杨立泉
- 作品数：23 被引量：49H指数：3
- 供职机构：南开大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程农业科学更多>>
- 新型多功能大肠杆菌非融合蛋白表达载体及其用途
- 本发明是根据表达载体结构原理，利用DNA重组技术构建的一种新型原核生物非融合蛋白表达载体。主要特点是以pGEM系列克隆载体为出发质粒，在其多克隆位点的两端加上T7噬菌体基因10的SD序列和T7终止子序列，从而具备表达载体...
- 吕安国时成波吴文芳杨立泉
- 文献传递
- 金黄色葡萄球菌肠毒素A Asp227Ala基因的克隆及表达被引量：4
- 2003年
- 目的 :金黄色葡萄球菌肠毒素AAsp2 2 7ala基因的克隆及表达。方法 :利用错配PCR方法 ,从含有金黄色葡萄球菌肠毒素A(StaphylococcalenterotoxinA ,SEA)基因的质粒中扩增出约 72 0bp的DNA片段 ,将其克隆到表达载体 7ZTS中 ,并转化于JM10 9(DE3)。结果 :重组质粒的测序结果表明 ,它含有 70 2bp(不包括N端 72bp的信号肽编码区 ) ,其核苷酸序列与文献报道完全一致 ,推导的氨基酸序列显示 2 2 7位的天冬氨酸已突变为丙氨酸。结论 :该基因所表达的蛋白为可溶性蛋白 ,表达量占总蛋白 5 1.5 %。表达的蛋白与天然肠毒素A产生的抗体能发生凝集作用 ,具有与天然SEA类同的抗原活性。
- 杨立泉吴文芳时成波吕安国冯家勋柏学亮
- 关键词：金黄色葡萄球菌克隆
- 治疗糖尿病的短肽药物GLP-1在毕赤酵母中的分泌表达被引量：1
- 2006年
- 利用毕赤酵母表达治疗糖尿病的短肽药物GLP-1(胰高血糖素样肽-1)。以pUC18GLP-1 为模板进行PCR,将获得的GLP-1基因片段克隆到pMD18T-vector上,然后将SmaI和NotI双酶切获得的基因小片段插入到表达载体pPIC9上,完成表达载体pPIC9GLP-1的构建,SacI线性化重组质粒,通过醋酸锂转化法转化毕赤酵母GS115感受态细胞,成功构建了能够分泌抗二肽酶Ⅳ降解的长效促胰岛素激素的毕赤酵母工程菌株。结果表明毕赤酵母6号菌株的GLP-1分泌表达产量最高可达 100．00 mg／L．实现了GLP-1在毕赤酵母中的表达,为进一步开发治疗糖尿病新型短肽药物的研究奠定了基础。
- 侯建华王翠艳方园园杨少辉薄涛杨立泉于雷李明刚
- 关键词：糖尿病胰高血糖素样肽-1毕赤酵母短肽分泌表达
- SEA的基因克隆
- 利用PCR方法从金葡菌基因组DNA中扩增出约800bp的DNA片段,将之克隆到pUC19-T载体上并转化E.coli DH5α菌株.重组质粒的测序结果表明,克隆到了sea基因,其核苷酸序列与文献完全一致。
- 时成波吕安国杨立泉吴文芳
- 关键词：金葡菌基因组DNA基因克隆SEA基因PCR方法
- 文献传递
- 一个新的葡萄糖淀粉酶基因在大肠杆菌中的分泌表达被引量：2
- 2007年
- 从天然的少根根霉的基因组中,克隆出一个新的葡萄糖淀粉酶基因。对其进行分子进化的研究,在大肠杆菌中表达,从而给实验带来很大方便。设计引物将其(Gene Bank登录号:DQ903853)克隆到pET-22b(+)载体上,转化大肠杆菌BL-21(DE3)表达。检测培养液的上清有较高的葡萄糖淀粉酶活性,在淀粉板上有明显的晕圈显现。
- 杨立泉马春晓戴晓军侯建华孙官日于晓菊丁东风李明刚
- 关键词：大肠杆菌分泌表达葡萄糖淀粉酶少根根霉
- IL2与抗GD2单链抗体融合蛋白及编码基因和应用
- 本发明涉及生物制药，具体的说是一种新型的IL2－抗GD2单链抗体融合基因在大肠杆菌中的表达和应用；选择经过突变改变其稀有密码子的IL－2，与黑色素瘤单链抗体连接，形成有抗肿瘤作用的融合蛋白具有序列表SEQ ID No：4...
- 吴文芳倪剑锋杨立泉吕安国
- 文献传递
- IL-2与金黄色葡萄球菌肠毒素A和B融合基因的克隆及表达被引量：2
- 2004年
- 目的 :IL - 2与金黄色葡萄球菌肠毒素A和B融合基因的克隆及表达。方法 :分别在金黄色葡萄球菌肠毒素A2 2 7Ala、B基因的两端克隆上两个酶切位点HindⅢ ,KpnⅠ。将IL - 2基因突变 ,设计一段linker使之分别与SEA2 2 7Ala和SEB相连并克隆到PET表达载体中 ,在大肠杆菌DH5α(DE3) -Pass中表达。结果 :表达的蛋白占总蛋白 15 %。结论 :IL -
- 杨立泉吴文芳时成波吕安国冯家勋柏学亮
- 关键词：融合蛋白IL-2
- 金黄色葡萄球菌肠毒素B基因的克隆
- 随着抗肿瘤药物研究的进展,肠毒素逐渐成为人们注意的焦点.利用PCR方法从金葡菌基因组DNA中扩增出约720bp的DNA片段,将之克隆到pGEM-7Zf载体上并转化E.coli DH5α菌株.重组质粒的洌序结果表明,我们克...
- 杨立泉吴文芳时成波吕安国
- 关键词：大肠杆菌金黄色葡萄球菌基因克隆抗肿瘤药物核苷酸序列
- 文献传递
- 一个新葡萄糖淀粉酶基因的克隆与表达
- 2007年
- 根据已报道的米根霉葡萄糖淀粉酶基因序列,通过PCR方法,从天然少根根霉的总DNA中克隆到含有四个内含子的葡萄糖淀粉酶基因。通过设计引物并采取重叠PCR方法删除内含子,获得了新的少根根霉葡萄糖淀粉酶(Rhizopus arrhizu glucoamylase,RaGA)cDNA序列(Accession number:DQ903853)。该基因在毕赤酵母中成功表达,表达产物具有较高的葡萄糖淀粉酶活性。
- 杨立泉戴小军罗元明马春晓侯建华武志强王翠艳李明刚
- 关键词：少根根霉葡萄糖淀粉酶克隆毕赤酵母
- 金黄色葡萄球菌肠毒素B基因的克隆和在大肠杆菌中高效表达被引量：10
- 2002年
- 利用PCR方法从金黄色葡萄球菌TSTw基因组DNA中扩增出约 70 0bp的DNA片段 ,将之克隆到pGEM 7Zf(+)载体上并转化大肠杆菌DH5α菌株。重组质粒的测序结果表明克隆到了seb基因 ,它含有 717bp(不包括N端81bp的信号肽编码区 ) ,其核苷酸序列与文献报道完全一致。将其连接于表达载体 7ZTS上 ,转化到大肠杆菌JM10 9(DE3)内。表达的SEB占总蛋白 33.5 %。
- 杨立泉吴文芳时成波吕安国冯家勋柏学亮
- 关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素B基因克隆大肠杆菌超抗原
