陈娜云 作品数:10 被引量:44 H指数:4 供职机构: 中国人民解放军第九七医院 更多>> 发文基金: 南京军区医学科技创新课题 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
病毒灭活血浆对人γδT细胞功能影响的实验研究 被引量:2 2012年 目的探讨病毒灭活血浆对人γδT细胞生长和功能的影响。方法取人外周血γδT细胞,用异戊烯焦磷酸法体外扩增。用10%病毒灭活血浆和10%新鲜冰冻血浆分别培养γδT细胞,分别检测培养前、培养5d和10d后的扩增倍数;用流式细胞术分别检测培养10d后的γδT细胞表面标记,即颗粒酶B、穿孔素和CD107a的表达等。结果 10%新鲜冰冻血浆和10%病毒灭活血浆对人γδT细胞培养10d时,由扩增前的3.12%增加到80.46%和81.18%,5d和10 d的细胞增殖倍数分别为11.65±2.11、38.21±1.57和11.77±2.13、37.11±1.81,CD107a、穿孔素、颗粒酶B含量表达分别为90.54%±1.99%、23.47%±3.18%、35.47%±2.42%和90.22%±2.21%、22.58%±3.41%、34.63%±2.22%,两组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论病毒灭活血浆在一定浓度下对人γδT细胞生长、增殖,颗粒酶B、穿孔素和CD107a的表达与新鲜冰冻血浆无明显差异。 姚仁南 陈玲 陈娜云 刘军权 周忠海 陈复兴 孙阳关键词:ΓΔT细胞 病毒灭活血浆 新鲜冰冻血浆 梅毒螺旋体明胶凝集试验对酶联免疫吸附试验法和金标法梅毒抗体检测的结果评价 被引量:12 2016年 目的应用梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)法对ELISA法和胶体金法梅毒血清学检测试剂的临床适用性进行评价。方法收集6 291例临床手术前或输血前住院患者的血清标本,采用ELISA法(试剂A、试剂B)和金标法分别进行初筛检测,初筛阳性或弱阳性标本用TPPA法做确证试验。结果血清标本6 291份中,试剂A、试剂B、金标法检测阳性分别为66、64、56份,金标法阳性检出率与试剂A、B比较,差异无统计学意义(P>0.05)。阳性标本经TPPA确证为66份,其中试剂A、试剂B阳性均为61份,金标法为56份。试剂A检测为阳性的5份标本及试剂B检测为阳性的3份标本,经TPPA确证为阳性的分别为3、2份,金标法灵敏度与试剂A、B比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ELISA法灵敏度高,易实现自动化酶联免疫分析,适合临床手术前或输血前患者标本的筛查,金标法灵敏度低,但特异度高,方法简捷,适用于大规模健康体检及急诊手术前的初筛试验。为避免医疗纠纷,对ELISA法和金标法阳性的标本应用TPPA法来确诊。 张赞 陈娜云 孙阳 姚仁南关键词:梅毒 梅毒螺旋体明胶凝集试验 酶联免疫吸附试验 胶体金法 核酸扩增及微流芯片技术在献血者HCV筛查中的应用 被引量:3 2011年 目的应用核酸扩增和微流芯片分析方法,用于献血者血液标本丙型肝炎病毒(HCV)的检测。方法选取80份疑似HCV感染的血液标本,分别采用2种ELISA法、胶体金法、化学发光免疫分析(CLIA)法和核酸扩增后微流芯片法分析。结果经过核酸扩增的HCV阳性血液经分析后皆出现预期大小片段的特异性条带,而阴性血液缺少相应的条带。特异性巢式PCR扩增及微流芯片法检测的阳性率与CLIA法差异无统计学意义(P>0.05),与ELISA法和胶体金法差异有统计学意义(P<0.01)。结论特异性巢式PCR扩增及微流芯片法结果稳定、准确,灵敏度高于ELISA法,可用于血液筛查。 姚仁南 姚根宏 栾建凤 陈复兴 陈玲 陈娜云关键词:化学发光测定法 酶联免疫吸附测定 核酸扩增及微流芯片法检测HCV-Ab临界值附近标本的结果探讨 被引量:3 2016年 目的对于用ELISA法检测HCV-Ab结果在临界值周围的可疑标本,用核酸扩增及微流芯片法进一步检测,以探讨不同方法丙型肝炎病毒(HCV)的检出率及其感染的危险性。