沈莉
- 作品数：10 被引量：36H指数：3
- 供职机构：南京大学医学院附属鼓楼医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省科技计划项目江苏省普通高校研究生科研创新计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- CD81参与子痫前期发病的机制——抑制滋养细胞侵袭并促进血管内皮细胞激活被引量：8
- 2017年
- 子痫前期（preeclampsia，PE）是以孕20周后出现高血压和尿蛋白为特征的妊娠并发症。早发型重度PE对母儿危害严重，包括母体多器官功能损害及胎儿生长受限等。目前PE发病的“二阶段”学说认为，第一阶段是早孕期绒毛外滋养细胞侵袭不足，使子宫螺旋小动脉重塑障碍导致“胎盘浅着床”，第二阶段则是浅着床的胎盘向母体循环释放异常分子，导致中晚孕期母体出现血管内皮激活，出现相关临床表现。很多研究致力于寻找连接PE二阶段发病的重要分子，但迄今尚未检索到相关成果报道。
- 沈莉刁振宇孙海翔颜桂军王志群李若天戴毅敏王景美李洁丁海林赵光锋郑明明薛平平刘沫周艳胡娅莉
- 关键词：滋养细胞侵袭子痫前期内皮细胞激活发病CD81多器官功能损害胎儿生长受限
- Toll样受体4介导的胎盘炎症激活在子痫前期发病中的作用研究
- 目的 正常妊娠的进行依赖于母胎界面可控的、适度激活的炎症免疫反应,Toll样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)在这个过程中起着关键作用;而这种炎症免疫的调控失衡将会导致子痫前期(preeclam...
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- MiR-155靶向调节膜蛋白CD81抑制滋养细胞的迁移
- 沈莉刁振宇薛平平龚萍刘沫李玉静胡娅莉
- 关键词：MIR-155CD81滋养细胞迁移子痫前期
- EGFR纳米抗体抑制雌激素依赖的人子宫内膜癌Ishikawa细胞的增殖与迁移被引量：1
- 2012年
- 纳米抗体是骆驼来源的一种轻链缺失的抗体,具有与单克隆抗体相似的抗原结合特异性和亲和力,此外还具有分子量小、稳定性好、易于制备等优点,因而具有巨大的生物医药应用价值。本研究利用基因工程技术在大肠杆菌中成功制备出了高纯度的EGFR纳米抗体(antiEGFRnano)。CCK-8法检测细胞增殖及迁移实验(细胞划痕实验和Transwell法检测)证明,重组的EGFR纳米抗体具有显著的抑制子宫内膜癌细胞增殖及迁移的活性,这为靶向EGFR治疗子宫内膜癌提供了一种全新的思路和方法。
- 刁振宇卢悟广曹鹏胡云龙周星薛平平沈莉孙海翔
- 关键词：ISHIKAWA细胞细胞迁移
- 血清中胎盘来源外泌体的分离与鉴定被引量：21
- 2015年
- 目的妊娠期间,胎盘可释放外泌体到母体循环,在正常妊娠或胎盘相关妊娠并发症中发挥重要作用。文中旨在建立简便、高效、低耗的母血清胎盘来源外泌体的分离纯化方法,为妊娠疾病研究奠定基础。方法蔗糖梯度离心联合2次8%PEG6000沉淀,分离纯化正常孕妇血清中胎盘来源外泌体,Western blot检测胎盘来源外泌体标记蛋白分子（CD63、CD81、PLAP）,银染法分析各密度层中所有蛋白质条带,透射电镜鉴定胎盘来源外泌体形态,动态光散射测定外泌体粒径及分布。结果通过蔗糖密度梯度离心后得到的各分层液经蛋白质SDS-PAGE胶电泳,银染后可见各蛋白分子条带清晰可见,Western blot结果显示CD63、CD81和PLAP同时表达于21%～34%蔗糖密度层,证明血清胎盘外泌体主要存在于1.09～1.16g/m L蔗糖密度层。透射电镜鉴定获得的胎盘来源外泌体形态符合一般外泌体特征,且特异表达PLAP。动态光散射测定获得的胎盘外泌体直径分布于28～91 nm,且大小均一。结论成功建立了一种简便、快捷、高效分离血清中胎盘来源外泌体的改良方法,为研究胎盘外泌体在正常妊娠及胎盘相关并发症中的作用奠定实验基础。
- 李玉静刁振宇薛平平沈莉龚萍颜桂军胡娅莉
- 关键词：外泌体胎盘
- 抑癌基因PTEN过表达对滋养细胞迁移的影响
- 目的 胎盘浅着床和螺旋动脉重塑障碍是子痫前期(preeclampsia,PE)发病的中心环节.抑癌基因PTEN广泛表达于多种组织,其蛋白缺失参与多种类型肿瘤的发生发展.绒毛外滋养细胞以肿瘤细胞样行为浸润母体蜕膜、浅肌层和...
