潘建义
- 作品数：33 被引量：52H指数：5
- 供职机构：浙江理工大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学文化科学轻工技术与工程更多>>
- 一种副溶血弧菌外膜蛋白LptD的制备方法及其应用
- 本发明涉及一种副溶血弧菌外膜蛋白LptD的制备方法及其应用，通过培养副溶血弧菌菌种并提取DNA，设计副溶血弧菌外膜蛋白编码序列的引物对，以副溶血弧菌的基因组DNA为模板进行PCR扩增，PCR产物和载体pET-28a(+)...
- 潘建义李楚楚叶智鸧温良优陈冉田丽花
- 文献传递
- 大肠埃希氏菌蛋白质复合物组的鉴定及其与耐药关系的研究
- 潘建义李惠姜冰王保成王三英彭宣宪
- 关键词：大肠埃希氏菌
- 海南捕鸟蛛毒素-Ⅵ的分离纯化及鉴定被引量：9
- 2002年
- 从分布于我国海南省的海南捕鸟蛛 (Selenocosmiahainana)粗毒中 ,应用阳离子交换色谱和反相高效液相色谱分离得到 1种多肽神经毒素 ,命名为海南捕鸟蛛毒素 -Ⅵ (Hainantoxin Ⅵ ,HNTX Ⅵ )。MALDI -TOF质谱分析及氨基酸序列分析表明该多肽毒素分子量为 3 9984 9kDa ,序列为NH2 ECKYLWGTCEKDE HCCEHLGCNKKHGWCGWDGTF COOH ,其中的 6个Cys形成 3对二硫键。HNTX Ⅵ能阻断小鼠膈神经膈肌标本神经肌肉接头传递 ,脑室及硬膜外注射毒素能使小鼠瘫软。同源性搜索表明该毒素与蜘蛛Grammostolaspatulata毒素HaTx和蜘蛛Scodragriseipes中的SGTx1毒素有很高的同源性 ,而后两种毒素均为K+
- 潘建义胡卫军梁宋平
- 关键词：捕鸟蛛分离纯化
- 大肠杆菌外膜蛋白OmpW的克隆及在外膜上高表达被引量：4
- 2011年
- 目的:利用表达载体pLLP-OmpA实现大肠杆菌K12外膜蛋白OmpW在外膜上高表达。方法:PCR扩增ompW基因,构建重组表达载体pLLP-OmpA-ompW,然后转化大肠杆菌K12,得到在外膜上高表达的菌株。提取该菌外膜蛋白,利用免疫小鼠制备得到的抗血清进行Western blot分析验证高表达的OmpW是否定位于外膜。结果:成功构建了重组表达载体,经转化后成功筛选到高表达菌株,并经Western blot证实高表达的OmpW定位在外膜上。结论:首次成功获得OmpW在外膜上的高表达,该高表达菌株可为深入研究OmpW在细菌致病机制中的作用及其它功能提供研究基础。
- 邹海杰吴贤斌潘建义赵辅昆
- 关键词：抗血清制备
- 大肠埃希氏菌蛋白质复合物组的鉴定及其与耐药关系的研究
- ＜正＞采用基于2-D native/SDS-PAGE的蛋白质组学方法首次对接近生理条件的E.coli K-12胞浆蛋白进行了较为系统的分析,分别成功地鉴定到24由不同蛋白质组成的异聚体复合物和有关同聚体复合物,其中多数复...
