高瑞
- 作品数：8 被引量：15H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属协和医院更多>>
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- 内皮抑素质粒联合顺铂对上皮性卵巢癌细胞株A2780增殖和凋亡的影响
- 2009年
- 目的:探讨内皮抑素质粒联合顺铂对上皮性卵巢癌细胞株A2780增殖和凋亡的影响。方法:通过瞬时转染内皮抑素质粒到卵巢癌细胞A2780后,采用MTT法和流式细胞术检测内皮抑素以及内皮抑素和顺铂联合应用对细胞增殖和凋亡的影响。结果:MTT法检测发现转染内皮抑素质粒后,A2780细胞的增殖明显减慢,顺铂对其生长抑制作用明显增强,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪检测发现与空白组相比,转染内皮抑素质粒后A2780细胞的G0/G1期细胞明显增加,S期细胞明显减少,细胞的凋亡率由(1.59±0.86)%增加到(8.66±1.27)%;内皮抑素质粒联合顺铂治疗后,上述差异更加显著(P<0.01)。结论:内皮抑素联合顺铂可通过抑制A2780细胞的生长和增加其凋亡而产生协同抗瘤作用。
- 黄在菊徐舒翔高瑞肖兰王泽华
- 关键词：内皮抑素顺铂卵巢肿瘤
- Nav1.5-E3通过抑制Nav1.5钠通道功能影响卵巢癌细胞的迁移和侵袭性
- 目的：Nav1.5是电压门控亚通道(voltage-gated sodium channels,VGSC)亚型之一,其异常表达涉及许多恶性肿瘤细胞生物学特性的调控,目前已知的利多卡因或河豚毒素等多种VGSC抑制剂虽然能阻...
- 高瑞曹婷蔡晶雷鸣王泽华
- 关键词：电压门控钠通道NAV1.5迁移卵巢肿瘤
- 电压门控钠通道亚型Nav1.5在乳腺癌细胞中的表达及与细胞体外转移的关系被引量：1
- 2009年
- 目的观察电压门控钠通道(voltage-gated sodiumchannels,VGSCs)亚型在乳腺癌细胞中的表达及其与细胞体外转移的关系。方法通过RT-PCR,Western blot,MTT及Transwell小室迁移和侵袭实验,检测乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7中VGSCs的表达及VGSCs特异性阻断剂河豚毒素(TTX)对细胞的毒性、迁移和侵袭特性的影响。结果在MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞中同时存在NaV1.1,NaV1.4和NaV1.8的高表达;而在MDA-MB-231细胞中发现NaV1.3和NaV1.5、NaV1.6的表达量较MCF-7细胞中明显升高,尤其是NaV1.5的表达具有功能性意义。体外应用1μmol/L和30μmol/L TTX处理细胞后,与对照组相比,MDA-MB-231细胞的体外侵袭性分别下降了(12.50±0.19)%和(53.58±1.03)%,而MCF-7细胞的体外侵袭性却没有发生明显变化。结论乳腺癌细胞MDA-MB-231中存在高表达的NaV1.5,TTX阻断VGSCs后显著抑制其体外侵袭力。
- 高瑞王静沈怡雷鸣王泽华
- 关键词：电压门控钠通道NAV1.5乳腺癌
- 小分子干扰RNA对卵巢癌紫杉醇耐药株的多药耐药性逆转的研究被引量：6
- 2007年
- 目的探讨小分子干扰RNA(smallinterferingRNAs,siRNA)对A2780/Taxol细胞多药耐药性的逆转作用。方法2005-07-2005-12华中科技大学同济医学院附属协和医院根据多药耐药基因1(MDR1)序列设计2条siRNA,将siRNA包装入质粒,经转化、克隆、扩增、纯化,与pEGFPN-1质粒一起共转染A2780/Taxol细胞,流式细胞仪、MTT、RT-PCR和Westernblot分别检测转染效率、紫杉醇的半数抑制浓度(IC50)、细胞P-gp蛋白及MDR1mRNA表达。结果两种重组质粒与EGFP质粒转染效率无明显差异,P-gp表达水平明显下调。两条siR-NA对紫杉醇敏感性的相对逆转率分别达63·8%及51·2%。MDR1基因不同程度的沉默,MDR-A能更有效封闭MDR1基因,MDR1mRNA相对水平下降(67·3±0·8)%。结论siRNA能有效逆转MDR1基因编码P-gp介导的A2780/Taxol细胞多药耐药。
- 肖兰卢实高瑞梁铭霖刘福安王泽华
- 关键词：卵巢肿瘤小分子干扰RNAMDR1基因多药耐药
- 电压门控钠通道SCN5A/Nav1.5在卵巢癌中的表达及意义被引量：4
- 2009年
- 目的:电压门控钠通道(voltage-gated sodium channels,VGSCs)与多种恶性肿瘤的转移过程密切相关。本研究探索VGSCs亚型SCN5A/Nav1.5在人卵巢癌中功能性表达的意义及其对卵巢癌细胞体外转移能力的影响。方法:通过SBFI荧光探针、免疫荧光、实时荧光定量PCR(real-time fluorogentic quantitative PCR,RFQ-PCR)、Western印迹、免疫组织化学、CCK-8Kit和Transwell小室法,分别检测卵巢癌SKOV-3细胞中Na+的分布、SCN5A/Nav1.5在分子和蛋白水平的表达及其与卵巢癌细胞体外迁移和侵袭能力的相关性。结果:在卵巢癌细胞SKOV-3和上皮性卵巢癌组织中存在SCN5A/Nav1.5的异常表达,30μmol/L河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)能分别抑制SKOV-3细胞内Na+浓度、细胞体外迁移和侵袭力的(41.51±0.41)%、(33.80±1.6)%和(43.60±2.9)%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:电压门控钠通道SCN5A/Nav1.5参与卵巢癌细胞的体外转移过程,并在卵巢癌的发生发展过程中起重要的作用,有可能成为卵巢癌治疗的靶标。
