谭磊
- 作品数:101 被引量:126H指数:6
- 供职机构:中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 家禽干扰素的分类及应用被引量:6
- 2012年
- 干扰素是一类仅由脊椎动物单核细胞和淋巴细胞在受到病毒或其他诱生剂的作用时产生的一种具有抗病毒、抗肿瘤、免疫调节等多种生物学活性的分泌性可溶糖蛋白。随着基因工程方法的发展,外源表达干扰素已经进入了工业化生产阶段,并且大量投放市场,在医药、生物和农业等多个行业领域中广泛应用。近年来,随着人们对禽类干扰素研究的逐步深入,干扰素在一些禽类病毒性疾病及肿瘤性疾病治疗方面取得的良好进展。本文现就家禽干扰素的分类,家禽干扰素的抗病毒活性以及家禽基因工程重组干扰素的应用做以综述。
- 张向乐孟春春仇旭升谭磊丁铲
- 关键词:抗病毒活性
- 新城疫病毒在感染早期通过Akt/mTOR/4E-BP1和p38/Erk/Mnk1通路激活宿主真核翻译起始因子eIF4E的研究被引量:2
- 2015年
- 为阐明新城疫病毒(NDV)在感染宿主细胞后对宿主真核翻译起始因子以及相关调控通路的调节作用,本实验采用western blot检测NDV感染He La细胞早期真核翻译起始因子e IF4F的磷酸化水平以及Akt/m TOR/4E-BP1和p38/Erk/Mnk1调控通路的活化情况,同时用紫外线(UV)灭活的NDV进行对照试验。结果显示,NDV感染He La早期能够迅速诱导真核起始因子e IF4E的磷酸化,而UV灭活NDV作用的细胞则无此现象。通过对相关调控通路的检测发现,NDV在感染早期对e IF4E的磷酸化是通过激活p38/Erk/Mnk1通路实现的。此外,NDV感染还可以激活Akt/m TOR/4E-BP1通路,诱导e IF4E阻遏蛋白4E-BP1发生磷酸化并解离出e IF4E,从而促进e IF4F复合体的形成,确保真核翻译的进行。该结果对深入解析NDV与宿主之间的相互作用以及翻译相关信号通路参与调控病毒复制的机制具有重要意义。
- 詹媛仇旭升曲昱蓉孙英杰谭磊宋翠萍丁铲
- 关键词:新城疫病毒EIF4E
- 细胞PKR-eIF2 α抗新城疫病毒作用研究
- 新城疫病毒为副黏病毒科禽腮腺炎病毒属(Avulavirus)的禽副黏病毒Ⅰ型(APMV-1),基因组为单股负链不分节段的RNA.双链RNA激活的蛋白激酶(PKR)作为干扰素刺激基因的一种,能够识别病毒产生的dsRNA而活...
- 张石磊孙英杰詹嫒于胜青仇旭升谭磊陈鸿军丁铲
- 新城疫病毒在感染早期通过Akt/mTOR/4E-BP1和p38/Erk/Mnk1通路激活宿主真核翻译起始因子eIF4E的研究
- 引言新城疫(NewcastleDisease,ND)是由新城疫病毒(NDV)强毒株引起的一种急性、烈性、高度接触传染性禽传染病,严重危害世界养禽业的健康发展。目前已有报道表明,NDV感染可以激活Akt、mTOR以及p70...
- 詹媛仇旭升曲昱蓉孙英杰谭磊宋翠萍丁铲
- 文献传递
- 新城疫P蛋白磷酸化位点的质谱分析和功能鉴定被引量:1
- 2019年
- 副黏病毒磷蛋白,即P蛋白(phosphoprotein),富含丝氨酸和苏氨酸,在自然条件下磷酸化水平较高。副黏病毒P蛋白的磷酸化对病毒的转录和复制具有重要的作用,但新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)P蛋白磷酸化位点及其功能依然尚不明确。本研究通过LC-MS/MS质谱对NDV La Sota病毒P蛋白的磷酸化位点进行了检测,鉴定了Ser56、Ser77、Thr78、Thr82、Ser164和Ser141六个磷酸化位点。通过在线分析,预测这些磷酸化位点的磷酸化激酶分别是PKC、CKII和GSK3。为了鉴定6个磷酸化位点的生物学功能,在已建立的表达GFP基因的NDV微型基因组质粒pTVT-LGT基础上,用荧光素酶报告基因(luciferase)替换GFP报告基因,建立了表达荧光素酶的NDV微型基因组系统。利用“丙氨酸扫描”对6个磷酸化位点进行突变后,在NDV微型基因组平台中进行功能鉴定。结果显示,T78、T82和S164位磷酸化位点的缺失显著影响了病毒RNA依赖性RNA聚合酶复合体(RNA dependent RNA polymerase,RdRp)的复制,其生物学意义有待进一步的研究。
- 李继红徐腾飞张耀丹汪伟孟春春孙英杰谭磊宋翠萍廖瑛仇旭升丁铲
- 关键词:新城疫病毒质谱磷酸化位点
- H9N2亚型禽流感病毒A/Chicken/Shandong/LY1/2017株反向遗传操作系统的建立
- 2020年
- 为了构建H9N2亚型禽流感病毒A/Chicken/Shandong/LY1/2017的反向遗传操作平台,通过RT-PCR技术分别扩增该毒株的8个基因片段,并分别克隆至双向转录表达载体PHW2000中.8个质粒共转染293T/MDCK混合细胞,96 h后将细胞板反复冻融3次收获细胞悬液,将其接种10日龄SPF鸡胚,96 h后收集尿囊液并将拯救毒株命名为rH9N2,测定其HA效价为1:256.rH9N2在HA、MDT、EID50、TCID50以及病毒生长曲线、空斑等方面保持了与亲本毒株一致的生物学特性.本研究成功构建了A/Chicken/Shandong/LY1/2017的感染性克隆,为今后通过基因替换、定点突变技术研究H9N2亚型禽流感病毒致病性的分子机制奠定了基础.