- 潘建义李惠姜冰王保成王三英彭宣宪
- 关键词：大肠埃希氏菌耐药
- 文献传递
- Hainantoxin-Ⅱ的分离纯化及其结构与功能分析(英文)被引量：4
- 2010年
- 从分布于我国海南省的海南捕鸟蛛(Haplopelma hainanum)毒素中,利用阳离子交换色谱和反相高效液相色谱分离得到一种多肽神经毒素,命名为Hainantoxin-Ⅱ(HnTx-Ⅱ)。MALDI-TOF质谱分析表明该多肽毒素相对分子质量为4253.135,其氨基酸序列经Edman降解测序为LFECS VSCEI EKEGN KDCKK KKCKG GWKCK FNMCV KV,其中的6个Cys形成3对二硫键。同源性搜索表明,HnTx-Ⅱ与Huwentoxin-Ⅱ(HwTx-Ⅱ)的同源性高达91%,仅有3个氨基酸残基不同。HwTx-Ⅱ为从虎纹捕鸟蛛中提取的杀虫肽,该多肽具有独特的结构模体。活性分析表明HnTx-Ⅱ与HwTx-Ⅱ具有相似的生物学活性。经腹腔注射HnTx-Ⅱ,美洲蜚蠊可被麻痹,其ED50为16μg/g;而当剂量增加到60μg/g时,可立即杀死美洲蜚蠊,其杀死昆虫活性明显强于HwTx-Ⅱ。此外,HnTx-Ⅱ经脑室注射可杀死小鼠,其LD50为1.41μg/g,该活性却明显低于HwTx-Ⅱ。这两种多肽毒素的结构与功能的差异为进一步阐明多肽毒素的结构与功能之间的关系提供良好的研究模型。
- 潘建义喻志强
- 关键词：神经毒素蜘蛛毒素海南捕鸟蛛
- 大肠埃希氏菌K-12蛋白质复合物组的鉴定分析及重要复合物的功能研究
- 细胞中的蛋白质通常与其他蛋白质相互作用来共同完成生命活动，而蛋白质相互作用几乎参与了所有的生物进程，因此只有对细胞内所有蛋白质的相互作用组或蛋白质复合物组进行全面、深入的研究，并进而建立蛋白质间相互作用关系网络，才能真正...
- 潘建义
- 关键词：大肠埃希氏菌蛋白质复合物细菌感染感染性疾病巴洛沙星头孢曲松
- 文献传递
- 巨噬细胞应激的铜绿假单胞菌磷酸化蛋白质组分析
- Phosphorylation of proteins on serine, threonine and tyrosine residues has been widely accepted as major post-...
- 王长一潘建义赵辅昆
- 关键词：PSEUDOMONASAERUGINOSAMACROPHAGEPHOSPHORYLATIONPHOSPHOPROTEOME
- 一株来至于海南红树林的海洋放线菌新种Agromycessediminis sp. nov. Q-14T的分离与多相分类学鉴定
- 目的：研究海南红树林样品中放线菌的分离方法及放线菌新种Agromyces sediminis sp.nov.Q-14T 的多相分类学鉴定.方法：(1)放线菌菌株分离方法：取适量红树林土样、泥样置于平板,55℃干燥4h,烘...
- 孙聪黄萌萌潘建义吕正兵盛清梁宗锁
- 关键词：放线菌红树林
- 副溶血弧菌免疫原性蛋白的鉴定及克隆表达被引量：1
- 2013年
- 运用蛋白质组学及免疫学技术筛选和鉴定副溶血弧菌的外膜蛋白中具有较好免疫原性的外膜蛋白,为防治副溶血弧菌类疾病的亚单位疫苗的研发奠定基础。用灭活的副溶血弧菌免疫ICR小鼠制备抗血清;通过对外膜蛋白进行SDS-PAGE和Western Blot分析筛选免疫原性蛋白,经MALDI-TOF/TOF-MS质谱分析,对免疫原性蛋白进行鉴定。克隆表达免疫原性蛋白VP0802,并对该蛋白的表达条件进行优化,最后纯化蛋白VP0802,并免疫小鼠获得抗血清,通过Western Blot验证蛋白VP0802的免疫原性。结果:免疫小鼠所得到的抗血清效价为1∶5 000;经免疫印迹分析确定了12种外膜蛋白具有较好免疫原性,其中10种外膜蛋白经质谱分析得到鉴定,分别为LPS-assembly protein,VP0802,Maltoporin,Chitoporin,OmpC,OmpA,OmpU,OmpK,VP1243和VP0966。成功构建免疫原性蛋白VP0802的高表达菌株;该菌株在低温低转速的条件下诱导,目的蛋白仍以包涵体形式存在,在37℃,220r/min,IPTG终浓度为1mmol/L的条件下诱导,目的蛋白表达量较高,纯化得到蛋白VP0802并验证了该蛋白的免疫原性。表明在副溶血弧菌的外膜蛋白中存在多种与免疫原性相关的蛋白,且部分蛋白为首次发现具有免疫原性。
- 田丽花叶智鸧温良优潘建义赵辅昆
- 关键词：副溶血弧菌外膜蛋白免疫原性
