肖兰
- 作品数：29 被引量：108H指数：6
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- SB203580与雷帕霉素联合对人子宫内膜癌Ishikawa细胞的体外抗肿瘤作用被引量：7
- 2009年
- 目的观察体外P38MAPK信号通路抑制剂SB203580单独及SB203580联合mTOR(哺乳动物雷帕霉素靶蛋白)信号通路抑制剂雷帕霉素(Rapamycin)对Ishikawa细胞生长、细胞凋亡以及细胞侵袭能力的作用。方法一定浓度梯度的SB203580单独或联合运用雷帕霉素,MTT(四甲基偶氮唑蓝)法检测细胞抑制率、软琼脂克隆形成实验检测肿瘤细胞体外成瘤性、流式细胞仪检测细胞凋亡、Transwell法检测Ishikawa细胞体外侵袭力的改变。结果SB203580对Ishikawa细胞有抑制生长、降低体外成瘤性、诱导凋亡和降低细胞侵袭能力的作用;在相同条件下,SB203580与雷帕霉素联合的抗肿瘤作用要明显优于SB203580单用。结论SB203580与雷帕霉素可协同抑制人子宫内膜癌细胞Ishikawa的生长、诱导细胞凋亡,并同时抑制Ishikawa细胞的侵袭性,具有良好抗肿瘤前景。
- 李小毛肖兰杨越波沈慧敏曾海涛王泽华
- 关键词：子宫内膜癌SB203580雷帕霉素信号通路ISHIKAWA细胞
- siRNA逆转乳腺癌细胞MDR1及MDR3介导阿霉素耐药的研究被引量：3
- 2006年
- 目的探讨小分子干扰RNA(siRNA)对多药耐药基因MDR1及MDR3介导的乳腺癌MCF-7/ADR细胞耐阿霉素的逆转作用。方法pSuppressorNeoABCB1(针对MDR1的siRNA)及ABCB4(针对MDR3的siRNA)质粒转染MCF-7/ADR及MCF-7细胞(乳腺癌亲本细胞株),流式细胞术检测细胞凋亡,MTT检测MCF-7/ADR细胞对阿霉素的半数抑制浓度(IC50),RT-PCR检测MDR1及MDR3mRNA的表达。结果转染pSup-pressorNeoABCB1的MCF-7/ADR细胞凋亡率(18.21%±1.65%)高于转染pSuppressorNeoABCB4的细胞凋亡率(9.07%±2.17%),P<0.05;二者与转染空载体组的细胞凋亡率(0.2%±0.36%)相比,P均<0.01;pSuppressorNeoABCB1质粒对阿霉素的相对逆转效应高于pSuppressorNeoABCB4质粒(P<0.05);两个质粒转染组的MDR1和MDR3mRNA表达均受到明显抑制(P均<0.01)。结论针对MDR1及MDR3基因的siR-NA可逆转乳腺癌细胞对阿霉素的耐药性。
- 胡建莉肖兰崔文
- 关键词：小分子干扰RNA多药耐药基因乳腺癌细胞
- 微核及凋亡技术预测宫颈癌细胞放射敏感性研究被引量：2
- 2006年
- 目的：探讨微核及凋亡检测技术判断宫颈癌细胞放射敏感性的价值。方法：运用集落形成法、流式细胞术、CB微核法，分别检测3株宫颈癌细胞株（HeLa、SiHa、RJC）经X射线照射后细胞存活率、凋亡率及微核率的变化。结果：3株细胞接受0～8Gy射线照射后的微核率与照射剂量存在剂量-效应关系，其中HeLa细胞的微核率与照射剂量呈显著线形关系（P〈0．05）；照射后3株细胞的凋亡与照射剂量呈正相关（P〈0．01）；照射后3株细胞存活率与MN率成负相关（P〈0．01）。结论：3株宫颈癌细胞的体外实验证明，微核及凋亡两项指标均能反映宫颈癌细胞的放射敏感性，但同时检测微核及凋亡是否可进一步提高预测准确性还有待进一步研究。
- 胡建莉肖兰
- 关键词：宫颈癌细胞微核凋亡
- 敲除人乳腺癌MCF-7细胞中PTEN基因对JNK通路活性的影响被引量：3
