左琴
- 作品数：44 被引量：40H指数：5
- 供职机构：中国食品药品检定研究院更多>>
- 发文基金：中国食品药品检定研究院中青年发展研究基金国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学机械工程更多>>
- c-Ha-ras在转基因小鼠模型C57-ras各组织中的表达谱分析被引量：6
- 2013年
- 目的:分析转基因c-Ha-ras在C57-ras癌症小鼠模型中的组织表达谱及时空表达差异。方法:利用半定量及荧光定量RT-PCR法,分析不同首建鼠系、不同周龄小鼠各脏器中转基因c-Ha-ras的表达。结果:转基因c-Ha-ras在心、肝等13种组织器官中均有表达,在肺脏中表达最高,在肝脏中表达最低,No.2、No.3和No.5等3个首建鼠均呈现相似的变化规律;转基因在No.5首建鼠中表达水平最高,而在同一个首建鼠系中,12周龄时表达高于8周龄和24周龄。结论:转基因c-Ha-ras在各脏器中能高效表达,并间接表明该转基因能稳定遗传,为C57-ras癌症小鼠模型用于新药临床前致癌性评价提了供理论支持。
- 刘甦苏周舒雅高正琴左琴岳秉飞贺争鸣刘佐民张冰范昌发
- 关键词：基因表达谱
- 模式小鼠总DNA三种提取方法比较被引量：5
- 2014年
- 目的建立简便、快捷、经济的模式小鼠总DNA提取方法,以快速鉴定大批量模式小鼠基因型。方法采用苯酚抽提法、异丙醇沉淀法、鼠耳煮沸法提取同种模式小鼠总DNA,对比DNA纯度、得率、耗费时间,并比较基因型鉴定结果。结果苯酚抽提法得率最高,异丙醇沉淀法最低;而纯度则按照苯酚抽提法、异丙醇沉淀法、鼠耳煮沸法顺序递减;在耗时上鼠耳煮沸法最短。三种方法提取的DNA均可做模版用于基因型鉴定。结论鼠耳煮沸法操作简单、成本最低,快速、基因型鉴定结果可靠,可用于规模化的基因型鉴定实验中。
- 刘甦苏左琴周舒雅王辰飞贺争鸣李保文范昌发
- 关键词：基因型鉴定PCR反应
- 一种EV71疫苗的体内效力评价方法及抗病毒药物筛选方法
- 本发明涉及一种EV71疫苗的体内效力评价方法及抗病毒药物筛选方法，具体涉及生物领域。更具体地，本发明建立了一个由动物模型、假病毒以及活体成像组成的敏感、安全、方便的EV71疫苗效力体内评价体系，为已有疫苗的质量控制和评价...
- 范昌发周舒雅刘强吴星陈盼吴曦王佑春毛群颖刘甦苏左琴黄维金李保文梁争论李文辉贺争鸣
- 文献传递
- C-HA-RAS在转基因小鼠模型C57-RAS各组织中的表达谱分析
- 目的 本文旨在分析转基因C-HA-RAS在C57-RAS癌症小鼠模型中的组织表达谱及时空表达差异.方法 利用半定量及荧光定量RT-PCR法,分析了不同首建鼠系、不同周龄小鼠各脏器中转基因C-HA-RAS的表达.结果 ...
- 刘瓺苏周舒雅高正琴左琴岳秉飞贺争鸣刘佐民张冰范昌发
- 关键词：基因表达谱
- SNP标记在近交系大鼠品系鉴定中的应用及引物序列
- 本发明公开了一种SNP标记在近交系大鼠品系鉴定中的应用及引物序列。本发明提供的SNP标记包括4个SNP位点，能够对选自BN、F344、WKY、Lewis、DA、PVG、SHR和TSC的8个近交系大鼠品系中的部分或全部进行...
- 王洪魏杰李欢周佳琪赵蓝刘巍朱婉月马丽颖左琴付瑞岳秉飞
- 不同途径给药恩诺沙星对豚鼠体质量和血液生理生化指标的影响
- 2024年
- 目的测定不同途径进行恩诺沙星给药,对豚鼠体质量变化和血液生理生化指标的影响。方法分别测定不同途径进行恩诺沙星给药对豚鼠体质量、血液生理指标和血液生化指标的影响,利用统计学方法分析组间差异。结果高剂量恩诺沙星饮水给药会显著影响豚鼠的饮水量,高剂量恩诺沙星和低剂量恩诺沙星饮水给药都会显著影响豚鼠的体质量增长。在血液生理指标方面,不同给药处理组中的白细胞计数WBC、单核细胞绝对值MON、中性粒细胞绝对值GRAN、平均红细胞血红蛋白浓度MCHC、红细胞分布宽度变异系数RDW-CV、血小板分布宽度PDW等6项指标与对照组相比具有统计学意义(P<0.05)。在血液生化指标方面,与对照组相比,不同给药处理组中的钙Ca、丙氨酸氨基转移酶ALT、碱性磷酸酶ALP、γ-谷氨酰转肽酶γ-GT、三酰甘油TG等5项指标具有统计学意义。结论不同途径恩诺沙星给药对豚鼠多项生物学指标影响的测定,为豚鼠的科学用药提供了基础数据。
- 董浩刘志国刘金生武卫国王学文张乐颖董青花朱婉月马丽颖左琴
- 关键词：恩诺沙星血液生理指标血液生化指标
- 一种动物背心
- 本实用新型公开了一种动物背心，包括背心主体，所述背心主体能够固定在动物身上，背心主体上具有用于放置检测仪器的第一容纳袋，由于背心主体能够固定在动物身上，背心主体上具有能够放置检测仪器的第一容纳袋，背心主体和第一容纳袋配合...
