宋翠萍
- 作品数：122 被引量：151H指数：6
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 稳定表达人TMPRSS2基因BHK细胞系的建立及其对新城疫弱毒增殖效率评价被引量：1
- 2021年
- 为提高细胞培养系统中新城疫病毒的增殖效率,通过构建TMPRSS2过表达的BHK细胞系,探索其对新城疫弱毒增殖的影响。本研究将TMPRSS2基因克隆于噬菌体载体pHAGE中,构建重组质粒pHAGE-TMPRSS2。将重组质粒pHAGE-TMPRSS2以及辅助包装质粒psPAX2和pMD2G共转染至293T细胞并收集上清。将包装好的慢病毒感染BHK细胞,通过Blasticidin加入筛选和有限稀释法将单克隆细胞扩大培养。经RT-PCR和Western-blot鉴定,结果表明,TMPRSS2在BHK细胞中获得了稳定的高表达。接种新城疫弱毒后通过TCID50测定显示,TMPRSS2过表达BHK细胞系能支持较高水平的病毒增殖。
- 刘伟李梦娇郭佩东孙英杰仇旭升谭磊宋翠萍廖瑛孟春春丁铲
- 关键词：TMPRSS2BHK细胞新城疫弱毒
- 新城疫病毒感染过程中基质蛋白的动态分布被引量：2
- 2011年
- 本研究利用原核表达产物制备的多抗血清进行M蛋白在细胞内的定位分析,NDV 9a5b病毒按5个感染复数（m.o.i）感染量接种DF1单层细胞,当PI=6 h时,M蛋白主要分布于细胞浆内,并未到达细胞膜内侧;到PI=8 h时,粗面内质网周围的M蛋白逐渐增多;PI=12 h时,M蛋白已开始聚集于细胞膜的内侧,而当感染后16 h开始形成合胞体时,M蛋白在细胞膜内侧形成明显的斑点状聚集;当感染至24 h时,逐渐出现5~10个细胞膜融合的包涵体,M蛋白存在于包涵体融合膜的内层,且荧光强度已逐渐减弱。这为深入开展M蛋白与病毒增殖、宿主相互作用机制的研究工作奠定了基础。
- 孙英杰陈鸿军詹媛于洋仇旭升宋翠萍于圣青丁铲
- 关键词：新城疫病毒基质蛋白
- 血清Ⅲ型鸭甲型肝炎病毒VP0蛋白单克隆抗体的制备与鉴定被引量：1
- 2022年
- 血清Ⅲ型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-3)属于小RNA病毒科,主要引起雏鸭以肝脏肿胀、出血为主的急性、烈性传染病。DHAV-3有3个主要结构蛋白,其中VP0蛋白具有极佳的抗原性及宿主保护位点。为研制鸭肝炎病毒VP0蛋白的单克隆抗体,本研究将鸭肝炎病毒的VP0基因进行原核表达,用纯化后的重组蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合、IFA筛选以及亚克隆后,获得了1株能够稳定分泌抗VP0蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞3A5,亚类鉴定为IgG1,IFA检测腹水效价为1∶12800。Western blot、IFA结果表明,制备的单克隆抗体效价高,反应原性强。本研究为后续建研制血清Ⅲ型鸭甲型肝炎病毒的快检试剂盒,及建立病原及抗体检测方法奠定基础。
- 黄军生宋翠萍孙英杰仇旭升孟春春谭磊廖瑛刘炜玮王桂军丁铲
- 关键词：原核表达单克隆抗体
- 新城疫基因型差异性单克隆抗体的制备及鉴定
- 目前,NDV弱毒株的混杂对禽病实验室病原诊断工作造成很大困扰。因此,NDV强弱毒株以及基因型的快速鉴别技术是目前亟待解决的重要问题。本研究利用一株与疫苗株LaSota存在显著的抗原性差异的强毒株PI/CHINA/SD/2...
- 任亭亭李仕超詹媛孟春春孙英杰宋翠萍谭磊封振仇旭升丁铲
- 关键词：新城疫病毒单抗
- 一种鸭疫里默氏杆菌-大肠杆菌穿梭表达载体及其构建方法和应用
- 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种鸭疫里默氏杆菌－大肠杆菌穿梭表达载体及其构建方法和应用。本发明公开了一种鸭疫里默氏杆菌－大肠杆菌穿梭表达载体，其核苷酸序列为：SEQIDNO:1。本发明还公开了一种鸭疫里默氏杆菌－大肠...
