刁振宇
- 作品数：54 被引量：84H指数：5
- 供职机构：南京大学医学院附属鼓楼医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金南京医科大学科技发展基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学一般工业技术自动化与计算机技术更多>>
- Toll样受体4介导的胎盘炎症激活在子痫前期发病中的作用研究
- 目的 正常妊娠的进行依赖于母胎界面可控的、适度激活的炎症免疫反应,Toll样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)在这个过程中起着关键作用;而这种炎症免疫的调控失衡将会导致子痫前期(preeclam...
- 薛平平李玉静沈莉刁振宇颜桂军胡娅莉
- 膜蛋白CD81在子痫前期预测、分型及诊疗中的应用
- 本发明公开了膜蛋白CD81在子痫前期预测、分型及诊疗中的应用。发明人通过临床调查、体外分子实验及动物实验发现，CD81通过抑制滋养细胞的侵袭能力导致子宫螺旋动脉的重塑障碍，从而引起PE发病。故CD81可作为预测PE的标记...
- 胡娅莉周艳刁振宇沈莉颜桂军赵光峰
- 文献传递
- miR-155及富含半胱氨酸蛋白61在重度子痫前期和正常妊娠胎盘中的差异表达
- 目的探讨微小RNA155(microRNA-155,miR-155)和富含半胱氨酸蛋白61(CYR61)在重度子痫前期和正常妊娠胎盘中的差异表达。方法取18例重度子痫前期患者(孕36-40周)胎盘和同期分娩且孕周匹配的1...
- 苏莉胡娅莉刁振宇周建军戴毅敏张艳青王志群
- 文献传递
- 血清中胎盘来源外泌体的分离与鉴定被引量：21
- 2015年
- 目的妊娠期间,胎盘可释放外泌体到母体循环,在正常妊娠或胎盘相关妊娠并发症中发挥重要作用。文中旨在建立简便、高效、低耗的母血清胎盘来源外泌体的分离纯化方法,为妊娠疾病研究奠定基础。方法蔗糖梯度离心联合2次8%PEG6000沉淀,分离纯化正常孕妇血清中胎盘来源外泌体,Western blot检测胎盘来源外泌体标记蛋白分子（CD63、CD81、PLAP）,银染法分析各密度层中所有蛋白质条带,透射电镜鉴定胎盘来源外泌体形态,动态光散射测定外泌体粒径及分布。结果通过蔗糖密度梯度离心后得到的各分层液经蛋白质SDS-PAGE胶电泳,银染后可见各蛋白分子条带清晰可见,Western blot结果显示CD63、CD81和PLAP同时表达于21%～34%蔗糖密度层,证明血清胎盘外泌体主要存在于1.09～1.16g/m L蔗糖密度层。透射电镜鉴定获得的胎盘来源外泌体形态符合一般外泌体特征,且特异表达PLAP。动态光散射测定获得的胎盘外泌体直径分布于28～91 nm,且大小均一。结论成功建立了一种简便、快捷、高效分离血清中胎盘来源外泌体的改良方法,为研究胎盘外泌体在正常妊娠及胎盘相关并发症中的作用奠定实验基础。
- 李玉静刁振宇薛平平沈莉龚萍颜桂军胡娅莉
- 关键词：外泌体胎盘
- 腺病毒介导的小鼠可溶性endoglin和可溶性血管内皮生长因子受体-1重组蛋白的构建和功能初步鉴定
- 2009年
- 目的构建腺病毒介导的小鼠可溶性endoglin（sEng）和可溶性血管内皮生长因子受体-1（sFlt-1）重组蛋白，观察其对内皮细胞管化及滋养细胞迁移的影响。方法提取小鼠胎盘组织总RNA，通过RT—PCR获得sEng和sFlt-1 cDNA，插入到穿梭载体pAdTrack—CMV中，获得pATC-sEng和pATC—sFh-1质粒，转化其至pAdeasy-1受体菌，选阳性克隆转染293A细胞，获得Ad／sEng和Ad／sFlt-1，制备高滴度病毒液。用病毒感染COS7细胞，检测sEng和sFlt-1蛋白表达，并通过成管和划痕实验观察两种蛋白对人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）管化和Bewo细胞迁移的影响。结果成功获得sEng和sFlt-1重组腺病毒，其滴度分别为2．2×10^11pfu／ml和2．0X10^11pfu／ml。感染COS7细胞后，sEng和sFlt-1蛋白均较高表达，并能抑制HUVEC管化及Bewo细胞迁移，两者有协同作用。结论构建的腺病毒介导的小鼠sEng和sFlt-1重组蛋白对血管生成和滋养细胞迁移有明显抑制作用。
