孙磊 作品数:12 被引量:28 H指数:4 供职机构: 潍坊医学院 更多>> 发文基金: 山东省优秀中青年科学家科研奖励基金 国家自然科学基金 山东省高等学校科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
NUAK1能促进乳腺癌上皮-间质转化的发生引起侵袭转移 被引量:6 2013年 目的探讨NUAK1(NUAK family SNF1-like kinase 1)与上皮-间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)及乳腺癌侵袭转移之间的关系。方法应用免疫组织化学染色法检测100例乳腺癌组织及其癌旁正常组织(>5 cm)中NUAK1、EMT相关蛋白上皮-钙黏素(epithelial-cadherin,E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达,并分析其相关性。应用RNAi技术将合成的小RNA干扰质粒瞬时转染乳腺癌细胞系MDA-MB-231后,进行Western blot检测转染成功后,应用Transwell侵袭实验检测细胞体外侵袭能力,再检测转染细胞中E-cadherin、Vimentin蛋白的表达情况。结果浸润性导管癌组织中NUAK1蛋白的表达率明显高于导管内癌和癌旁正常组织(P<0.01);浸润性导管癌中NUAK1蛋白的表达与分化程度、淋巴结转移、远处转移、E-cadherin、Vimentin的表达有关(P<0.05),与患者的年龄、肿瘤的大小、ER、PR及c-erbB-2的表达无关(P>0.05)。转染72 h后,与Scr/MDA-MB-231细胞相比,siNUAK1/MDA-MB-231细胞中NUAK1蛋白表达水平明显降低的同时,细胞的体外侵袭能力明显降低(P<0.05)。并且伴有Vimentin蛋白表达水平的降低和E-cadherin蛋白表达水平的升高(P<0.05)。结论 NUAK1能促进乳腺癌EMT的发生,从而促进乳腺癌的侵袭转移。 刘菲 孙磊 张丽娜 田慧玲 李洪利 李文通 张宝刚 尹崇高关键词:乳腺癌 上皮间质转化 E-CADHERIN VIMENTIN 下调Raptor表达对乳腺癌细胞侵袭能力影响及其机制探讨 被引量:2 2014年 目的研究Raptor对乳腺癌细胞侵袭能力的作用及其机制。方法采用小RNA干扰技术,向MDA-MB-231细胞转染Raptor小RNA干扰质粒,并通过蛋白质印迹法检测转染细胞Raptor的表达水平以鉴定转染效果。癌细胞体外侵袭实验观察使用RNAi降低Raptor表达后MDA-MB-231细胞侵袭能力的变化。再进行蛋白质印迹实验检测细胞中ARK5的磷酸化情况和基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)与基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表达。收集潍坊医学院附属医院病理科2008-01-15-2012-12-31 52例乳腺癌和8例癌旁组织,使用免疫组织化学染色检测Raptor的表达水平。结果转染成功的SiRaptor/MDA-MB-231细胞Raptor蛋白条带灰度值为529.22±81.58,明显低于MDA-MB-231组的1 345.63±215.05(F=37.799,P=0.004)和SCR/MDA-MB-231组的1 349.15±85.13,F=145.082,P<0.001。体外侵袭实验发现,实验组穿透Matrivgel基质膜的细胞数为40.00±3.61,少于对照组细胞的82.33±10.50,t=6.602,P=0.003。EGF刺激后实验组细胞中ARK5蛋白的磷酸化水平为224.72±30.14,较对照组(852.46±88.93)低,F=134.083,P<0.001;MMP-2蛋白的表达为604.32±177.06,较对照组(1 051.72±116.54)低,F=13.365,P=0.022;MMP-9蛋白的表达为347.85±84.80,较对照组(924.46±108.61)低,F=52.535,P=0.002。乳腺癌组织Raptor的表达与淋巴结转移存在相关性,χ2=9.094,P<0.001。结论 Raptor可能通过磷酸化ARK5以增加MMP-2和MMP-9的表达,从而与乳腺癌细胞的侵袭相关。 李小龙 齐岳亮 陈为一 孙磊 田红艳 张宝刚 刘雨清关键词:RAPTOR 乳腺肿瘤 雷帕霉素靶蛋白 NUAK1通过影响F-actin聚合促进乳腺癌的侵袭转移 被引量:5 2013年 本课题组先前研究证明NUAK1/ARK5参与乳腺癌、胶质瘤侵袭转移,但机制尚不清楚.