调(1.53±0.18比0.66±0.04、1.48±0.05比0.70±0.02,t=8.17、25.09,均P<0.01);Caspase-6、Caspase-7、Caspase-9和Caspase-12的mRNA表达水平下调(1.82±0.11比1.03±0.07、1.43±0.24比0.42±0.15、1.41±0.22比0.51±0.18、1.45±0.18比0.42±0.13,t=5.48~10.49,均P<0.01),蛋白表达也下调(0.99±0.14比0.63±0.11、0.90±0.14比0.62±0.04、0.90±0.02比0.60±0.04、1.30±0.01比0.65±0.04,t=3.50~27.31,均P<0.01)。结论Cav1沉默可以通过影响胰岛β细胞Caspase家族,促进其增殖、减少棕榈酸作用下的β细胞凋亡,保护脂毒性下胰岛β细胞活性。
- 刘坤莹曾文林硕林楚文彭航娅李海成曾龙驿
- 关键词：小窝蛋白1细胞增殖胰岛Β细胞
- Caveolin-1沉默通过调控PI3K/Akt通路下调棕榈酸酯诱导的胰腺β细胞凋亡并促进其增殖
- 曾文李海成许海霞汤健松彭航娅林硕林楚文林可意曾龙驿
- 小凹蛋白1在棕榈酸酯诱导肝细胞脂质沉积中的作用被引量：1
- 2019年
- 目的探讨小凹蛋白1(CAV1)在棕榈酸酯(PA)诱导HepG2细胞脂质沉积中的作用及其机制。方法通过慢病毒载体构建过表达CAV1的HepG2细胞株,以空载体病毒转染组作为阴性对照组,每组细胞分别加入10%脱脂BSA和0.3mMPA处理24 h后,用油红染色观察各组细胞内脂质沉积,GPO-PAP酶法检测甘油三酯(TG)含量,qPCR检测PGC1α,sirt3的mRNA表达水平。结果 PA处理可以显著增加HepG2细胞内脂质沉积(P<0.01);与对照组相比,过表达CAV1可以显著减少细胞内脂质沉积(P<0.05),显著上调PGC1α,sirt3的mRNA表达水平(P<0.05)。结论 CAV1可能通过上调PGC1α-sirt3通路抑制PA诱导的HepG2细胞脂质沉积。
- 林楚文曾文林硕刘坤莹徐芬梁华曾龙驿
- 关键词：非酒精性脂肪性肝病小凹蛋白1
- 未折叠蛋白反应-蛋白激酶R样内质网激酶通路对氧化应激诱导生长抑制因子1的影响
- 2023年
- 目的寻找肝脏内质网应激过程中未折叠蛋白反应-蛋白激酶R样内质网激酶(UPR-PERK)通路潜在的作用靶点,并在肝脏内质网应激模型中验证UPR-PERK通路对氧化应激诱导生长抑制因子1(Osgin1)是否存在调控关系。方法以GEO数据库作为分析数据的来源,通过GEO2R软件挑选出符合标准的差异基因,对禁食-再喂食、运动及年龄3种生理因素引起显著变化的差异基因使用韦恩图取交集,确定Osgin1是变化显著的基因。通过GENEMANIA数据库验证UPR-PERK通路与Osgin1是否存在直接作用。随后分别在GEO数据库和TCGA数据库中通过3种不同的肝脏内质网应激模型(急性内质网应激模型、非酒精性脂肪性肝病模型及肝癌模型)进一步验证UPR-PERK通路对于Osgin1的调控关系。数据统计采用GraphPadPrism 9.0.0软件,采用Pearson相关分析法分析UPR-PERK通路基因与Osgin1转录水平的相关性。结果与对照组相比,在禁食-再喂食、增加运动及增龄3种生理因素下,Osgin1转录水平分别上调了700%、下调156%以及229%(P<0.05)。经GENEMANIA数据库验证UPR-PERK通路与Osgin1存在直接作用。