陈燊
- 作品数：5 被引量：5H指数：2
- 供职机构：中山大学公共卫生学院预防医学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 原代小鼠肝细胞培养方法的比较被引量：3
- 2016年
- 目的:比较3种不同培养条件下原代小鼠肝细胞的形态以及肝细胞功能,寻找适合于原代小鼠肝细胞体外培养的培养基配方。方法:采用改良Seglen两步胶原酶灌注法分离原代小鼠肝细胞,糖原染色观察细胞纯度,在贴壁4 h后用基础培养基、基础培养基加DMSO(DMSO组)、基础培养基加DMSO和EGF(DMSO+EGF组)等3种不同的条件培养肝细胞。镜下观察肝细胞形态,用MTT法检测细胞活力,生化分析仪检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)水平以及用ELISA法检测细胞培养上清液中白蛋白水平。结果:成功分离小鼠原代肝细胞,肝细胞纯度达95%以上;原代肝细胞培养至96 h时,DMSO组仍能较好地维持细胞形态,基础培养基组的细胞活力比DMSO组和DMSO+EGF组分别降低了66.87%和67.16%(P<0.05),且基础培养基组的LDH水平均高于DMSO组和DMSO+EGF组(P<0.05)。此外DMSO组在96 h时仍能维持较高水平的白蛋白分泌,比基础培养基组和DMSO+EGF组分别增加了185%和24.2%(P<0.05)。结论:小鼠原代肝细胞培养基中加入DMSO对于维持肝细胞的形态和功能有促进作用,本研究为体外原代肝细胞培养模型的建立和优化提供了实用的方法。
- 王珊柏青王方萍李慧瑶陈燊何志妮王庆陈雯陈丽萍
- 关键词：小鼠表皮生长因子
- 体外培养原代肝细胞中特异性基因和甲基化修饰的种属差异研究
- [目的]原代肝细胞是外源化学物或药物安全性评价的理想体外模型，然而体外培养过程中代谢酶降低和去分化限制了其应用范围.CD-1和C57BL/6是最常用的原代肝细胞来源的小鼠，种属差异影响肝细胞功能和对化学物的响应.本研究探...
- 陈丽萍王珊李道传陈燊李慧瑶郭萍张海燕陈雯
- 关键词：种属差异CYP2E1
- 多环芳烃暴露工人外周血淋巴细胞组蛋白H3Ser10磷酸化修饰与DNA损伤的关系
- 2017年
- 目的 探讨多环芳烃（PAHs）暴露对焦炉作业工人外周血淋巴细胞（PBLCs）的组蛋白H3Ser10磷酸化修饰（p-H3S10）改变与DNA损伤效应之间的关系.方法 2014年采用整群抽样法选取辽宁省本溪市某钢铁厂75名焦炉作业工人作为PAHs暴露组,并以年龄、工龄、劳动强度和高温作业为匹配因素,选取当地50名热轧厂工人作为对照组,检测尿1-羟基芘（1-OHP）水平.采用彗星实验检测外周血淋巴细胞（PBLCs）DNA的损伤程度,测量彗星尾距（OTM）、彗星尾部DNA百分比（Tail DNA%）,用ELISA分析特异组蛋白p-H3S10水平.采用简单线性回归模型分析组间人群PAHs暴露、DNA损伤程度和组蛋白p-H3S10水平的关联.采用bootstrap的方法进行中介效应分析,分析尿1-OHP、DNA损伤和组蛋白修饰之间的关联调控关系.结果 对照组和PAHs暴露组人群的年龄分别为（45.32±8.32）、（43.87±5.67）岁（P=0.284）.PAHs暴露组的组蛋白p-H3S10水平M（P5-P95）[4.54（1.85-23.91）]高于对照组2.21（0.68-4.71）（P〈0.001）.以暴露人群的尿1-OHP进行分组后发现,P0-P25、P26-P50、P51-P75、P76-P100组蛋白p-H3S10水平分别为（2.59±1.19）%、（3.24±2.81）%、（5.55±3.25）%、（8.77±7.84）%（P趋势〈0.001）.p-H3S10水平、OTM值、Tail DNA%与尿1-OHP均存在线性关联,β（95%CI）值分别为0.264（0.167-0.360）、0.500（0.299-0.702）、0.510（0.384-0.671）（P〈0.001）,且p-H3S10水平与OTM值和Tail DNA%呈正相关,β（95%CI）值分别为0.149（0.073-0.226）、0.220（0.132-0.308）（P值均〈0.001）.DNA损伤对PAHs诱导p-H3S10修饰改变的中介效应值为0.054（P=0.040）.结论 PAHs暴露可致外周血淋巴细胞DNA损伤以及组蛋白p-H3S10修饰升高,组蛋白H3Ser10磷酸化修饰改变可能在调控细胞DNA损伤修复中起重要作用.
- 王方萍朱小年章征保陈丽萍樊俊灵黎青叶陈燊陈雯
- 关键词：DNA损伤1-羟基芘
- 环境化学污染物暴露相关基因甲基化焦磷酸测序方法的构建和应用
- 2017年
- 目的:构建适用于环境化学污染物暴露相关基因甲基化的焦磷酸测序方法,应用于检测多环芳烃暴露的焦炉工人外周血细胞DNA的基因甲基化修饰。方法:采用亚硫酸氢盐修饰后测序检测多环芳烃职业暴露工人外周血中RAS相关结构域家族基因1A(RASSF1A)的甲基化水平,选择对暴露因素响应明显,即在两组人群中存在显著统计学差异的甲基化位点较集中的片段作为甲基化敏感区域。针对该区域构建焦磷酸测序方法,并在焦炉工人中进行验证。结果:所构建的焦磷酸测序方法具有更快速、简便、准确及经济的特点,能有效区分多环芳烃职业暴露工人与对照工人,其中,焦炉暴露工人RASSF1A甲基化修饰水平升高了87.15%(暴露组为9.32%±3.82%,对照工人为4.98%±2.28%,P<0.01)。结论:基于外源性化学物暴露人群的亚硫酸氢盐修饰后测序结果选取焦磷酸测序片段具有良好的化学物特异性和准确度,可用于职业暴露人群大样本DNA甲基化检测。
- 张海燕黎青叶陈燊陈雯何志妮
- 关键词：焦磷酸测序生物学标志
- 环境因素与表观遗传跨代继承研究进展被引量：2
- 2018年
- 表观遗传修饰易受环境因素的影响而发生改变。在早期发育阶段,经历两轮重编程过程,几乎所有的表观遗传标记均被清除。但在未直接接触环境因子的子代中仍能发现表观遗传信息以及相关表型的存在,由此提出表观遗传跨代继承的概念。深入探究表观遗传跨代继承,有利于全面认识环境因素对人类健康产生的深远影响,并为环境暴露早期阶段采取有效防御措施以及疾病治疗提供依据。因此,本文针对表观遗传跨代继承的定义、其与环境因素的关系、分子机制以及研究方法等方面进行系统述评。
- 陈燊李道传陈雯
- 关键词：表观遗传环境因素