- 唐洁胡娅莉刁振宇孙海翔颜桂军陈林君张艳青
- 关键词：细胞内信号肽和蛋白质类血管内皮生长因子受体1重组蛋白质类腺病毒科
- 子痫前期患者的血清外泌体激活HTR-8/SV neo细胞的NF-κB炎症信号通路
- 沈莉李玉静刁振宇戴毅敏李洁胡娅莉
- SNP单体型分析的不同策略应用于COL1A1成骨不全症家系PGT-M的临床研究被引量：1
- 2021年
- 目的探索单核苷酸多态性(SNP)单体型分析技术在预防成骨不全症(OI)发生和阻断OI的遗传缺陷的纵向传递的有效性。方法取三个家系的活检囊胚的滋养层细胞,采用多重置换扩增(MDA)方法进行全基因组扩增、一代测序联合基于二代测序(NGS)的SNP单体型分析技术,对三个携带COL1A1基因致病突变的OI家系进行胚胎植入前单基因病遗传学检测(PGT-M)。家系Ⅰ、家系Ⅱ和家系Ⅲ分别依据先证者、溯源的家族样本和新发突变患者单精子的遗传信息构建SNP单体型。依据检测结果筛选基因型正常的整倍体胚胎进行移植,于孕中期行羊膜腔穿刺,对胎儿基因型进行产前诊断,在新生儿出生后持续随访。结果家系Ⅰ活检4枚囊胚,一代测序检测和SNP单体型分析结果均显示有1枚囊胚基因型正常且染色体拷贝数正常,移植后,在妊娠37周活产一名体重为3500 g健康男婴。家系Ⅱ活检3枚囊胚,PGT-M结果显示有2枚囊胚基因型正常,但其中1枚为11号染色体三体,移植基因型正常的整倍体囊胚后,未妊娠。家系Ⅲ活检3枚囊胚,PGT-M结果显示有2枚囊胚基因型正常,移植其中1枚胚胎后,在妊娠40周活产一名体重为4250 g健康女婴。结论在PGT-M中,可采用不同的SNP单体型分析策略使更多的单基因病患者从中获益。使用基于NGS的SNP单体型分析结合致病基因的一代测序检测技术,在植入前的胚胎期即能有效阻断单基因疾病的垂直传播,帮助患者生育健康孩子。
- 王洁朱丽华陈林君林飞刁振宇徐志鹏王珊珊张宁媛
- 关键词：成骨不全症
- 四次跨膜蛋白CD81促进人绒毛外滋养细胞失巢凋亡的初步研究被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨四次跨膜蛋白CD81表达对人妊娠早期绒毛外滋养细胞失巢凋亡的作用。方法:构建CD81的高表达质粒(pCS2-CD81),将pCS2-CD81或CD81特异的小干扰RNA(siCD81)瞬时转染至人妊娠早期绒毛外滋养细胞(HTR-8/SVneo细胞),同时转染pCS2-EV或siRNA control作为对照组。实时荧光定量PCR(QRT-PCR)和Western blot法检测pCS2-CD81及siCD81在HTR-8/SVneo细胞中的表达效率。采用聚甲基丙烯酸2-羧乙基酯(poly-HEMA)包被的培养皿模拟细胞悬浮培养的环境,采用Annexin V/PI双染法分别检测CD81对正常贴壁生长及悬浮培养的HTR-8/SVneo细胞凋亡的影响。结果:成功构建CD81的高表达质粒(pCS2-CD81)。与转染pCS2-EV比较,瞬时转染pCS2-CD81的HTR-8/SVneo细胞高表达CD81蛋白(P<0.05);与转染siRNA control比较,siCD81有效抑制HTR-8/SVneo细胞的内源性CD81表达(P<0.05)。过表达CD81或抑制内源性CD81表达对HTR-8/SVneo细胞的普通凋亡无显著影响,但过表达CD81可显著促进HTR-8/SVneo细胞的失巢凋亡(P<0.05),抑制内源性CD81表达能减少HTR-8/SVneo细胞的失巢凋亡达15.5%(P<0.05)。结论:四次跨膜蛋白CD81促进人妊娠早期绒毛外滋养细胞的失巢凋亡。
