柳永
- 作品数:70 被引量:264H指数:10
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- 发文基金:浙江省科技攻关计划国家自然科学基金引进国际先进农业科技计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 新型Resilin-R5融合蛋白的大肠杆菌表达和纯化被引量:1
- 2014年
- 为了获得兼具"高弹性"和"硅沉积"性能的新型功能生物材料,将具有高弹性的Resilin蛋白与具有硅沉积作用的R5肽进行了融合,研究其在大肠杆菌中的表达,建立了简易的纯化方法。首先,将果蝇弹性蛋白基因CG15920序列与硅藻R5肽基因序列进行拼接,经过稀有密码子优化后合成重组基因resilin-r5。然后将其插入原核表达载体pET28a,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS获得表达菌株,并通过IPTG进行诱导表达。最后以盐析加热法和Ni离子柱亲和层析法纯化带组氨酸标签的重组融合蛋白。最终实现Resilin-R5融合蛋白的高效表达,产量达到120 mg·L-1发酵液,为"高弹性-硅沉积"融合蛋白Resilin-R5的性能表征和创新应用奠定了基础。
- 毛争争柳永孙燕周曼刘子铎汤江武
- 关键词:蛋白纯化
- 负载抗菌肽的壳聚糖/γ-聚谷氨酸复合纳米粒子的制备方法
- 本发明公开了一种负载抗菌肽的壳聚糖/γ-聚谷氨酸复合纳米粒子的制备方法,其特征在于所述制备方法具体包括如下步骤:(1)将0.5~5.0mg/mL的γ-聚谷氨酸水溶液与0.01~10.0mg/mL的抗菌肽水溶液混合,不断搅...
- 孙燕柳永 许尧兴 符思达 曹勇 王磊
- 文献传递
- 一种仲丁灵纳米乳液及其制备方法
- 本发明公开了一种仲丁灵纳米乳液,其配方为:体积比为1:1~1:9的25~70%仲丁灵油相、0.6~2.4%聚乙烯醇水相和0.1~1%稳定剂组成,其中:仲丁灵油相中含有0.1~2%乳化剂。本发明制备操作简单,以超声波处理法...
- 陈兴江柳永商胜华曹毅蔡刘体陆宁
- 文献传递
- 灵芝启动子同源序列的克隆及其分析被引量:3
- 2006年
- 采用同源克隆法,以赤芝基因组DNA为模板进行PCR扩增,扩增产物克隆进T-载体后,进行DNA测序和分析。对获得的12条DNA序列进行核酸序列比对(BLASTn)、Proscan∶version1.7预测和SignalScan分析,综合结果显示,LY17.1、LY19.3、LY26和LY31为可能启动子序列。其中LY17.1和LY26具有完全的启动子特征,包括核心启动子区、TATA盒、转录起始位点等。LY31与香菇gpd启动子具有98%的相似性。
- 柳永郭丽琼林俊芳
- 关键词:灵芝启动子克隆
- 黑曲霉MA-56β-甘露聚糖酶的生产条件研究被引量:2
- 2009年
- 本文通过Plackett-Burman设计及单因素试验,研究了影响黑曲霉菌株MA-56生产β-甘露聚糖酶的主要因子,并优化了影响β-甘露聚糖酶固体生产的因素。结果表明,硫酸亚铁、牛肉膏、磷酸二氢钾和玉米浆粉4个因素对β-甘露聚糖酶生产影响显著,可信度大于90%,但均为产酶负影响因子;尿素、氯化钙和硫酸镁为产酶的正影响因子,但影响不显著。单因子试验表明,黑曲霉菌株MA-56产β-甘露聚糖酶的最适培养基条件为:麸皮8g,豆粕2g,魔芋粉0.1g(以10g干基为标准)。当固形物与加水比10∶9,接种孢子悬浮液2.5mL(以一支菌种斜面加30mL无菌水为标准),300mL三角瓶中装量7g培养基,发酵56h时,产酶量达到2.01×105U/g。
- 李艳丽许少春柳永许尧兴封飞
- 关键词:Β-甘露聚糖酶PLACKETT-BURMAN设计
- 合生素对肉鸡生长性能及生化指标的影响被引量:6
- 2010年
