周舒雅
- 作品数：38 被引量：54H指数：5
- 供职机构：中国食品药品检定研究院更多>>
- 发文基金：中国食品药品检定研究院中青年发展研究基金国家自然科学基金“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学环境科学与工程更多>>
- C57-ras癌症转基因小鼠模型胚胎冷冻保种技术研究被引量：2
- 2013年
- 目的建立C57-ras癌症转基因小鼠模型胚胎的冷冻保种技术。方法通过直接收集体内发育的2-细胞胚或者通过体外受精方法获得2-细胞胚,采用玻璃化冷冻法冷冻、复苏、移植,后代经PCR检测。结果体内发育至2细胞期胚胎90枚,解冻后的平均复苏率是67.78%,移植产仔率是21.31%,后代的阳性率是23.08%;体外受精的2细胞期胚胎203枚,解冻复苏60枚,平均复苏率是63.33%,移植产仔率是15.78%,后代的阳性率是33.33%。结论两种胚胎冷冻途径均获得了C57-ras癌症转基因动物模型阳性小鼠,建立了该模型动物的低温保存方法。
- 左琴刘甦苏周舒雅刘佐民王金恒范昌发
- 关键词：体外受精胚胎冷冻
- 对C57-ras致癌性转基因小鼠2细胞期和桑椹期胚胎冷冻保存的比较
- 目的 探讨快速胚胎冷冻在致癌性转基因动物模型C57-ras小鼠保种繁殖中的应用.方法 对4周龄的正常C57BL/6J雌鼠进行超数排卵和选取性成熟C57-ras转基因阳性雄鼠进行交配，分别取得2细胞期胚胎和桑椹胚后进行胚胎...
- 左琴刘甦苏周舒雅王金恒范昌发
- 关键词：胚胎冷冻桑椹胚
- 基于Cre-LoxP系统的条件性定点敲入人源hRas基因小鼠的建立
- 目的 构建基于Cre-LoxP系统的条件性定点敲入人源hRas基因(c-Ha-ras)的小鼠,以获得hRas基因在特定组织器官条件性表达的小鼠模型,用于药物的临床前致癌性安全评价及相关机制研究.方法 首先构建hRas打靶...
- 刘甦苏吴曦周舒雅王辰飞左琴李保文范昌发
- 关键词：癌症
- 提高利用C57BL/6胚胎干细胞系制作基因打靶小鼠效率的研究
- 2015年
- 为了提高通过C57BL/6（B6）胚胎干细胞（embryonic stem cells,ES cells）获得基因打靶小鼠的效率,该研究利用经过体外和体内多能性验证的C57BL/6 ES细胞系B6-1-6,开展了37组平行的制作基因打靶小鼠的实验。首先,对不同的囊胚获取的方式进行对比;其次,统计37组实验中的嵌合鼠表观嵌合度与种系遗传效率,并对二者相关性进行分析。对于BALB/c小鼠,自然排卵相较于激素超排能够得到更多囊胚（2.91个囊胚/只vs 0.82个囊胚/只）;对于最佳注射个数的探索,利用C57BL/6 ES细胞系B6-1-6进行基因修饰并注射囊胚,注射65-97个胚胎获得阳性打靶动物的可能性为95%;嵌合鼠毛色嵌合率与种系遗传率有一定相关性（r=0.316,P=0.057）,而嵌合鼠眼睛颜色与种系遗传效率显著正相关（r=0.328,P〈0.05）。该研究探索了用于C57BL/6 ES细胞注射的BALB/c囊胚获取方式的优化和最佳的注射数量,以及嵌合鼠表观嵌合度与种系遗传效率相关性等方面,以期为相关的研究提供有益的参考。
- 周舒雅左琴刘甦苏王辰飞李保文贺争鸣范昌发
- 关键词：基因打靶
- 原代肝细胞分离培养及其作为致癌物预测体外模型应用的进展被引量：6
- 2015年
- 原代肝细胞的分离培养技术已有50余年的历史,由于原代肝细胞有体内的代谢酶和相应辅助因子,能维持肝脏的代谢功能,是研究药物代谢和致癌作用理想的体外模型。随着近10年来新技术的不断发展,尤其是三维培养技术的建立以及毒理基因组学的应用,使得体外原代肝细胞模型能用于对化合物潜在致癌性风险的预测,成为临床前药物致癌性实验的一种替代方法。本文对原代肝细胞分离、培养技术及其作为致癌物预测体外模型应用的研究进展进行综述和展望。
- 李耀庭吕建军周舒雅范昌发李保文汪巨峰黄芝瑛李波
- 关键词：毒理基因组学基因芯片
- c-Ha-ras在转基因小鼠模型C57-ras各组织中的表达谱分析被引量：6
- 2013年
- 目的:分析转基因c-Ha-ras在C57-ras癌症小鼠模型中的组织表达谱及时空表达差异。方法:利用半定量及荧光定量RT-PCR法,分析不同首建鼠系、不同周龄小鼠各脏器中转基因c-Ha-ras的表达。结果:转基因c-Ha-ras在心、肝等13种组织器官中均有表达,在肺脏中表达最高,在肝脏中表达最低,No.2、No.3和No.5等3个首建鼠均呈现相似的变化规律;转基因在No.5首建鼠中表达水平最高,而在同一个首建鼠系中,12周龄时表达高于8周龄和24周龄。结论:转基因c-Ha-ras在各脏器中能高效表达,并间接表明该转基因能稳定遗传,为C57-ras癌症小鼠模型用于新药临床前致癌性评价提了供理论支持。
- 刘甦苏周舒雅高正琴左琴岳秉飞贺争鸣刘佐民张冰范昌发
- 关键词：基因表达谱
- 模式小鼠总DNA三种提取方法比较被引量：5
- 2014年
- 目的建立简便、快捷、经济的模式小鼠总DNA提取方法,以快速鉴定大批量模式小鼠基因型。方法采用苯酚抽提法、异丙醇沉淀法、鼠耳煮沸法提取同种模式小鼠总DNA,对比DNA纯度、得率、耗费时间,并比较基因型鉴定结果。结果苯酚抽提法得率最高,异丙醇沉淀法最低;而纯度则按照苯酚抽提法、异丙醇沉淀法、鼠耳煮沸法顺序递减;在耗时上鼠耳煮沸法最短。三种方法提取的DNA均可做模版用于基因型鉴定。结论鼠耳煮沸法操作简单、成本最低,快速、基因型鉴定结果可靠,可用于规模化的基因型鉴定实验中。
- 刘甦苏左琴周舒雅王辰飞贺争鸣李保文范昌发
- 关键词：基因型鉴定PCR反应
- 一种EV71疫苗的体内效力评价方法及抗病毒药物筛选方法
- 本发明涉及一种EV71疫苗的体内效力评价方法及抗病毒药物筛选方法，具体涉及生物领域。更具体地，本发明建立了一个由动物模型、假病毒以及活体成像组成的敏感、安全、方便的EV71疫苗效力体内评价体系，为已有疫苗的质量控制和评价...