本文证明,NUAK1通过影响F-actin聚合促进乳腺癌的侵袭转移.应用小RNA干扰技术敲除乳腺癌细胞系MDA-MB-231中的NUAK1,用G418进行稳定筛选,并用Western印迹进行蛋白质表达检测,结果显示,成功敲除MDA-MB-231细胞中的NUAK1;采用Transwell侵袭实验检测NUAK1在乳腺癌细胞侵袭转移中的作用,结果表明,NUAK1被干扰的SiNUAK1/MDA-231细胞的侵袭能力明显减弱;应用免疫荧光法对细胞的F-actin进行荧光染色,半定量F-actin聚合分析结果显示,IGF-1在转染空载的细胞组(Scr/MDA-231)能诱导肌动蛋白短暂的聚合反应,而在敲除NUAK1的细胞组(SiNUAK1/MDA-231)肌动蛋白的聚合显著减少;用细胞因子IGF-1刺激乳腺癌细胞观察cofilin磷酸化,结果显示,在敲除NUAK1的细胞组(SiNUAK1/MDA-231),IGF-1诱导的cofilin的磷酸化明显受抑制.上述结果表明,NUAK1能通过促进F-actin的聚合从而影响乳腺癌细胞的侵袭转移. 尹崇高 李平 李洪利 孙磊 刘菲 张丽娜 李文通 张宝刚关键词:乳腺肿瘤 靶向阻断Snail逆转非小细胞肺癌多药耐药的研究 被引量:4 2014年 目的:探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)上皮-间质转化(epithelialmesenchymal transition,EMT)与多药耐药(multidrug resistance,MDR)基因的相互关系,为临床肺癌治疗提供实验和理论依据。方法:采用免疫组织化学SP法检测52例肺癌组织中Snail、P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、肺耐药蛋白(lung resistance p rotein,LRP)的表达并分析它们的相关性。用RNA干扰技术稳定敲除肺腺癌细胞系A549中的Snail,采用Western blot法检测稳定转染后Snail蛋白的表达情况。Snail下降后,Western blot法检测P-gp、LRP蛋白表达情况。结果:Snail、P-gp、LRP在NSCLC组织中的表达率分别是73.1%、53.8%、51.9%,P-gp及LRP的蛋白表达与Snail的表达呈正相关。采用RNA干扰的方法成功敲除肺腺癌细胞系A549中Snail基因;A549细胞中Snail基因被敲除后耐药相关蛋白P-gp和LRP的表达明显降低。结论:在NSCLC中,Snail蛋白的表达与耐药相关基因的表达呈正相关;阻断肺癌细胞系A549细胞中的Snail能有效逆转肺癌的多药耐药特性。 张丽娜 刘菲 孙磊 田慧玲 陈为一 李洪利 张宝刚 尹崇高 郭文君关键词:SNAIL 上皮一间质转化 LRP 乳腺癌中mTOR、CCR7的表达及与淋巴结转移的关系 被引量:4 2013年 目的探讨乳腺浸润性导管癌中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)与趋化因子受体7(chemokine receptor 7,CCR7)的表达以及与乳腺癌侵袭、转移之间的关系。方法采用免疫组化MaxVision法检测105例乳腺浸润性导管癌、55例转移淋巴结及40例正常乳腺组织中mTOR和CCR7的表达,并分析mTOR和CCR7的表达与乳腺癌侵袭和淋巴结转移的关系以及二者之间的相关性。结果 mTOR在乳腺浸润性导管癌、转移淋巴结及正常乳腺组织中的阳性率分别为68%(71/105)、93%(51/55)、25%(10/40),差异有统计学意义(P<0.05);CCR7在乳腺浸润性导管癌、转移淋巴结及正常乳腺组织中的阳性率分别为74%(78/105)、94%(52/55)、28%(11/40),差异有统计学意义(P<0.05)。在乳腺癌中,mTOR和CCR7的表达呈正相关(rs=0.203,P<0.05)。mTOR和CCR7的高表达均与淋巴结转移有关(P<0.05)。结论mTOR和CCR7的异常高表达可能与乳腺癌的侵袭、转移有关,且检测二者的表达可作为判断乳腺癌转移及预后的预测指标。 刘清华 孙磊 李媛媛 李小龙 王竹青 刘雨清关键词:乳腺肿瘤 浸润性导管癌 MTOR CCR7 VEGF、HER2、Ki-67在胃印戒细胞癌中的表达及其临床意义 2021年 通过检测VEGF、HER2、Ki-67在胃印戒细胞癌中的表达,分析其与临床特征的相关性及预后价值。