张永彦
- 作品数：6 被引量：93H指数：4
- 供职机构：西北大学生命科学学院陕西省生物技术重点实验室更多>>
- 发文基金：陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 一种优化的植物总DNA提取方法被引量：47
- 2004年
- 根据自己提取植物基因组DNA的实际经验,改进了Clark利用CTAB提取植物基因组DNA的方法.在试验过程中发现,通过在研磨材料时加入液氮、用剪去端部的吸头转移含有DNA的溶液,并且将加入RNaseA消化RNA的步骤改在最后进行等一系列改进,可以获得高质量的DNA.本文同时就主要提取步骤进行了分析.
- 黄萱高丽美张永彦徐子勤
- 关键词：植物总DNA
- 采用玉米Ubi-1启动子获得低拷贝转基因玉米植株被引量：12
- 2004年
- 通过基因枪粒子轰击和草丁膦 (PPT)选择获得可育的玉米转基因植株 ,并分析了外源基因在转化体中的拷贝数与启动子之间的关系。用玉米Ubi 1启动子驱动外源基因 ,玉米转化体中外源基因的拷贝数较低 ;可能的原因为Ubi 1启动子通过与其内部同源序列发生重组而被定点整合进玉米基因组 ,共转化的两种质粒DNA在整合至玉米染色体DNA之前已重构成为一个整体。结果显示使用某一植物自身基因的启动子可以降低外源基因在该物种转基因个体中的拷贝数 ,进而避免基因沉默现象的发生。目前已得到第二代转基因玉米种子。
- 徐子勤龚莉桂黄萱张永彦高丽美
- 关键词：转基因植株玉米
- 高羊茅高频再生体系的建立被引量：4
- 2007年
- 目的建立高频再生体系,为相关基因的转化提供良好的受体系统。方法以高羊茅(Fes-tuca.arundinacea)成熟种子为外植体,以MS为基本培养基,进行高羊茅胚性愈伤组织诱导、继代、分化及生根培养。结果初生愈伤组织在MS+2,4-D5 mg/L+CH400 mg/L+蔗糖60 g/L+琼脂12 g/L的继代培养基诱导出体细胞胚后,在含6-BA2.0 mg/L+NAA0.5 mg/L的MS培养基上分化形成丛生苗,分化率达78.9%;再生苗在1/2 MS+NAA0.5 mg/L生根培养基上生根,生根率达100%。结论MS+2,4-D 9 mg/L为最佳愈伤组织诱导培养基,MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5mg/L为最佳分化培养基,1/2 MS+NAA0.5 mg/L为最佳生根培养基。
- 王健徐子勤张永彦高丽美黄萱
- 关键词：高羊茅愈伤组织诱导分化高频再生体系
- 多年生黑麦草成熟胚再生体系的建立及基因枪转化被引量：13
- 2005年
- 目的 :建立以多年生黑麦草成熟胚为起始材料的再生体系 ,用于基因枪转化。方法 :多年生黑麦草成熟种子在附加 5mg L 2 ,4 D的MS培养基上诱导愈伤组织 ,转至新继代培养基上产生胚性愈伤组织。分化培养基为无激素MS培养基。再生植株在培养基成分减半的无激素MS培养基生根 ,之后移栽至土壤。基于这一再生体系 ,用含有水稻几丁质酶基因RC2 4的质粒pARN6和含有草丁膦乙酰转移酶基因Bar的质粒pDB1 ,通过基因枪轰击胚性愈伤组织。用附加PPT的继代培养基进行转化植株的抗性筛选。结果 :共获得 2 4 3株再生植株。通过PCR进行检测 ,获得1 8株整合有RC2 4基因的植株 ,1 5株整合有Bar基因的植株 ,同时转入 2个基因的植株 2株。
- 张永彦徐子勤高丽美黄萱王健
- 关键词：MS培养基多年生黑麦草成熟胚继代培养基胚性愈伤组织基因
- 高羊茅组织培养再生体系及GUS基因瞬间表达研究被引量：18
- 2005年
- 以成熟种子为外植体,对高羊茅组织培养和植株再生体系进行了优化,分析了不同浓度2,4-D、6-BA和激动素对高羊茅愈伤组织诱导和愈伤组织分化成苗的影响,结果表明:9.0mg/L2,4-D对愈伤组织的诱导效果最佳,0.2mg/L激动素是愈伤组织分化成苗的最适浓度,二者的诱导率和分化率分别达到68.08%和45.83%.在愈伤组织继代培养基中附加1.0mg/L2,4-D、0.5mg/L6-BA和1.25mg/LCuSO4有利于胚性愈伤组织的形成,可以明显促进愈伤组织分化.同时,采用基因枪法将GUS基因导入高羊茅愈伤组织中,通过组织化学染色检测到了GUS瞬间表达活性;并对影响GUS基因瞬间表达的因素进行了分析,以期为提高基因枪法遗传转化效率提供参考.
- 高丽美徐子勤张永彦黄萱刘杨
- 关键词：高羊茅基因枪GUS基因
- 黑麦草biolistics转化体系的建立与抗盐基因片段的克隆
- 本文以MS为基本培养基对黑麦草进行胚性愈伤组织的诱导，建立起以多年生黑麦草成熟胚为起始材料的离体再生体系。研究了不同浓度2,4-D对胚性愈伤组织形成的影响，发现2,4-D浓度为5mg/L时诱导胚性愈伤组织效果最佳。利用P...
- 张永彦
- 关键词：多年生黑麦草胚性愈伤组织诱导离体再生体系基因克隆
- 文献传递