- 2008年
- 背景与目的:PTEN与多种肿瘤发生发展密切相关,大量研究表明PTEN基因通过直接或间接作用整合复杂的信号网络系统,并影响靶分子及其下游信号级联反应。本研究探讨敲除MCF-7细胞中PTEN基因对JNK通路活性的影响。方法:PTEN反义寡核苷酸转染后,激光共聚焦显微镜检测MCF-7细胞内PTEN蛋白表达;流式细胞术、四甲基偶氮唑蓝(MTT)及Western blot法分别检测SP600125诱导的细胞早期凋亡和细胞周期改变、细胞增殖抑制、细胞中JNK及其下游底物ATF-2、C-Jun的磷酸化水平。结果:PTEN反义寡核苷酸有效封闭MCF-7细胞中PTEN蛋白表达;SP600125(10μmol/L)诱导已敲除PTEN的MCF-7细胞发生早期凋亡,凋亡率达(32.4±2.4)%,细胞发生G1期阻滞、细胞增殖明显受抑制,与SP600125组、反义组细胞相比差异有显著性(P<0.05);反义+SP600125组MCF-7细胞中磷酸化JNK及其下游底物ATF-2及C-Jun磷酸化水平下调。结论:MCF-7细胞中JNK通路激活与PTEN表达水平相关,PTEN缺失使MCF-7细胞中JNK通路活化,细胞对JNK相关抑制剂的敏感性增加。
- 靳毅胡建莉肖兰崔文
- 关键词：MCF-7细胞JNK通路PTEN
- 氧化苦参碱对人食管癌细胞株Eca109增殖及凋亡的影响被引量：14
- 2007年
- 目的:观察氧化苦参碱(Oxy)对食管癌细胞株Eca109的抑制增殖及诱导凋亡作用。方法:培养食管癌细胞株(Eca109),以MTT比色法、生长曲线、及流式细胞术测定Oxy对食管癌细胞株Eca109抑制增殖及诱导凋亡的作用。免疫沉淀法并ERK活性试剂盒测定ERK活性;免疫印记法测定p-ERK1/2、Cyclin D1、p21waf/cip1、Bax及Bcl-2表达。结果:MTT实验及生长曲线显示Oxy明显抑制Eca109细胞增殖,流式细胞术显示Oxy可诱导Eca109细胞凋亡;免疫沉淀法显示Oxy可抑制ERK活性,免疫印记法显示Oxy抑制p-ERK1/2、Cyclin D1及Bcl-2表达,同时上调p21waf/cip1和Bax表达,Bax/Bcl-2比值增加。结论:氧化苦参碱可以抑制食管癌细胞株Eca109增殖,机制与影响ERK及下游CyclinD1、p21waf/cip1表达有关;其诱导凋亡途径与上调Bax表达,降低Bcl-2表达有关。
- 胡建莉伍钢肖兰
- 关键词：氧化苦参碱食管癌细胞外信号调节激酶增殖凋亡
- CXCR4及其配体SDF-1在宫颈癌转移中的作用及其机制研究被引量：20
- 2008年
- 背景与目的:趋化因子CXCR4[chemokine(C-X-C)receptor 4]受体及其配体基质细胞衍生因子1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)可能与某些恶性肿瘤的迁移、侵袭和转移有关。本研究拟探讨CXCR4受体及其配体SDF-1(CXCR4/SDF-1轴)通过激活丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPK)信号通路在宫颈癌转移中的作用及其机制。方法:采用激光共聚焦显微镜检测宫颈癌HeLa细胞内钙离子波动,Western blot法分析CXCR4/SDF-1对宫颈癌HeLa细胞中细胞外调节信号激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)(包括ERK1和ERK2)磷酸化的影响;分别通过粘附实验、明胶酶谱法检测CXCR4/SDF-1对宫颈癌细胞粘附能力、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)分泌的影响。