方法收集住院患者中经2种不同的HCV-Ab ELISA法试剂1或试剂2检测结果 S/CO≥0.4至<1.0的血清标本24份,其金标试纸条法检测均为阴性,分别用核酸扩增及微流芯片法和化学发光免疫分析(CLIA)测HCV-Ab法进行检测。结果 24份用ELISA法检测S/CO值处于临界值的标本,经核酸扩增及微流芯片法检测阳性16份(阳性率66.67%),CLIA测HCV-Ab法检测阳性16份(阳性率66.67%),HCV-Ab ELISA法试剂1阳性6份(阳性率25.00%),试剂2阳性10份(阳性率41.67%)。核酸扩增及微流芯片分析法与ELISA法试剂1检测结果进行比较,阳性率差异有统计学意义(P<0.01),与ELISA法试剂2检测结果进行比较,阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。结论核酸扩增及微流芯片分析法对HCV的检出率高于ELISA法和金标试纸条法,因此,对ELISA法检测HCV-Ab结果在临界值周围的可疑标本,可能存在感染性,应对这些可疑标本做进一步的检测,可选择性的应用核酸扩增及微流芯片分析法和化学发光免疫分析(CLIA)法等方法联合进行检测,以提高检测结果的准确性,以防误检和漏检。 陈娜云 姚仁南 马继慧关键词:丙型肝炎病毒 CLIA法 病毒灭活血浆对人CIK细胞功能影响的体外实验研究 被引量:4 2012年 目的利用CIK细胞(细胞因子诱导的杀伤细胞)来研究亚甲蓝光化学法病毒灭活血浆是否会对免疫细胞产生影响。方法对10名健康献血者外周血单个核细胞分别采用病毒灭活血浆和新鲜冰冻血浆培养人CIK细胞,观察2组培养体系中CIK细胞的扩增情况;用流式细胞仪(FCM)检测CIK细胞CD3+CD56+表达;检测经白藜芦醇终浓度为0.8μmol/L诱导48 h后的CIK细胞穿孔素和颗粒酶B的含量变化;以及用乳酸脱氢酶法测定CIK细胞杀伤SGC-7901细胞活性。结果新鲜冰冻血浆与病毒灭活血浆比较培养5、10、15 d CIK细胞的增殖倍数,分别为17.62±1.88、26.31±1.95、46.05±2.86与18.10±1.73、25.97±1.55、45.82±1.15,CD3+CD56+的表达分别为(12.37±1.38)%、(17.39±2.81)%、(24.3±1.72)%与(11.46±1.35)%、(18.36±1.96)%、(24.08±2.21)%,在促进CIK细胞的增殖以及CD3+CD56+的表达上,2组无统计学意义(P>0.05);经白藜芦醇终浓度为0.8μmol/L诱导培养48 h后,新鲜冰冻血浆与病毒灭活血浆培养的CIK细胞穿孔素、颗粒酶B、杀伤活性分别为(37.17±1.95)%、(38.79±1.91)%、(46.05±2.86)%和(32.04±1.92)%、(33.50±1.17)%、(45.82±1.15)%,2组无统计学意义(P>0.05)。结论病毒灭活血浆对人CIK细胞的增殖、细胞穿孔素和颗粒酶B含量变化以及体外杀伤功能均无明显影响。 姚仁南 陈玲 刘军权 周忠海 陈娜云 陈复兴关键词:病毒灭活血浆 新鲜冰冻血浆 CIK细胞 增殖 杀伤功能 抗-HCV ELISA法检测结果在临界值附近的风险探讨 被引量:2 2011年 目的应用化学发光免疫分析(CLIA)法,检测抗-HCV ELISA法结果在临界值附近(0.4≤S/CO<1)的血清标本,探讨HCV感染的风险性。方法笔者对19份抗-HCV ELISA法检测结果在临界值附近,胶体金法均阴性的血液标本,分别经抗-HCV ELISA法试剂①、试剂②、胶体金法和CLIA法试剂进行了检测。结果 HCV-CLIA法阳性16份、ELISA法试剂①和试剂②分别阳性5份9份,胶体金法阳性0份。CLIA法与ELISA法和胶体金法比较检出率灵敏度显著高于ELISA法(P<0.05或P<0.01)和胶体金法(P<0.01)。结论抗-HCV ELISA法检测结果在临界值附近的血液标本存在HCV感染的可能,尤其是献血者标本存在感染受血者的风险。