史淑贤
- 作品数：11 被引量：10H指数：2
- 供职机构：南通大学公共卫生学院江苏省神经再生重点实验室更多>>
- 发文基金：江苏省高校自然科学研究项目江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大鼠坐骨神经夹伤后SSeCKS的表达变化被引量：3
- 2007年
- 为了探讨大鼠坐骨神经夹伤后SSeCKS(Src抑制的蛋白激酶C底物)在神经中的表达变化及其意义,本研究制备了成年SD大鼠坐骨神经夹伤模型,通过Western blotting和免疫组织化学方法检测坐骨神经夹伤后SSeCKS表达的时空变化。Western blotting结果显示:大鼠坐骨神经夹伤后,SSeCKS的表达迅速升高,伤后6h即达到高峰,之后逐渐下降。免疫组织化学染色结果表明SSeCKS在神经夹伤两端高表达,以近端明显,呈簇状聚集。夹伤远端表达较近端稍低。远离夹伤处及相应对侧,SSeCKS的表达水平有所下降且分布较为均一。免疫荧光组织化学双标记结果显示:夹伤两端SSeCKS与S100和NF200的共存不明显,但可见部分SSeCKS与GAP43双标纤维。本研究提示大鼠坐骨神经夹伤可引起SSeCKS的表达变化,该变化可能参与周围神经损伤后某些伤害性刺激信号分子的转导并与损伤后神经的再生及功能修复有关。
- 陈莉秦婧沈爱国刘海鸥牛淑琼高尚峰史淑贤
- 关键词：SSECKS免疫组织化学WESTERNBLOTTING
- 突触后密度蛋白-95在大鼠坐骨神经损伤后的表达被引量：1
- 2007年
- 为了探讨突触后密度蛋白-95(PSD-95)在周围神经损伤过程中的表达变化,本实验建立大鼠坐骨神经夹伤模型,采用荧光定量PCR(real-timePCR)和Western blotting对PSD-95 mRNA及其蛋白水平进行定量检测,应用免疫荧光双标技术观察PSD-95与神经型一氧化氮合酶(nNOS)的共定位情况。结果显示,PSD-95 mRNA及其蛋白在正常坐骨神经中度表达,损伤后迅速下降;PSD-95 mRNA从损伤后2d开始表达上调;而其蛋白水平于损伤后1周明显升高。免疫荧光双标染色证实在坐骨神经损伤后1周PSD-95与nNOS共定位于Schwann细胞上,而与神经丝蛋白NF-200共定位不明显。本研究结果提示PSD-95通过nNOS参与了周围神经损伤修复过程。
- 高尚锋程纯陈梦玲史淑贤秦婧沈爱国
- 关键词：坐骨神经神经型一氧化氮合酶NMDA受体
- p27kipl和Skp2与周围神经损伤和再生的相关性研究
- 周围神经损伤是指因某些因素造成神经传导功能障碍、神经轴索中断或神经断裂,导致躯干和四肢感觉、运动、交感功能障碍的一类临床病症,它严重影响患者的劳动力和生活质量。损伤后的再生修复问题一直是创伤外科和神经科学关注的重点之一。...
- 史淑贤沈爱国
- 关键词：P27KIP1SKP2坐骨神经
- 文献传递
- 大鼠坐骨神经切断后Src抑制的蛋白激酶C的底物的表达变化
- 2007年
- 目的探讨大鼠坐骨神经切断后,Src抑制的蛋白激酶C的底物(SSeCKS)在神经中的表达变化及其意义。方法制备成年SD大鼠坐骨神经切断模型。通过Western blotting和免疫组织化学方法检测坐骨神经切断后SSeCKS表达的时空变化。结果Western blotting显示,大鼠坐骨神经切断后,近端SSeCKS的表达逐步升高,伤后2d达到高峰,之后逐渐下降。远端SSeCKS表达于12h达到高峰,之后呈下降趋势。免疫组织化学方法结果表明,SSeCKS在神经断端处高表达,成簇状聚集;在远离断端处表达明显降低,分布亦较为均一。免疫荧光双标记结果显示,SSeCKS与S100、NF200及GAP43有部分共定位。结论大鼠坐骨神经切断后,可以引起SSeCKS的表达变化,其可能参与周围神经损伤后某些伤害性刺激信号分子的转导,并与损伤后神经的再生及功能修复有关。
- 沈爱国秦婧陈莉刘海鸥牛淑琼高尚锋史淑贤
- 关键词：坐骨神经切断免疫组织化学免疫印迹法
- NIDD基因TaqMan探针的制备及其在实时荧光定量PCR方法中的应用被引量：2
- 2006年
- 目的:制备NIDD基因TaqM an探针建立检测NIDD基因荧光定量PCR(FQ-PCR),以进一步研究NIDD的表达情况。方法:采用RT-PCR法,从出生后一天的SD大鼠脑组织mRNA中扩增NIDD基因的部分编码序列区(CDS)片段,克隆入pGEM-T载体,筛选阳性克隆、酶切鉴定及序列测定。采用TaqM an探针,以重组质粒为模板绘制标准曲线。结果:RT-PCR法扩增出一特异产物与预期长度112 bp相符,DNA序列测序的结果与GeneBank提供的已知序列(AB098078)比较,所克隆的NIDD基因片段与其中的112 bp完全相同,与NIDD基因100%同源。以重组质粒为模板绘制标准曲线,相关系数r大于0.99,反应效率显示为1,各点变异系数小于10%。结论:采用RT-PCR和T载体技术成功制备出可应用于FQ-PCR的NIDD基因TaqM an探针。