- 范昌发周舒雅刘强吴星陈盼吴曦王佑春毛群颖刘甦苏左琴黄维金李保文梁争论李文辉贺争鸣
- 文献传递
- P53^(+/-)基因敲除小鼠对尿烷致癌性验证试验的敏感性研究被引量：2
- 2017年
- 目的:通过尿烷多次给药初步验证自主建立的P53^(+/-)基因敲除小鼠(B6-Trp^(tm1)/NIFDC)模型是否比野生型C57BL/6小鼠对尿烷敏感,为国内用于药物临床前安全评价致癌实验短期体内试验提供可用的基因修饰动物模型。方法:在C57BL/6来源的ES细胞中,通过打靶技术敲除p53基因的第2~5外显子后对获得的P53^(+/-)基因敲除小鼠进行PCR基因型鉴定,再与普通C57BL/6小鼠杂交,获得的后代再通过PCR筛选获得基因敲除动物(命名为B6-Trp^(tm1)/NIFDC)。尿烷验证试验共设计3个组,阴性对照组(野生型小鼠):给予生理盐水,尿烷组1(P53^(+/-)敲除小鼠):给予尿烷,尿烷组2(野生型小鼠):给予尿烷,给药方式为腹腔注射共给药3次,给药剂量为1 000 mg·kg^(-1)。给药后第8周开始肿瘤触诊观察,每周1次。给药后6个月后进行计划剖解,通过大体剖检和组织病理学检查以评价P53^(+/-)敲除小鼠对尿烷致癌作用的敏感性。结果:成功获得杂合的P53^(+/-)基因敲除小鼠,给予尿烷后可诱发P53^(+/-)敲除小鼠发生肝脏血管扩张、肺腺瘤、颌下腺血管瘤及脾脏淋巴瘤,病变发生率分别为94.4%、33.3%、5.6%、5.6%;野生型小鼠肝脏血管扩张及肺脏腺瘤的发生率分别为36.8%、10.5%;阴性对照组无肿瘤发生。结论:本研究初步验证自主建立的P53^(+/-)基因敲除小鼠对尿烷的致癌敏感性高于野生型小鼠,该模型有望将来是临床前药物安全性评价致癌性实验短期体内试验候选模型之一。
- 霍桂桃杨艳伟刘甦苏范志云吕建军周舒雅李芊芊林志屈哲张頔祝清芬国明汪巨峰范昌发
- 关键词：基因敲除小鼠药物安全性评价
- 不同小鼠品系囊胚受体对C57BL/6胚胎干细胞种系嵌合效率的影响被引量：2
- 2015年
- 目的考察不同品系的小鼠囊胚对C57BL/6胚胎干细胞种系嵌合效率的影响,进而提高通过在C57BL/6胚胎干细胞中同源重组制作基因打靶小鼠的效率。方法选取近交系B6(Cg)-Tyrc-2J和BALB/c品系及封闭群ICR作为囊胚供体鼠,通过在TLX3、Ai3K和SL三个不同基因修饰ES细胞的种系嵌合实验中,平行比较三者的囊胚利用率、嵌合鼠获得效率以及种系遗传效率等三个方面,并进一步针对囊胚来源这一因素对效率的影响进行统计学分析。结果三种ES细胞均未能通过B6(Cg)-Tyrc-2J品系囊胚的注射获得种系遗传。而BALB/c品系与ICR品系相比,囊胚利用率明显低于ICR品系(P<0.05);嵌合鼠获得效率方面,BALB/c与ICR相当(P=0.115);而种系遗传效率方面,BALB/c品系显著高于其他品系(P<0.01)。结论 BALB/c品系在C57BL/6胚胎干细胞种系嵌合效率方面确实具有优势,然而,由于BALB/c囊胚较难获得,并且存在发育延迟和透明带脆性高等问题,而ICR品系在囊胚获得和利用方面的效率明显高于BABL/c,并且也可以支持C57BL/6胚胎干细胞的种系遗传,因此也是C57BL/6胚胎干细胞囊胚注射中较好的选择。
- 周舒雅左琴刘甦苏王辰飞李保文贺争鸣范昌发
