- 酪氨酸蛋白激酶底物的 ELISA 测定及应用被引量：2
- 1993年
- 用合成的磷酸酪氨酸牛血清白蛋白(P-tyr-BSA)免疫家兔得抗血清,此抗血清与3种磷蛋白均有交叉反应.将 IgG 纯化并与辣根过氧化物酶偶联,经 Sephadex G-200纯化得酶标结合物.纯化的 IgG 只与载体牛血清白蛋白和磷酸酪氨酸蛋白有交叉反应.ELISA (酶联免疫吸附测定法)的最小检出量为2—4ng,与被检磷酸酪氨酸蛋白均有交叉反应,但与磷酸丝氨酸和磷酸苏氨酸蛋白及其他含磷酸物质无交叉反应.样品变异系数,批间和批内均小于5%.血清磷酸酪氨酸蛋白检测结果:20例正常人均阴性,20例急性淋巴细胞性白血病18例阳性,14例非急性淋巴细胞性白血病均阳性.
- 张明志张光毅赵升皓
- 关键词：ELISA磷酸酪氨酸蛋白激酶
- 沙土鼠脑缺血和再灌流后钙调素蛋白激酶Ⅱ活性变化及其与脑电图的关系被引量：6
- 1992年
- 结扎蒙古沙土鼠双侧颈总动脉制作急性脑缺血模型,观察了急性脑缺血和再灌流后钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaM-PKⅡ)和蛋白磷酸酶(CaM-PrP)活性的变化以及脑电图(EEG)的表现。结果表明:(1)CaM-PKⅡ活性随缺血时间延长而逐渐降低,缺血10min酶活性即显著降低;(2)缺血10min再灌流,CaM～PKⅡ活性可部分恢复;(3)急性脑缺血时CaM-PrP活性无明显改变;(4)缺血10min再灌流,EEG在1h基本恢复正常,缺血20min再灌流,EEG在3h仍未恢复正常。上述结果提示:CaM-PKⅡ活性对缺血非常敏感,而CaM-PrP活性对缺血不敏感,脑缺血再灌流后EEG的表现与CaM-PKⅡ活性有一定的相关性。
- 唐放鸣张光毅赵文君赵升皓
- 关键词：脑缺血脑电图
- IATPD对淋巴细胞膜酪氨酸蛋白激酶的抑制作用被引量：1
- 1992年
- 以人工合成的多肽PGAT为底物,鉴定了人外周血淋巴细胞膜TPK。首次发现IATPD对该酶活性有较强的抑制作用,其IC_(50)约为300μmol/L;改变其底物浓度,测定酶活性并应用Lineweaver-Burk双倒数作图法作图,结果表明,IATPD对该酶活性的抑制作用与ATP呈竞争性,与PGAT呈非竞争性。
- 张光毅冯志民魏涌赵升皓俞良莉王礼琛
- 关键词：淋巴细胞酪氨酸蛋白激酶
- 急性脑缺血钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ和蛋白磷酸酶活性的变化被引量：1
- 1991年
- 本文报导了蒙古沙土鼠双侧颈总动脉结扎造成急性脑缺血在不同时间内钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaM—PKⅡ)和钙调素依赖性蛋白磷酸酶(CaM—PrP)活性的变化。结果显示 CaM—PKⅡ活性对脑缺血非常敏感,缺血5分钟、10分钟、20分钟和30分钟各组 CaM—PKⅡ活性均值均显著低于对照组,而 CaM—PrP 活性对脑缺血不敏感。探讨了 CaM—PKⅡ活性降低的可能机制。
- 唐放鸣张光毅赵文君赵升皓
- 关键词：激酶磷酸酶蛋白酶脑缺血
- 大鼠肾脏和其它组织中磷酸酪氨酸蛋白的研究被引量：2
- 1993年
- 本文采用P-tyr-BSA为免疫原免疫家无得抗血清。将纯化的IgG与HRP偶联,建立了P-tyr-Pr的ELISA法,并测定了正常大鼠肾脏等组织中P-tyr-Pr含量,其分布规律如下:上清中P-tyr-Pr含量高者,其颗粒部分则低,反之亦然;其中肾脏上清中含量远比其它组织(脾、肺、肝等)高。在此基础上,又研究了膜性肾炎大鼠肾脏P-tyr-Pr含量,发现其上清中的含量远远高于正常大鼠肾脏中的含量。
- 张明志张光毅王迎伟赵升皓