- 胡青海于圣青韩先干丁铲仇旭升宋翠萍谭磊
- 文献传递
- 新城疫基因型差异性单克隆抗体的制备及鉴定
- 目前,NDV弱毒株的混杂对禽病实验室病原诊断工作造成很大困扰。因此,NDV强弱毒株以及基因型的快速鉴别技术是目前亟待解决的重要问题。本研究利用一株与疫苗株LaSota存在显著的抗原性差异的强毒株PI/CHINA/SD/2...
- 任亭亭李仕超詹媛孟春春孙英杰宋翠萍谭磊封振仇旭升丁铲
- 关键词：新城疫病毒单抗
- MDV-1CVI988/Rispens疫苗毒体外感染期间VP22的表达及细胞间转导作用被引量：3
- 2006年
- 利用CVI988 VP22蛋白C端94～243 aa片段作为抗原制备特异性抗体, 并用于检测MDV-1不同毒株感染鸡胚成纤维细胞（CEF）时, 在不同感染时间内的表达情况. 结果发现, 当感染量PFU=50时, MDV各不同致病力的毒株（GA, RB1B和CVI988株）VP22最早在3 h时开始向病毒感染细胞的邻近细胞核内扩散; 8 h时, VP22几乎扩散到所有细胞的核内. 这说明VP22在感染细胞形成空斑之前就已经开始表达, 并高效转导入其他正常的细胞核内. 实验中发现血清I型马立克氏病病毒（MDV-1）弱毒株CVI988/Rispens的VP22蛋白缺失^201TKSERT^206. 结果证实这一缺失对VP22蛋白转导功能并没有明显影响, 即CVI988 VP22仍具有高效的细胞内转导作用. 这为深入研究和开发MDV CVI988株的VP22蛋白转导功能奠定了基础.
- 陈鸿军宋翠萍秦爱建张晨飞
- 关键词：马立克氏病病毒蛋白转导
- 抗鸡β干扰素单克隆抗体的制备及初步鉴定被引量：1
- 2013年
- 以鸡β干扰素(IFN-β)的重组蛋白pCold-ChIFN-β免疫8周龄Balb/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗鸡β干扰素单克隆抗体,获得两株抗鸡IFN-β的单克隆抗体。经ELISA鉴定,两株单抗的腹水效价均达到10-3以上;Western blot检测结果证明2株单克隆抗体均能与表达的鸡IFN-β发生特异性反应;其中一株单抗可检测浓度小于15 pg/mL的鸡IFN-β。本研究为检测鸡IFN-β提供了一种重要工具,也为评价鸡用疫苗的免疫效果等奠定了物质基础。
- 张向乐孟春春仇旭升谭磊宋翠萍丁铲
- 关键词：原核表达单克隆抗体
- NDV Class Ⅰ强毒株主要结构蛋白特异性抗体的研制
- 本研究以新城疫病毒(NDV)Class Ⅰ强毒分离株9a5b的尿囊液、原核表达的NP、P、M、HN、F五种蛋白为免疫原，接种6周龄Balb/c小鼠。制备单克隆抗体或多抗血清。以血凝抑制(HI)、间接免疫荧光(IFA)、细...
- 孙英杰陈鸿军于洋仇旭升宋翠萍于圣青丁铲
- 关键词：新城疫病毒免疫学检验抗体测定
- 文献传递
- 鸡G3BP1在新城疫病毒感染诱导应激颗粒形成过程中的作用
- 2017年
- 为掌握鸡细胞中应激颗粒(stress granules,SGs)形成机制,以及鸡GTP酶激活蛋白SH3功能区结合蛋白1(G3BP1)在新城疫病毒(NDV)感染诱导SG形成过程中的作用,用NDV感染HeLa细胞,免疫荧光试验检测内源性G3BP1的定位,外源转染鸡G3BP1和各分段结构域,以不同应激处理之后观察与内源性SG标志物共定位现象,最后转染G3BP1之后感染NDV,以Western blot和TCID50检测病毒复制情况。结果显示:NDV感染能够诱导内源性G3BP1聚集形成SG,将鸡G3BP1分别转染至HeLa、DF-1和CEF后,以不同应激处理之后均能在细胞中观察到SG。将鸡G3BP1不同结构域分别转染HeLa细胞,以氧化应激和NDV分别处理,结果显示G3BP1的RNA结合结构域对聚集至关重要,而NTF2样结构域不能被招募到SGs中,并且抑制原有SGs的形成。最后证实G3BP1过表达能够增强病毒复制,说明SG在NDV复制过程中发挥促进作用。综合以上结果表明:鸡G3BP1在鸡SG形成过程中至关重要,鸡SG能够促进NDV复制,这为进一步研究NDV和禽源细胞互作奠定了基础。
- 张频孙英杰郑航毛旭明仇旭升谭磊孟春春宋翠萍廖瑛丁铲马卫明
- 关键词：新城疫病毒