- 高瑞沈怡徐舒翔雷鸣王泽华
- 关键词：钠通道电压门控肿瘤侵润河豚毒素
- MDR1及MDR3基因沉默对紫杉醇耐药细胞株A2780/Taxol凋亡能力的影响被引量：3
- 2008年
- 目的:探讨采用RNA干扰技术沉默多药耐药基因MDR1及MDR3后对卵巢癌紫杉醇耐药细胞株A2780/Taxol凋亡能力的影响。方法:将MDR1和MDR3的siRNA重组质粒转染A2780/Taxol,通过MTT法、流式细胞术、免疫荧光法及Western blot方法分别检测细胞对紫杉醇的敏感性、细胞周期和凋亡率、细胞中caspase-3的活性及MDR编码的P-gp蛋白的表达的变化。结果:转染SiRNAs重组质粒后,A2780/Taxol对紫杉醇敏感性的相对逆转率分别为64.3%及53.9%,细胞凋亡率由1.59%分别增加到9.43%和8.66%,细胞中caspase-3活性增强,P-gp蛋白含量明显减少,与对照组比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:MDR1和MDR3的siRNA质粒可通过诱导卵巢癌紫杉醇耐药细胞A2780/Taxol凋亡,恢复其对紫杉醇的敏感性。
- 高瑞肖兰王泽华
- 关键词：RNA干扰多药耐药P-GP蛋白卵巢肿瘤
- 电压门控钠通道在卵巢癌中功能性表达的研究
- 2009年
- 目的:探讨电压门控钠通道(voltage-gated sodium channels,VGSC)不同亚型表达及与卵巢癌转移的关系。方法:以人卵巢癌细胞和卵巢肿瘤组织标本为研究对象,用RT-PCR,激光共聚焦,MTT及Transwell小室法,检测卵巢癌细胞中VGSC表达的亚型及VGSC特异性阻断剂河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)对卵巢癌体外侵袭性的影响。结果:卵巢癌高转移细胞系(CAOV3,A2780,SKOV3)中高表达的VGSC亚型Nav1.5与卵巢癌的恶性生物学特性明显相关;30μmol/L TTX对CAOV3,A2780,SKOV3细胞体外的侵袭力的抑制率约为50%,差异有统计学意义(P<0.05),对不表达Nav1.5的低转移卵巢癌细胞Anglne的转移级联过程则没有明显影响。结论:VGSC亚型Nav1.5与卵巢癌的体外转移明显相关,可能成为卵巢肿瘤的潜在标记物和治疗靶点。
- 高瑞沈怡徐舒翔雷鸣王泽华
- 关键词：电压门控钠通道NAV1.5肿瘤侵润卵巢肿瘤河豚毒素
- MDR1及MDR3基因沉默逆转卵巢上皮性癌细胞对紫杉醇耐药的实验研究被引量：1
- 2007年
- 目的研究多药耐药基因——MDR1及 MDR3基因沉默逆转卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞 A2780/taxol 对紫杉醇耐药的作用。方法用真核质粒介导的针对 MDR1及 MDR3基因的短发夹状 RNA(shRNA)转染 A2780/taxol 细胞(分别为 MDR1组、MDR3组),空质粒转染作为对照(空载体组)。流式细胞仪分别检测细胞早期凋亡、罗丹明123(Rh123)积聚情况,末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸标记法(TUNEL)检测细胞晚期凋亡情况,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞对紫杉醇的半数抑制浓度(IC_(50)),RT-PCR 技术检测 MDR1及 MDR3 mRNA 的表达,蛋白印迹法(western blot)检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)蛋白的表达。结果转染后,MDR1组及MDR3组 A2780/taxol 细胞的早期凋亡率分别达(20.21±0.56)%和(10.87±1.24)%。MDR1、MDR3组 A2780/taxol 细胞内的 Rh123平均荧光强度分别为116.6±8.1、98.4±3.8,显著高于空载体组的40.2±1.6,差异有统计学意义(P<0.05)。TUNEL 检测显示细胞发生了晚期凋亡。MDR1、MDR3组A2780/taxol 细胞对紫杉醇的 IC_(50)明显下降,分别与空载体组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。转染48 h 后,A2780/taxol 细胞中 MDR1和 MDR3 mRNA 的表达水平分别下降了(73.3±0.8)%和(51.6±0.4)%;MDR1、MDR3组细胞 caspase-3的表达量分别为(80.8±2.6)%、(72.0±4.7)%,均较空载体组增加。结论 MDR1及 MDR3基因沉默能恢复 A2780/taxol 细胞对紫杉醇的敏感性并诱导细胞凋亡,从而逆转 A2780/taxol 细胞对紫杉醇的耐药性。
- 肖兰高瑞卢实卢美松梁铭霖任利容王泽华
- 关键词：卵巢肿瘤紫杉酚