- 薛平平沈莉刁振宇胡娅莉
- 四次跨膜蛋白CD81促进人绒毛外滋养细胞失巢凋亡的初步研究被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨四次跨膜蛋白CD81表达对人妊娠早期绒毛外滋养细胞失巢凋亡的作用。方法:构建CD81的高表达质粒(pCS2-CD81),将pCS2-CD81或CD81特异的小干扰RNA(siCD81)瞬时转染至人妊娠早期绒毛外滋养细胞(HTR-8/SVneo细胞),同时转染pCS2-EV或siRNA control作为对照组。实时荧光定量PCR(QRT-PCR)和Western blot法检测pCS2-CD81及siCD81在HTR-8/SVneo细胞中的表达效率。采用聚甲基丙烯酸2-羧乙基酯(poly-HEMA)包被的培养皿模拟细胞悬浮培养的环境,采用Annexin V/PI双染法分别检测CD81对正常贴壁生长及悬浮培养的HTR-8/SVneo细胞凋亡的影响。结果:成功构建CD81的高表达质粒(pCS2-CD81)。与转染pCS2-EV比较,瞬时转染pCS2-CD81的HTR-8/SVneo细胞高表达CD81蛋白(P<0.05);与转染siRNA control比较,siCD81有效抑制HTR-8/SVneo细胞的内源性CD81表达(P<0.05)。过表达CD81或抑制内源性CD81表达对HTR-8/SVneo细胞的普通凋亡无显著影响,但过表达CD81可显著促进HTR-8/SVneo细胞的失巢凋亡(P<0.05),抑制内源性CD81表达能减少HTR-8/SVneo细胞的失巢凋亡达15.5%(P<0.05)。结论:四次跨膜蛋白CD81促进人妊娠早期绒毛外滋养细胞的失巢凋亡。
- 沈莉刁振宇薛平平龚萍刘沫胡娅莉
- 关键词：失巢凋亡
- 缺氧通过微小RNA-155和cyclin D1抑制滋养细胞迁移被引量：3
- 2015年
- 目的探讨缺氧对人绒毛外滋养细胞微小RNA（microRNA，miRNA）-155表达的影响及其对滋养细胞迁移的影响。方法（1）采用100μmol／L氯化钴（cobaltchloride，CoCI2）诱导HTR-8／SVneo细胞缺氧，实时定量聚合酶链反应技术检测miRNA-155的表达，蛋白质印迹技术检测JunB和FosB蛋白的表达，划痕实验评估细胞迁移能力。（2）采用SP600125和PDTC分别抑制激活蛋白-1（activeprotein-1，AP-1）和／或核因子（nuclearfactor）-KB通路，实时定量聚合酶链反应技术检测miRNA-155的表达变化。（3）HTR-8／SVneo细胞瞬时转染pEGFP—miRNA—155、pEGFP—C1和pGL3-pro～cyclinD13-UTR，荧光素酶报告基因系统检测miRNA—155对cyclinD13＇非编码区的调控。（4）HTR-8／SVneo细胞瞬时转染pEGFP—miRNA-155和／或pFLAG—CMV—cyclinD1以过表达miRNA-155和／或cyclinD1，划痕实验评估细胞迁移能力的改变。采用两独立样本t检验，方差分析及LSD检验进行统计学分析。结果（1）100μmol／LCoCl2培养HTR-8／SVneo细胞24和48h，miRNA-155的相对表达量分别是0h的（1．40±0．28）倍（t=3．302，P=0．030）和（1．74±0．14）倍（t=8．578，P=0．001），随CoCl，（100μmol／L）作用于HTR-8／SVneo细胞的时间延长，JunB和FosB蛋白表达均升高。细胞迁移率在培养12、24和48h较0μmol／LCoC12时下降，尤以48h降低明显[（52．