结果:SDF-1α与CXCR4相互结合后诱导了HeLa细胞胞内钙的迅速动员,其荧光强度(fluorescent intensity,FI)平均基础值与峰值差异有统计学意义(P<0.01);诱导了HeLa细胞ERK1/2快速磷酸化,作用后30min时磷酸化程度最强;增加了HeLa细胞粘附能力,不同浓度的SDF-1α与CXCR4结合后不同程度地增加了HeLa细胞粘附于纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、层粘连蛋白(laminin,LN)的粘附细胞数,与对照组比较其差异均有统计学意义(P<0.05);加入ERK1/2信号通路抑制剂PD98059后,粘附于FN和LN的细胞数下降,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);促进宫颈癌HeLa细胞分泌活性的MMP-2,这一作用随SDF-1α浓度升高而增强,SDF-1α在800ng/mL浓度处分泌达高峰,以后开始下降。结论:CXCR4/SDF-1通过激活MAPK通路调控宫颈癌细胞的粘附能力,促进活性MMP-2分泌,进而参与宫颈癌侵袭和转移。
- 沈晓燕王绍海梁铭霖汪宏波肖兰王泽华
- 关键词：CXCR4SDF-1宫颈肿瘤HELA细胞
- 内皮抑素质粒联合顺铂对上皮性卵巢癌细胞株A2780增殖和凋亡的影响
- 2009年
- 目的:探讨内皮抑素质粒联合顺铂对上皮性卵巢癌细胞株A2780增殖和凋亡的影响。方法:通过瞬时转染内皮抑素质粒到卵巢癌细胞A2780后,采用MTT法和流式细胞术检测内皮抑素以及内皮抑素和顺铂联合应用对细胞增殖和凋亡的影响。结果:MTT法检测发现转染内皮抑素质粒后,A2780细胞的增殖明显减慢,顺铂对其生长抑制作用明显增强,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪检测发现与空白组相比,转染内皮抑素质粒后A2780细胞的G0/G1期细胞明显增加,S期细胞明显减少,细胞的凋亡率由(1.59±0.86)%增加到(8.66±1.27)%;内皮抑素质粒联合顺铂治疗后,上述差异更加显著(P<0.01)。结论:内皮抑素联合顺铂可通过抑制A2780细胞的生长和增加其凋亡而产生协同抗瘤作用。
- 黄在菊徐舒翔高瑞肖兰王泽华
- 关键词：内皮抑素顺铂卵巢肿瘤
- p38丝裂原活化蛋白激酶通路介导的早期生长反应基因-1活性与乳腺癌细胞表柔比星耐药性的关系被引量：1
- 2009年
- 目的 探讨p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）通路介导的早期生长反应基因（EGR）-1活性与乳腺癌细胞表柔比星耐药的关系。方法SB203580（15μmol／L）干预后，激光共聚焦显微镜观察；流式细胞术、四甲基偶氮唑蓝（MTT）、凝胶电泳迁移率法（EMSA）、RT—PCR及Westernblot分别检测耐药MCF-7／Adr及亲本MCF-7细胞内磷酸化p38MAPK蛋白表达、细胞凋亡及细胞内表柔比星浓度、EGR-1蛋白活性改变、细胞对表柔比星敏感性；EGR-1 mRNA、P糖蛋白、磷酸化p53及p38蛋白表达。结果p38MAPK通路激活的MCF-7／Adr细胞经SB203580（15μmol／L）干预24和48h后，（1）MCF-7／Adr细胞（早＋晚期）凋亡率分别由（0．54±0．17）％和（0．81±0．16）％提高为（25．36±1．17）％和（38．21±1．25）％，P〈0．05，并呈一定时间依赖性；（2）MCF-7／Adr细胞的平均荧光强度分别为（32．45±2．36）及（41．