- 选用300只1日龄爱拔益加肉仔鸡,随机分成5组,分别为基础日粮+抗生素(对照组)、基础日粮+益生素Ⅰ、基础日粮+益生素Ⅱ、基础日粮+合生素Ⅰ和基础日粮+合生素Ⅱ,每处理3个重复,每重复20只鸡,研究合生素对肉鸡生长性能及血液中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆固醇(TC)和超氧化物歧化酶(SOD)的影响。结果表明:在1~21d,合生素Ⅰ组平均日增质量显著高于抗生素组,合生素Ⅰ、合生素Ⅱ组和益生素Ⅰ组的平均日采食量显著高于抗生素组。在22~49d和1~49d,添加合生素和益生素不影响肉鸡的平均日增质量、平均日采食量和饲料转化率(P>0.05)。合生素与益生素均降低血清中的谷丙转氨酶活力和总胆固醇含量,提高超氧化物歧化酶活力(P<0.05),但不影响谷草转氨酶活力(P>0.05)。
- 杨会玲高玉鹏许少春李艳丽柳永许尧兴
- 关键词:合生素肉鸡饲养血清指标
- 发酵棉籽粕部分替代鱼粉对黑鲷幼鱼生长性能、体成分及血浆生化指标的影响被引量:18
- 2014年
- 本试验旨在研究发酵棉籽粕部分替代鱼粉对黑鲷幼鱼生长性能、体成分和血浆生化指标的影响。选用初重为(9.20±0.22)g的黑鲷幼鱼400尾,随机分为4组,每组5个重复,每个重复20尾。4组试验鱼分别饲喂以0、8%、16%和24%的发酵棉籽粕替代基础饲料中鱼粉的等氮等能试验饲料,并分别命名为FCM0(对照)、FCM8、FCM16和FCM24组。每天投喂饲料2次(07:00和16:00),并记录投喂量和鱼死亡情况。试验期为60 d。结果表明:与对照组相比,FCM 24组试验鱼的增重率和特定生长率显著降低(P<0.05),而其他试验组(FCM 8、FCM 16组)的各生长性能指标均未见显著差异(P>0.05)。发酵棉籽粕替代鱼粉组黑鲷幼鱼的肝体比和肥满度较对照组差异不显著(P>0.05),而FCM24组黑鲷幼鱼鱼体粗灰分含量显著高于对照组(P<0.05)。FCM24组黑鲷幼鱼血浆中碱性磷酸酶活性与对照组相比显著降低(P<0.05);其他试验组(FCM8、FCM16组)与对照组相比,血浆中谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、超氧化物歧化酶和溶菌酶的活性均无显著差异(P>0.05)。由此可知,发酵棉籽粕可在黑鲷幼鱼饲料中最高添加至16%用于替代鱼粉,而对黑鲷的生长性能、体成分和血浆生化指标无显著影响。
- 孙宏叶有标姚晓红吴逸飞王新柳永汤江武
- 关键词:黑鲷鱼粉血浆生化指标
- 灵芝免疫调节蛋白基因的克隆和分析被引量:8
- 2006年
- 采用同源克隆方法,分别以6个灵芝品种和1个云芝品种的基因组DNA为模板,进行灵芝免疫调节蛋白基因的PCR扩增。扩增产物克隆进T-载体后,进行DNA测序和BLASTn序列分析。结果表明,从赤芝、紫芝、韩芝和甜芝4个菌株中克隆到的PCR扩增片段,含有灵芝免疫调节蛋白基因编码区全长,顺次编号为gimp01,gimp02,gimp03,gimp04。它们已经在国际GeneBank中登记注册,注册号:AY449802,AY449805,AY449804,AY449803。
- 柳永郭丽琼王海燕林俊芳
- 关键词:灵芝克隆
- 一种混菌固态发酵谷朊粉制备小麦活性肽的方法
- 本发明公开了一种以市售谷朊粉为原料制备小麦活性肽的方法,该方法采用枯草芽孢杆菌与嗜酸乳杆菌的复配发酵剂,进行混合固态发酵;再经加水提取、离心分离、膜精制后,将得到的滤液经喷雾干燥而成。本发明克服了现有技术的不足,制备方法...
- 汤江武孙宏吴逸飞姚晓红王新柳永
- 文献传递
- 一种富含酿酒酵母的葡甘露低聚糖饲料添加剂的制备方法
- 本发明提供一种动物饲料添加剂,其特征在于,它包括:质量含量大于20%以上的葡甘露低聚糖;5×10<Sup>5</Sup>cfu/g以上的酿酒酵母。在一个优选的方式中,所述的葡甘露低聚糖的质量含量大于25%。同时本发明一种...
- 李艳丽许尧兴许少春柳永
- 文献传递