- 李梦娇徐凯杨彬刘伟仇旭升孙英杰谭磊廖瑛宋翠萍刘炜玮张小荣丁铲孟春春吴艳涛
- 关键词:禽流感病毒H9N2亚型
- 鸡滑液支原体乳酸脱氢酶基因的克隆表达及其蛋白活性研究
- 根据GenBank中鸡滑液支原体(Mycoplasma synoviae,MS)MS53株的乳酸脱氢酶序列设计一对特异性上下游引物,通过PCR扩增获得MSWVU1853菌株的乳酸脱氢酶基因并将其克隆至pGEM-T Eas...
- 任峰谭磊包世俊张凡庆陆凤仇旭升宋翠萍孙英杰陈书明丁铲
- 关键词:滑液支原体原核表达酶活性
- 文献传递
- 新城疫病毒利用网格蛋白和小窝蛋白受体途径感染鸡骨髓来源树突状细胞
- 2023年
- 新城疫病毒(NDV)可以通过多种内吞途径感染细胞,且其入胞途径可能具有细胞类型特异性。本研究以鸡骨髓源树突状细胞(chBM-DCs)为模型,探究NDV入侵该细胞的内吞途径。首先利用CPZ(CME抑制剂)和Dynasore(dynamin1/2抑制剂)预处理DCs,然后感染NDV强毒株Herts/33,通过Western blot和IFA检测NDV NP的胞内表达水平变化。药物预处理组NP的表达水平均显著降低,表明NDV能够通过网格蛋白介导的内吞途径进入DCs。进一步利用甲基-β-环糊精(MβCD)预处理DCs,然后感染Herts/33,通过Western blot和IFA检测NDV NP的胞内表达水平变化。结果显示药物预处理组NP的表达水平显著降低,表明NDV能够通过小窝蛋白介导的内吞途径进入DCs。本研究为全面阐明NDV感染宿主细胞的途径提供了理论基础。
- 杨晓凤仇旭升孙英杰宋翠萍孟春春刘炜玮廖瑛丁铲谭磊
- 关键词:新城疫病毒
- 鸡毒支原体磷酸酶PrpC活性检测
- 2012年
- HPr激酶/磷酸酶(PrkC/PrpC)系统在细菌和支原体中高度保守,不仅参与糖酵解酶类的磷酸化/去磷酸化,也与毒力、生物被膜等生命活动相关。克隆并突变获得编码鸡毒支原体磷酸酶PrpC的ptc1基因,经原核表达纯化后,利用底物PNPP体外检测其酶活性,并对影响该酶活性的pH、金属离子、温度等影响因子进行分析。结果表明,Ptc1蛋白具有磷酸酶活性,Mn2+为该酶辅因子,最适离子浓度为2mol/L,最适pH为8.5,最适温度为37℃。相同浓度的Li+、Na+、K+、Mg2+、Ca2+、Ba2+、Al 3+、Hg2+等金属离子均对表达产物具有不同程度的抑制活性。初步建立了PrpC功能检测体系,为进一步深入研究PrkC/PrpC调节系统奠定基础。
- 胡美容陈鸿军于圣青仇旭升谭磊高崧丁铲
- 关键词:鸡毒支原体PRPC磷酸酶
- 鸡传染性支气管炎病毒多表位核酸疫苗的构建及其免疫研究
- 引言本实验室前期应用生物信息学方法预测并验证筛选获得了IBV Australia T株和M41株的结构蛋白S1基因的T细胞抗原表位盒以及B细胞抗原表位盒。本研究基于此T、B细胞表位盒构建了5组表位相关真核表达质粒pVAX...
- 刘芳谭磊陆凤范瑾刘开春王欣廖瑛仇旭升孙英杰宋翠萍王桂军丁铲