叶智鸧
- 作品数：4 被引量：5H指数：1
- 供职机构：浙江理工大学更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 铁离子对大肠杆菌外膜蛋白OmpW的调控机制研究
- 先天免疫是机体对抗大部分细菌的主要免疫系统，而先天免疫防御最有效的策略就是控制体液中的铁。同时，铁也是细菌毒力和致病性的关键调控因子，细菌毒力及其致病性取决于其从宿主体内获取铁的能力。但目前对铁调控细菌毒力的分子机制并未...
- 叶智鸧
- 关键词：大肠杆菌铁离子
- 文献传递
- 副溶血弧菌免疫原性蛋白的鉴定及克隆表达被引量：1
- 2013年
- 运用蛋白质组学及免疫学技术筛选和鉴定副溶血弧菌的外膜蛋白中具有较好免疫原性的外膜蛋白,为防治副溶血弧菌类疾病的亚单位疫苗的研发奠定基础。用灭活的副溶血弧菌免疫ICR小鼠制备抗血清;通过对外膜蛋白进行SDS-PAGE和Western Blot分析筛选免疫原性蛋白,经MALDI-TOF/TOF-MS质谱分析,对免疫原性蛋白进行鉴定。克隆表达免疫原性蛋白VP0802,并对该蛋白的表达条件进行优化,最后纯化蛋白VP0802,并免疫小鼠获得抗血清,通过Western Blot验证蛋白VP0802的免疫原性。结果:免疫小鼠所得到的抗血清效价为1∶5 000;经免疫印迹分析确定了12种外膜蛋白具有较好免疫原性,其中10种外膜蛋白经质谱分析得到鉴定,分别为LPS-assembly protein,VP0802,Maltoporin,Chitoporin,OmpC,OmpA,OmpU,OmpK,VP1243和VP0966。成功构建免疫原性蛋白VP0802的高表达菌株;该菌株在低温低转速的条件下诱导,目的蛋白仍以包涵体形式存在,在37℃,220r/min,IPTG终浓度为1mmol/L的条件下诱导,目的蛋白表达量较高,纯化得到蛋白VP0802并验证了该蛋白的免疫原性。表明在副溶血弧菌的外膜蛋白中存在多种与免疫原性相关的蛋白,且部分蛋白为首次发现具有免疫原性。
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- 关键词：副溶血弧菌外膜蛋白免疫原性
- 一种副溶血弧菌外膜蛋白LptD的制备方法及其应用
- 本发明涉及一种副溶血弧菌外膜蛋白LptD的制备方法及其应用，通过培养副溶血弧菌菌种并提取DNA，设计副溶血弧菌外膜蛋白编码序列的引物对，以副溶血弧菌的基因组DNA为模板进行PCR扩增，PCR产物和载体pET-28a(+)...
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- 文献传递
- 巨噬细胞应激的铜绿假单胞菌磷酸化蛋白质组分析被引量：1
- 2014年
- 目的鉴定巨噬细胞应激的铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）磷酸化蛋白质组，分析磷酸化修饰在该菌应答应激中的作用。方法采用强阳离子交换层析和固相金属离子亲和层析（SCX-IMAC）富集应激细菌的磷酸化肽段，并利用纳升级液相色谱-质谱联用技术（1lanOLC-MS／MS）进行鉴定和分析其磷酸化蛋白质组。结果在应激细菌中鉴定到14个磷酸化肽段，对应于12个磷酸化蛋白质，其中膜蛋白占50％，提示膜蛋白的磷酸化修饰在这一过程中具有关键作用。蛋白质功能分析显示这些磷酸化蛋白质主要涉及应激应答、铁摄取转运、厌氧呼吸、过氧化氢的应激应答、磷酸化介导的信号转导等生物过程。结论铜绿假单胞菌的蛋白质磷酸化修饰对其转导应激信号及应答巨噬细胞内的缺铁、缺氧和氧化应激等不利生存环境具有关键作用，该结果为深入理解该菌的毒力及致病机制提供新的思路。
- 潘建义王长一叶智鸧陈冉赵辅昆
- 关键词：铜绿假单胞菌巨噬细胞应激蛋白质磷酸化磷酸化蛋白质组