66±3．12），均高于空白对照组及DMSO组MCF-7／Adr细胞的（14．17±1．45）及（16．28±0．63），P〈0．01；MCF-7／Adr细胞对表柔比星药物的耐受性显著降低；（3）增加了MCF-7／Adr细胞的EGR-1活性，IC50分别为（21．53±2．17）和（8．77±1.02），低于空白对照组（40．74±2．56）；伴随p38MAPK通路活性抑制和EGR-1mRNA表达增加，磷酸化p53蛋白表达显著上调，而P糖蛋白显著下调。结论p38MAPK通路与乳腺癌表柔比星耐药密切相关，可能与p38MAPK通路介导的EGR-1表达相关，EGR-1激活抑制了其下游耐药基因转录，从而使表柔比星耐药得以逆转。
- 肖兰胡建莉崔文
- 关键词：P38丝裂原活化蛋白激酶类胞间信号肽类和蛋白质类表柔比星P糖蛋白衔接蛋白质类
- 重组人苗勒抑制物对2株卵巢癌细胞增殖的抑制作用被引量：2
- 2010年
- 目的:探讨重组人苗勒抑制物(rhMIS)对人卵巢癌细胞株OVCAR8及SKOV3细胞生长的影响。方法:Western blotting检测细胞中MISII型受体(MISIIR)蛋白表达,激光共聚焦显微镜观察MISIIR蛋白在细胞中定位。rhMIS分别干预2株卵巢癌细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖变化;软琼脂克隆实验检测细胞体外成瘤性;流式细胞术分析rhMIS对细胞凋亡和细胞周期影响。结果:OVCAR8细胞表达MISIIR蛋白,其定位于细胞表面及细胞质中,SKOV3细胞中MISIIR蛋白表达缺损。经rhMIS作用48h后,OVCAR8细胞的生长速率显著减慢、细胞体外成瘤性明显降低、细胞发生凋亡和G1期细胞增加,rhMIS(10mg/L)干预后细胞凋亡率和G1期细胞比率分别可高达(31.3±2.1)%和(70.4±3.0)%,与SKOV3细胞比较差异显著(P<0.01)。结论:重组人苗勒抑制物可以抑制MISIIR蛋白表达的卵巢癌细胞增殖、诱导其凋亡、阻滞细胞周期,这有望成为治疗卵巢癌的一个新靶点。
- 肖兰杨越波李田王小韵李小毛
- 关键词：卵巢肿瘤受体
- MDR1及MDR3基因与卵巢癌细胞顺铂耐药的关系被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨MDR1(Multidrug resistance gene-1)及MDR3(Multidrug resistance gene-3)基因与卵巢癌细胞顺铂耐药的关系。方法:两种质粒一起瞬时转染A2780/DDP细胞,空载体组及未转染组作为对照。Annexin V-FITC/PI双标流式细胞术、MTT法、RT-PCR、western blot分别检测A2780/DDP细胞早晚期凋亡、细胞增殖活性、MDR1和MDR3 mRNA表达及caspase-3蛋白水平。结果:两种质粒(pSuppressorNeo MDR1 siRNA,MDR3 siRNA)均未能逆转A2780/DDP细胞顺铂耐药:①流式显示转染MDR1 siRNA组、MDR3 siRNA组和pSuppressorNeo空载体组后相比较未转染A2780/DDP细胞凋亡率无显著改变(P>0.05);②在一定药物浓度范围内,转染MDR1和MDR3小分子干扰RNA均未能增强顺铂对A2780/DDP细胞的细胞毒作用;③与空载体组和未转染细胞相比,A2780/DDP细胞的MDR3及MDR1 mRNA表达均低下(P>0.05);④Caspase-3蛋白表达未见增加。结论:顺铂所致的卵巢癌细胞多药耐药与MDR1及MDR3基因过度表达均无关。
- 肖兰王泽华李智敏卢实
- 关键词：小分子干扰RNA顺铂