98±3．77）％与（64．68±3．92）％，t=5．259，P=0．000]。（2）抑制AP-1亚组、抑制NF—KB亚组及同时抑制AP—1和NF—KB亚组miRNA-155的相对表达量分别降低至无抑制情况下的（50．45±3．53）％、（47，18±2．14）％和（66．79±3．92）％（t值分别为3．630、4．100和3．392，P值均〈0．05）。（3）过表达miRNA-155亚组的cyclinD13’非编码区荧光素酶活性较无过表达时降低（t=46．682，P=0．000）。（4）过表达miRNA-155亚组的HTR-8／SVneo细胞迁移率较无过表达时明显降低[48h，（
- 薛平平李玉静戴毅敏邱智华沈莉刁振宇颜桂军胡娅莉
- 关键词：缺氧微RNAS细胞周期蛋白D1滋养层先兆子痫
- 姜黄素对脂多糖诱导的滋养细胞系HTR-8/SVneo中微小RNA-155表达及细胞凋亡、侵袭的影响被引量：3
- 2016年
- 目的探讨姜黄素对脂多糖（LPS）诱导的滋养细胞系HTR-8/SVneo细胞中微小RNA-155（miR-155）表达、细胞凋亡和侵袭的影响。方法体外培养滋养细胞系HTR-8/SVneo细胞。实验共4组：姜黄素＋LPS组（姜黄素浓度分别为12.5、25、50μmol/L预处理后，加入100 ng/ml LPS）、LPS组（加入100 ng/ml LPS）、重组腺病毒组（加入Ad-miR-155，感染复数为100）和空白对照组。采用实时荧光定量PCR、荧光素酶报告基因活性检测法和蛋白印迹法检测姜黄素＋LPS组、LPS组和空白对照组细胞的miR-155表达水平、荧光素酶转录活性及核因子κB（NF-κB）蛋白的表达水平；细胞凋亡酶联免疫法和细胞侵袭试验检测姜黄素＋LPS组、LPS组、重组腺病毒组和空白对照组细胞凋亡和侵袭能力的情况。结果（1）实时荧光定量PCR技术结果显示，LPS组HTR-8/SVneo细胞中miR-155的表达水平为空白对照组的（2.13±0.22）倍，两组比较，差异具有统计学意义（P〈0.01）；12.5、25、50μmol/L姜黄素＋LPS组HTR-8/SVneo细胞中miR-155的表达水平分别为LPS组的（0.37±0.08）、（0.68±0.14）、（0.49±0.09）倍，分别比较，差异均有统计学意义（P〈0.05）。（2）荧光素酶报告基因活性检测法显示， LPS组荧光素酶的转录活性为空白对照组的（2.25±0.56）倍，12.5、25、50μmol/L姜黄素＋LPS组荧光素酶转录活性分别为LPS组的（0.80±0.07）、（0.74±0.05）、（0.49±0.19）倍，差异均有统计学意义（P均〈0.05）。（3）蛋白印迹法检测显示，LPS组HTR-8/SVneo细胞中p65蛋白的表达水平为1.50±0.22，明显高于空白对照组（0.95±0.25，P〈0.01）。不同浓度姜黄素＋LPS组，姜黄素浓度为12.5μmol/L时，p65蛋白表达水平为0.31±0.07，与LPS组相比，下调最明显（P〈0.01）；浓度为25、50μmol/L时，蛋白表达水平分别为0.75±0.14、0.49±0.08，分别与LPS组比较，差异均有统计学意义（P〈0.
- 洪国敏龚萍杨沐怿沈莉刁振宇胡娅莉
- 关键词：先兆子痫滋养层姜黄素细胞凋亡
- 膜蛋白CD81抑制原代细胞滋养细胞的侵袭
- [目的]探究四跨膜蛋白CD81对原代细胞滋养细胞(cytotrophoblast,CTB)侵袭能力的影响,从而探讨CD81在子痫前期(preeclampsia,PE)发病中的可能作用.[方法]采用蛋白质印迹(Wester...
- 沈莉刁振宇李玉静薛平平龚萍刘沫胡娅莉