- 王学文相磊柳全明刘佐民范涛王劲松左琴伍卫国叶文胜孟建新张健张长军郭怀勇
- 文献传递
- 基于Cre-LoxP系统的条件性定点敲入人源hRas基因小鼠的建立被引量：4
- 2018年
- 目的构建基于Cre-LoxP系统的条件性定点敲入人源hRas基因(c-Ha-ras)的小鼠,以获得hRas基因在特定组织器官条件性表达的小鼠模型,用于药物的临床前致癌性安全评价及相关机制研究。方法首先构建hRas打靶载体,电击法转染入小鼠胚胎干细胞(ES细胞),用正负法筛选阳性ES细胞,通过PCR、Southern鉴定后,将正确重组hRas基因的ES细胞导入C57BL/6 J小鼠囊胚,移入同步发育的受体鼠子宫,妊娠足月出生的嵌合体小鼠与C57BL/6 J小鼠交配获得杂合子hRasfl/+小鼠。再将杂合子hRasfl/+小鼠间交配获得纯合子小鼠hRasfl/fi,然后与全身组织细胞表达Cre重组酶的Tg(EIIa-cre)小鼠进行交配,获得全身细胞表达hRas基因的hRas-EIIa-cre小鼠,并通过荧光定量PCR方法检测不同日龄胚胎期仔鼠的hRas基因表达水平。结果成功构建了基于Cre-LoxP系统的人源hRas基因条件性定点敲入小鼠模型的载体,筛选得到的一个正确克隆,电转ES细胞后进行Southern blot鉴定,经过初筛和复筛,共获得12个阳性克隆,挑选A11号克隆ES细胞进行囊胚注射,移植了48枚胚胎,出生9只小鼠,其中6只为嵌合鼠,将嵌合率>50%的雄鼠与野生型C57BL/6 J雌鼠进行交配,出生21只后代,其中鉴定有4只hRasfl/+小鼠;hRasfl/+小鼠间交配出生29只小鼠,其中有14只纯合子hRasfl/fi小鼠;hRasfl/fl小鼠与Tg(EIIa-cre)工具鼠交配6次,未有仔鼠出生;跟踪不同发育时期胚胎中hRas基因的表达发现,E10.5~15.5 d胚胎中检测到hRas基因表达。结论成功建立运用Cre-LoxP系统建立了带有hRas基因敲入的纯合子小鼠hRasfl/fl,未能得到全身细胞高效表达人源hRas基因的hRas-EIIa-cre小鼠,但为进一步利用hRasfl/fl小鼠模型建立其他组织特异性的条件性基因敲入小鼠模型做好技术储备。
- 刘甦苏吴曦周舒雅王辰飞左琴李保文范昌发
- 关键词：癌症
- 利用荧光定量PCR分析c-Ha-ras基因在C57-ras转基因小鼠中的拷贝数被引量：3
- 2015年
- 目的:利用real-time PCR建立检测C57-ras转基因小鼠中外源c-Ha-ras基因拷贝数的简便方法,为药物安全性评价C57-ras转基因小鼠模型的繁殖和筛选提供数据支持。方法:以自建的人原癌基因c-Ha-ras转基因小鼠为研究对象,利用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR的绝对定量法测定3个C57-ras转基因小鼠系的c-Ha-ras基因Ct值,通过与内参基因GAPDH比较计算获得转基因的拷贝数。结果:内参基因GAPDH的标准曲线为lg NGAPDH=-2.852Ct+26.236,外源基因c-Ha-ras的标准曲线为lg NRAS=-3.068Ct+39.186;经计算,NO.2、NO.3、NO.5系的F6代拷贝数分别为4、4和3,并且系内不同个体间拷贝数一致。结论:利用SYBR GreenⅠreal-time PCR技术建立了检测C57-ras转基因小鼠中外源基因拷贝数的方法,该方法操作简单,节约成本,为C57-ras致癌性模型的选留和应用提供了基础和技术手段,也为其他类似转基因品系中转基因拷贝数的确定提供了一种参考方法。
- 周舒雅刘甦苏左琴王辰飞李保文贺争鸣范昌发
- 关键词：拷贝数
- 一种EV71疫苗的体内效力评价方法及抗病毒药物筛选方法
- 本发明涉及一种EV71疫苗的体内效力评价方法及抗病毒药物筛选方法，具体涉及生物领域。更具体地，本发明建立了一个由动物模型、假病毒以及活体成像组成的敏感、安全、方便的EV71疫苗效力体内评价体系，为已有疫苗的质量控制和评价...
- 范昌发周舒雅刘强吴星陈盼吴曦王佑春毛群颖刘甦苏左琴黄维金李保文梁争论李文辉贺争鸣
- 文献传递