- 关键词：磷酸酪氨酸蛋白肾脏
- 钙调素抗体的制备和鉴定被引量：3
- 1989年
- 将从猪脑中所得SDS—PAGE纯的钙调素进行化学修饰,得(DNPm—CaM)n—BSA。将此修饰物免疫California白兔得抗血清。钙调素的ELISA测定表明:抗血清与天然牛脑和天然猪脑钙调素、CaBP_(72)(钙结合蛋白,分子量72KDa)、CaN(神经钙蛋白)、TnI(肌钙蛋白抑制亚单位)的交叉反应率分别为100％、100％、0.7％、0.4％、0.02％;与CaBP_(11)、CaBP_(12)、TnT、TnC、S—100、MLC(肌球蛋白轻链)均无交叉反应。免疫转移鉴定技术示:大鼠脑匀浆上清液显示强弱两条区带,强染色带相当于钙调素的位置,弱显色带分子量小于钙调素;其它所测大鼠组织匀浆上清液只在钙调素位置显示单一区带。
- 张明志于宏林张光毅赵升皓
- 关键词：钙调素抗体制备
- 猪脾脏酪氨酸蛋白激酶的研究
- 1991年
- 采用DEAE-Sepharose CL-6B离子交换层析和Tyrosine-agarose亲和层析,首次从猪脾脏30000Xg颗粒中部分纯化了酪氨酸蛋白激酶,其比活性约为12000pmol.min^(-1).mg^(-1)。磷酸氨基酸分析表明,该酶能催化合成多肽poly(Glu.Ala.Tyr)_n(6:3:1)中的酪氨酸(Tyr)磷酸化,对该多肤废物和ATP的Km值分别约为2mg/mL和15μmol/L。Mn^(2+)对部分纯化的酪氨酸蛋白激酶的最大激活活性高于Mg^(2+),其AC_(50)分别约为1.4mmol/L和8mmol/L;发现红花素能强烈地抑制该酶活性,其IC_(50)约为125μmol/L。
- 张光毅陆梁赵文君赵升皓向仁德
- 关键词：脾脏蛋白激酶
- 重金属离子刺激主动脉平滑肌细胞的增殖被引量：3
- 1989年
- 用重金属离子Cd^(2+),Pb^(2+)和Hg^(2+)替代培养液中的Ca^(2+),观察了家兔主动脉平滑肌细胞(ASMC)的增殖与钙调素(CaM)的关系。发现Cd^(2+),Pb^(2+)和Hg^(2+)均不同程度地刺激ASMC的增殖、增加G_1晚期CaM的含量和降低环核苷酸磷酸二酯酶的活性。实验提示重金属毒害可能与动脉粥样硬化和高血压的病因有关。
- 卢坤平赵升皓王道生
- 关键词：重金属离子主动脉平滑肌
- 葡甲胺环腺苷酸对凝血酶诱导的人血小板胞浆游离钙浓度变化的影响被引量：4
- 1994年
- 葡甲胺环腺苷酸对凝血酶诱导的人血小板胞浆游离钙浓度变化的影响陆志强，王道生，赵升皓（苏州医学院药理教研室，苏州２１５００７）葡甲胺环腺苷酸（ｍｅｇｌｕｍｉｎｅｃｙｃｌｉｃａｄｅｎｙｌａｔｅ，ＭＣＡ）是环腺苷酸（ｃＡＭＰ）与葡甲胺结合而成的ｃＡＭＰ类衍...
- 陆志强王道生赵升皓
- 关键词：葡甲胺环腺苷酸
- 葡甲胺环腺苷酸快于cAMP跨膜进入细胞内被引量：3
- 1998年
- 建立分析细胞内葡甲胺环腺苷酸和cAMP浓度的HPLC方法，其灵敏度可达1pmole，并可同时检测AMP、ADP、ATP的浓度。建立分析条件为：LichrosorbRP18柱，梯度程序为0～3min，100％A；3～20min，0～100％B。其中，缓冲液A为1mmol／LPiCA，1．75％乙腈，32．5mmol／LKH2PO4，pH3．6；缓冲液B为1mmol／LPiCA，3．5％乙腈，65mmol／LKH2PO4，pH3．6。流速1．5ml／min。检测波长259nm。人红细胞与1mmol／L葡甲胺环腺苷酸或cAMP孵育后分析细胞内自由药物浓度。cAMP和葡甲胺环腺苷酸都可进入细胞内。葡甲胺环腺苷酸快于cAMP扩散通过细胞膜并使胞内药物浓度达到μmol／L级，可激活胞内各种应激反应。
- 赵琛朱曙东赵升皓
- 关键词：葡甲胺环腺苷酸CAMP细胞膜HPLC