- 沈莉刁振宇薛平平龚萍刘沫胡娅莉
- 关键词：失巢凋亡
- 胎盘外泌体的生物学功能及分离纯化的研究进展被引量：5
- 2015年
- 妊娠时母体多个系统和器官的功能会发生改变,以适应胎儿及胎盘发育的需要,但这些改变的具体发生机制仍不明确.近年来研究显示,胎盘分泌的特异性外泌体（exosomes）在维持妊娠过程中发挥重要作用.胎盘外泌体是一种直径30～100 nm的膜性微小囊泡,可由多种细胞经过＂内吞-融合-外排＂等一系列加工过程分泌到细胞外环境.胎盘外泌体可以携带蛋白和RNA,在细胞间传递信息及运输物质,参与胎盘相关的妊娠生理和病理过程.故高效提取胎盘外泌体,研究其组成及生物学功能,尤其是在妊娠并发症中的改变,对于阐释妊娠并发症发生机制及寻找新的治疗方法具有重要临床意义.本文将对胎盘外泌体生物学功能及分离纯化方法进行综述。
- 李玉静刁振宇胡娅莉
- 关键词：分离纯化方法生物学功能胎盘发育外泌体妊娠并发症妊娠过程
- 缺氧通过微小RNA-155和cyclin D1抑制滋养细胞迁移被引量：3
- 2015年
- 目的探讨缺氧对人绒毛外滋养细胞微小RNA（microRNA，miRNA）-155表达的影响及其对滋养细胞迁移的影响。方法（1）采用100μmol／L氯化钴（cobaltchloride，CoCI2）诱导HTR-8／SVneo细胞缺氧，实时定量聚合酶链反应技术检测miRNA-155的表达，蛋白质印迹技术检测JunB和FosB蛋白的表达，划痕实验评估细胞迁移能力。（2）采用SP600125和PDTC分别抑制激活蛋白-1（activeprotein-1，AP-1）和／或核因子（nuclearfactor）-KB通路，实时定量聚合酶链反应技术检测miRNA-155的表达变化。（3）HTR-8／SVneo细胞瞬时转染pEGFP—miRNA—155、pEGFP—C1和pGL3-pro～cyclinD13-UTR，荧光素酶报告基因系统检测miRNA—155对cyclinD13＇非编码区的调控。（4）HTR-8／SVneo细胞瞬时转染pEGFP—miRNA-155和／或pFLAG—CMV—cyclinD1以过表达miRNA-155和／或cyclinD1，划痕实验评估细胞迁移能力的改变。采用两独立样本t检验，方差分析及LSD检验进行统计学分析。结果（1）100μmol／LCoCl2培养HTR-8／SVneo细胞24和48h，miRNA-155的相对表达量分别是0h的（1．40±0．28）倍（t=3．302，P=0．030）和（1．74±0．14）倍（t=8．578，P=0．001），随CoCl，（100μmol／L）作用于HTR-8／SVneo细胞的时间延长，JunB和FosB蛋白表达均升高。细胞迁移率在培养12、24和48h较0μmol／LCoC12时下降，尤以48h降低明显[（52．98±3．77）％与（64．68±3．92）％，t=5．259，P=0．000]。（2）抑制AP-1亚组、抑制NF—KB亚组及同时抑制AP—1和NF—KB亚组miRNA-155的相对表达量分别降低至无抑制情况下的（50．45±3．53）％、（47，18±2．14）％和（66．79±3．92）％（t值分别为3．630、4．100和3．392，P值均〈0．05）。（3）过表达miRNA-155亚组的cyclinD13’非编码区荧光素酶活性较无过表达时降低（t=46．682，P=0．000）。（4）过表达miRNA-155亚组的HTR-8／SVneo细胞迁移率较无过表达时明显降低[48h，（
- 薛平平李玉静戴毅敏邱智华沈莉刁振宇颜桂军胡娅莉
- 关键词：缺氧微RNAS细胞周期蛋白D1滋养层先兆子痫