在内质网应激诱导剂导致的急性肝脏内质网应激模型中,与对照组相比,抑制UPR-PERK通路相关基因(Eif2ak3)可以显著逆转由内质网应激诱导剂Tunicamycin导致的Osgin1 mRNA水平的上调(Osgin1 mRNA下调87%,P<0.001);在非酒精性脂肪性肝病模型中,与对照组相比,通过给予药物实现缓解UPR-PERK通路的同时,Osgin1转录水平也随之下调(减重药物BI4556906组Osgin1 mRNA下调48.0%;EX10970组Osgin1 mRNA下调43.3%;肌醇需要酶1α激动剂IXA4组Osgin1 mRNA下调56.6%;P<0.05);在肝癌模型中,与对照组相比,UPR-PERK通路相关基因与Osgin1转录水平在肝癌组织中显著上调(Osgin1 mRNA上调109%,P<0.001)。结论在生理条件及肝脏内质网应激模型中,UPR-PERK通路的激活上调Osgin1转录水平。
- 蔡楠许雯刘佳曾文林硕曾龙驿
- 关键词：内质网应激
- Caveolin-1在胰岛素激活2型糖尿病小鼠内脏脂肪PI3K/AKT通路中的作用
- 彭航娅李海成林硕曾文林楚文林可意曾龙驿
- Caveolin-1在甘精胰岛素改善2型糖尿病小鼠糖代谢及骨骼肌炎症中的作用被引量：4
- 2017年
- 目的:观察Caveolin-1下调的2型糖尿病小鼠接受甘精胰岛素治疗后糖代谢及骨骼肌炎症的改善情况。方法:C57BL/6J小鼠随机分为2组:对照组(NC组)和2型糖尿病模型组(T组)。T组采用高脂高糖饮食加小剂量链脲佐菌素腹腔注射方法成模。T组根据胰岛素治疗及尾静脉接受病毒注射情况再分为4组:无干预组(T2DM组),接受胰岛素治疗组(insulin组),注射sh RNA沉默Caveolin-1表达并胰岛素治疗组(LV-sh RNACav1组),注射阴性病毒并胰岛素治疗组(LV-GFP),治疗组均皮下注射甘精胰岛素3周,记录小鼠随机血糖及胰岛素剂量,取小鼠骨骼肌用Western blot检测Caveolin-1及TNF-α的表达。结果:与insulin组及LV-GFP组小鼠相比,LV-sh RNACav1组小鼠控制血糖需要的甘精胰岛素量最大(P<0.05),骨骼肌中炎症因子TNF-α表达量最多(P<0.05)。结论:Caveolin-1与机体胰岛素敏感性相关,并可能参与了胰岛素对骨骼肌炎症的改善作用。
- 彭航娅李海成林硕曾文林楚文林可意曾龙驿
- 关键词：CAVEOLIN-1骨骼肌2型糖尿病TNF-Α甘精胰岛素
- 小鼠胰岛提取方法改良的实验研究
- 2020年
- 目的探讨小鼠胰岛提取方法的改良及效果。方法根据胰岛提取方法不同,将小鼠随机分为胆总管穿刺组和胆总管穿刺联合胰腺原位注射组(联合注射组),每组各100只。胰岛提取的改良方法采用胆总管穿刺联合胰腺原位注射法灌注胰腺,体视显微镜下挑选并纯化胰岛。鉴定胰岛的形态和纯化情况,统计两组的胰岛产量及胰岛提取成功率。分析胰岛在体外培养1周内的存活情况,并评估体外培养24 h和4 d后胰岛的胰岛素分泌功能。结果与胆总管穿刺组比较,联合注射组提取胰岛的产量显著增高(P<0.001)。两组胰岛提取成功率均为83%,差异无统计学意义(P>0.05)。胆总管穿刺联合胰腺原位注射法所提取的胰岛形态完好、纯度高、活性好。新鲜分离的胰岛体外培养24 h后胰岛存活率接近100%;体外培养1~5 d,胰岛细胞存活情况良好;体外培养6 d开始,胰岛出现中心性死亡。体外培养24 h和4 d后,给予高葡萄糖刺激胰岛后,小鼠胰岛功能均正常。结论胆总管穿刺联合胰腺原位注射法可以提高胰岛的产量,且获取的胰岛细胞活性和功能良好。
- 曾文刘坤莹林楚文林楚文彭航娅林硕曾龙驿
- 关键词：胰岛胰岛移植胰岛素胰高血糖素双硫腙