- 沈勤陈梦玲沈爱国严美娟史淑贤程纯
- 关键词：实时荧光定量PCRTAQMAN探针
- 神经型一氧化氮合酶相关分子NIDD mRNA在周围神经损伤后的表达变化
- 2007年
- 目的探讨正常及损伤的周围神经中神经型一氧化氮合酶(nNOS)相关分子(NIDD)的表达定位与变化。方法在利用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)研究大鼠坐骨神经损伤对nNOS及其相关分子NIDD mRNA表达变化的基础上,通过原位杂交与间接免疫荧光相结合的方法进一步研究其表达定位情况。结果nNOS及NIDD mRNA主要分布在正常和损伤坐骨神经的施万细胞(SCs)中,损伤后表达增多,分别在神经夹伤后2周以及切断后1周的近、远侧断端中出现表达高峰。原代培养的SCs中也检测到nNOS及NIDD,其mRNA分布在核周细胞质区域。结论周围神经损伤对nNOS相关分子NIDD的表达有影响,SCs表达NIDD可能参与神经损伤后再生修复机制。
- 陈梦玲程纯严美娟史淑贤沈爱国
- 关键词：一氧化氮合酶坐骨神经施万细胞原位杂交实时荧光定量聚合酶链反应
- p27^(kip1)和Skp2在大鼠坐骨神经夹伤后脊髓中的表达变化被引量：1
- 2007年
- 目的:研究p27^(kip1)和Skp2在正常和坐骨神经夹伤后大鼠脊髓中的表达变化。方法:Westem印迹法,免疫组织化学,免疫荧光双标。结果:Western印迹结果显示坐骨神经夹伤后,脊髓中p27^(kip1)表达下降后又有所恢复,并且p27^(kip1)和Skp2在脊髓中的表达变化呈负相关。免疫组织化学及免疫荧光双标显示,p27^(kip1)和Skp2在正常和损伤后的脊髓神经元和胶质细胞中都有表达。坐骨神经夹伤后p27^(kip1)和Skp2在脊髓腹角阳性细胞数目变化呈负相关。结论:坐骨神经损伤后p27^(kip1)。和Skp2在脊髓腹角神经元及其周围的胶质细胞表达变化相关,对研究脊髓损伤和修复的分子机制有重要意义。
- 史淑贤程纯陈梦玲秦婧高尚锋沈爱国
- 关键词：P27KIP1SKP2脊髓坐骨神经
- p27kip1和Skp2与周围神经损伤和再生的相关性研究
- 周围神经损伤是指因某些因素造成神经传导功能障碍、神经轴索中断或神经断裂，导致躯干和四肢感觉、运动、交感功能障碍的一类临床病症，它严重影响患者的劳动力和生活质量。损伤后的再生修复问题一直是创伤外科和神经科学关注的重点之一。...
- 史淑贤沈爱国
- 关键词：P27KIP1SKP2坐骨神经
- p27^(kip1)和Skp2在大鼠坐骨神经切断后脊髓中的表达被引量：1
- 2007年
- 目的观察坐骨神经切断后大鼠脊髓中p27^(kip1)和Skp2的表达变化。方法将成年SD大鼠随机分为正常对照组和实验组。对实验组实行坐骨神经切断术。用Western blot和免疫组织化学技术检测脊髓中p27^(kip1)和Skp2的表达变化。结果Western blot结果表明坐骨神经切断后脊髓中p27^(kip1)表达持续下降,Skp2表达上调。免疫组织化学结合免疫荧光双标技术显示,在正常组和实验组,p27^(kip1)和Skp2在脊髓神经元和胶质细胞均有表达。在腹角神经元,损伤后p27^(kip1)免疫染色减弱,Skp2增强。坐骨神经损伤前后脊髓腹角p27^(kip1)和Skp2阳性细胞数目改变呈负相关(r= -0.6892,P<0.01)。结论坐骨神经损伤可影响脊髓中p27^(kip1)和Skp2的表达水平及亚细胞定位,两者改变呈负相关。
- 赵剑史淑贤程纯陈梦玲秦婧高尚锋沈爱国
- 关键词：P27^KIP1SKP2坐骨神经损伤脊髓
- p27^(kip1)和Skp2在损伤后大鼠坐骨神经中的表达变化被引量：3
- 2007年
- 为了探讨损伤后周围神经p27kip1和S期激酶相关蛋白2(Skp2)的定位表达和变化,本实验将成年SD大鼠随机分为正常对照组、夹伤组和切断组,运用Western blot结合免疫组织化学及免疫荧光双标,在大鼠坐骨神经损伤时,对p27kip1和Skp2表达的影响进行了研究。结果表明:(1)坐骨神经夹伤后,p27kip1蛋白表达先逐渐下降,后又逐渐上升;坐骨神经切断后,远侧段p27kip1蛋白表达持续下降,而近侧段p27kip1蛋白表达在切断后6h明显下降,后又逐渐升高至正常水平,而Skp2表达变化与之相反;(2)免疫组织化学染色结果显示,坐骨神经切断后1w,远侧段从断端到末端,p27kip1阳性信号逐渐增加,而Skp2阳性信号逐渐减弱;(3)免疫荧光双标显示,正常和损伤坐骨神经的雪旺氏细胞中都有p27kip1和Skp2表达。以上结果提示:周围神经损伤后影响雪旺氏细胞中p27kip1和Skp2的表达变化,为进一步研究它们在周围神经损伤和修复中的作用机制奠定基础。
- 史淑贤程纯陈梦玲秦婧高尚锋沈爱国
- 关键词：P27^KIP1SKP2雪旺氏细胞坐骨神经BLOT