方法:选取潍坊医学院附属医院2017年6月至2019年5月胃印戒细胞癌组织60例,检测血管内皮生长因子(VEGF)、表皮生长因子受体2(HER2)和细胞核相关抗原(Ki-67)的蛋白表达水平,分析其表达水平与肿瘤浸润深度、淋巴结转移及远处转移的相关性。结果:胃印戒细胞癌组织中VEGF、HER2、Ki-67的表达阳性率分别为58.33%(35/60)、48.33%(29/60)和43.33%(26/60)。相关性分析中,VEGF的表达与浸润深度、淋巴结转移及远处转移相关(P<0.05),HER2表达与浸润深度、淋巴结转移及 远处转移无关(P>0.05),Ki-67表达与浸润深度、淋巴结转移无关(P>0.05),与远处转移有关(P<0.05)。结论:胃印戒细胞癌组织中VEGF、HER2、Ki-67蛋白呈高表达,且VEGF表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移及远处转移相关联,可能参与胃癌发生、发展及远处转移过程,KI-67表达与远传转移有关,因此,上述指标对胃癌的诊治和预后评估具有参考意义。 胡佳璐 林雅茹 孙磊 路中关键词:胃印戒细胞癌 血管内皮生长因子 表皮生长因子受体2 siRNA干扰降低ARK5或Gab2表达对LN-229细胞侵袭的影响及作用机制 2014年 目的探讨siRNA干扰降低ARK5或Gab2表达对LN-229细胞侵袭的影响及作用机制。方法采用小RNA干扰技术转染LN-229细胞株,并用Western blot分别检测转染前和瞬时转染后ARK5和Gab2蛋白表达。通过体外侵袭实验检测转染后侵袭能力的变化。ARK5或Gab2下降后明胶酶谱分别检测MMP-2和MMP-9蛋白表达。结果 转染ARK5,Gab2及SCR质粒的LN-229细胞分别称SiARK5/LN-229,SiGab2/LN-229和SCR/LN-229。转染后,与SCR/LN-229及LN-229相比,SiARK5/LN-229中ARK5蛋白表达降低,SiGab2/LN-229中Gab2蛋白表达降低。ARK5或Gab2降低的LN-229细胞侵袭并穿透Matrigel膜基质的细胞数量均比SCR/LN-229少(P<0.01)。与SCR/LN-229细胞相比,SiARK5/LN-229和SiGab2/LN-229中MMP-2,MMP-9蛋白表达均降低。结论 应用小RNA干扰技术降低ARK5或Gab2的表达使LN-229细胞侵袭力降低,同时MMP-2和MMP-9表达降低,提示ARK5和Gab2表达降低可通过调节MMP-2和MMP-9的表达影响LN-229细胞的侵袭。 孙磊 李小龙 田红艳 刘雨清关键词:胶质瘤 小RNA干扰 免疫检查点抑制剂治疗三阴性乳腺癌的研究进展 被引量:1 2021年 乳腺癌是女性癌症中最常被诊断出的疾病,其死亡率在女性癌症中排第二[1]。与其他乳腺癌亚型相比,由于三阴性乳腺癌(Triple-negative breast cancer,TNBC)的肿瘤异质性以及局限的治疗手段导致患者通常具有相对较差的结果[2]。在疾病的早期和晚期,化疗是TNBC患者的主要治疗手段。由于TNBC患者的预后不良且缺乏靶向疗法,所以众多学者努力研究其分子靶标[3]。 孙磊 林雅茹 王桂春 张琳 路中关键词:三阴性乳腺癌 肿瘤异质性 靶向疗法 分子靶标 Gab2-ARK5信号通路促进胶质瘤侵袭的探讨 目的:胶质瘤是中枢神经系统最为常见的肿瘤之一,它的预后与肿瘤的侵袭有着密切的联系。本研究通过探讨ARK5和Gab2是否通过Gab2-Akt-ARK5信号通路促进胶质瘤的侵袭,为有效控制胶质瘤的侵袭提供全新的治疗靶点。材料... 孙磊关键词:小RNA干扰 文献传递 乳腺癌mTOR基因和蛋白表达与侵袭转移的关系 2013年 目的探讨mTORmRNA及编码蛋白在人乳腺浸润性导管癌组中的表达水平及其与侵袭、转移的关系。方法采用原位杂交法和免疫组化(PV-9000)法分别检测65例乳腺浸润性导管癌及32例癌旁正常乳腺组织中mTORmRNA及蛋白水平的表达情况。结果 mTORmR NA在乳腺浸润性导管癌中的阳性表达率(69%,45/65)高于癌旁正常乳腺组织中的阳性表达率(31%,10/32),差异有统计学意义(P<0.01);mTOR蛋白在乳腺浸润性导管癌中的阳性表达率(68%,44/65)高于癌旁正常乳腺组织中的阳性表达率(25%,8/32),差异有统计学意义(P<0.01)。同时,mTORmRNA和蛋白表达水平与乳腺浸润性导管癌的淋巴结转移呈显著正相关(P<0.05),且原位杂交和免疫组化两种检测方法的结果呈显著关联(P<0.05)。结论 mTOR信号通路的激活和异常表达,可能与乳腺癌的侵袭和转移有关,且检测mTORmRNA及蛋白表达水平可作为评价乳腺癌预后的重要指标。 刘清华 孙磊 李小龙 刘雨清关键词:免疫组化 原位杂交