赵姝娴
- 作品数：3 被引量：26H指数：2
- 供职机构：华南农业大学食品学院生物工程系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 银耳芽孢完整细胞高效转化体系的建立被引量：13
- 2008年
- 银耳(Tremella fuciformis)属于高等担子菌,其担孢子芽殖产生酵母状分生孢子称为银耳芽孢.银耳芽孢单核,能像酵母那样快速生长且容易培养,具备优良外源基因表达宿主的特点.本研究以gpd-Gl启动子分别与绿色荧光蛋白基因gfp和潮霉素抗性基因hph连接构建表达载体pGlg-gfp和pGlq-hph;设置潮霉素浓度梯度在3种培养基中对银耳芽孢的敏感性进行测定,结果表明银耳芽孢在不同的培养基上对潮霉素的敏感性不同,在MA培养基上其最低敏感浓度为5μg/mL;采用电击法把pGlq-hph质粒转化进银耳芽孢完整细胞,假定转化子经MA筛选培养基筛选,结果表明银耳芽孢完整细胞电击转化的最佳参数为:STM电击缓冲液、银耳芽孢浓度1.0×108个/mL,电击体积200μL,表达质粒6μg,电击电压2.0kV/cm,电击后采用MB液体培养基静置预培养48h,转化率达277个/μgDNA.采用最佳电击参数把质粒pGlg-gfp和pGlg-hph按1︰1共转化银耳芽孢,转化子经过筛选培养基筛选、PCR鉴定及Southern杂交验证,结果表明受鉴定的8个转化子中有3个整合了gfp基因,其共转化率为37.5%.这3个gfp基因转化子的芽孢在激光荧光显微镜下可观察到发出强烈的荧光,表明了外源gfp基因能够在银耳芽孢中获得高效率的表达.
- 郭丽琼柳永赵姝娴刘二鲜林俊芳
- 关键词：电击转化基因表达GFP基因
- 安全选择标记的转基因食用菌研究进展被引量：15
- 2007年
- 在食用菌外源基因转化过程中,目的基因的导入常需要串联易于识别的选择标记基因,用于转化子的筛选。当筛选完成后,选择标记基因特别是抗性标记基因的存在即是多余的,甚至是有害的,存在生物安全隐患。有鉴于此,本文对获得安全选择标记基因的转基因食用菌作一综述。
- 赵姝娴林俊芳王杰郭丽琼
- 关键词：选择标记基因生物安全性
- 多功能纤维素酶基因（mfc）遗传转化银耳芽孢的研究
- 纤维素、半纤维素是自然界最丰富的可再生资源之一。地球每年由光合作用产生数亿吨的植物干物质，其主要成分就是纤维素和半纤维素。纤维素、半纤维素的充分利用及有效的转化对于解决当前的能源危机、粮食短缺、环境污染等问题具有重大意义...
- 赵姝娴
- 关键词：基因表达
- 文献传递