对可疑标本应更进一步的应用丙型病毒性肝炎核心抗原检测法、CLIA法、核酸扩增和微流芯片法或RNA RT-PCR荧光定量法进行检测,以保证结果的准确性。 姚仁南 孙阳 陈玲 陈娜云 朱月华 王连友关键词:胶体金法 驻徐州部队2005~2014年无偿献血者血液检测结果分析 2016年 目的调查2005~2014年驻徐州部队29 565人次无偿献血者血液检测的情况。方法对29 565人次无偿献血者丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)、人类免疫缺陷病毒抗体(抗-HIV)1/2和梅毒螺旋体抗体(抗-TP)5项指标的检验结果进行回顾性统计分析。结果 29 565人次献血者中检测阳性380人(1.29%),其中ALT阳性213人(0.72%),HBsAg阳性44人(0.15%),抗-HCV阳性110人(0.37%),抗-TP阳性13人(0.04%),未检出HIV阳性者。从动态观察看,2005~2014年ALT、HBsAg具有逐年下降趋势,抗-HCV具有上升趋势。结论驻徐州部队无偿献血者血液检测阳性的最主要原因为ALT异常,其次为抗-HCV异常。建议在新兵入伍前增加抗-HCV检测。 陈娜云 姚仁南关键词:供血者 血液化学分析 27779例患者输血治疗前血液传染性指标检测结果分析 被引量:16 2012年 目的了解住院患者输血治疗前血液传染性指标乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、抗丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)、抗人类免疫缺陷病毒抗体(抗-HIV)、抗梅毒螺旋体抗体(抗-TP)的阳性率。方法采用ELISA对2008~2010年于该院接受输血治疗的27779例住院患者进行HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP初筛;初筛阳性标本进行确证检测,HBsAg、抗-HCV检测采用荧光定量聚合酶链反应,抗-TP检测采用梅毒螺旋体颗粒明胶凝集试验,抗-HIV阳性标本送艾滋病检测确证实验室进行确证检测。结果 27779例患者HBsAg、抗-HCV、抗-TP、抗-HIV确证阳性率分别为6.88%(1910/27779)、0.72%(199/27779)、1.04%(290/27779)、0.03%(8/27779)。结论在输血治疗前对患者进行血液传染性指标的检测,有利于避免医疗纠纷,也有利于加强医护人员的自我防护,避免医源性污染。 姚仁南 陈玲 陈娜云 朱月华 孙飞 孙阳关键词:输血 传染性指标 梅毒 HIV 应用化学发光免疫分析法检测HCV抗体与其他方法的比较 被引量:4 2011年 目的比较化学发光免疫分析(CLIA)法、酶联免疫吸附试验(ELISA)法、胶体金法检测丙型肝炎病毒(HCV)抗体的效果。方法对80份疑似HCV感染的血清标本,分别采用CLIA法、ELISA法试剂1、试剂2和胶体金法检测。结果 CLIA法、ELISA法(试剂1、试剂2)和胶体金法检测阳性率分别为91.25%、80.63%(试剂182.50%、试剂278.75%)和56.25%。结论 CLIA法检出灵敏度显著高于ELISA法和胶体金法。 姚仁南 陈复兴 陈玲 蔡信海 王永方 陈娜云 赵飞关键词:化学发光免疫分析法 酶联免疫吸附试验 胶体金法 云芝多糖增强人NK细胞杀伤功能的体外研究 被引量:1 2017年 目的探讨云芝多糖(PSK)对体外培养的人自然杀伤(NK)细胞杀伤功能的影响。方法采集健康成年人外周血,分离单个核细胞(PBMC),加入含白细胞介素(IL)-2的NK细胞培养液。培养第10天时加入不同质量浓度(100、75、50、25、10、5μg/m L)的PSK诱导NK细胞48 h,收集细胞检测。用CCK-8法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测诱导前后NK细胞穿孔素、颗粒酶B、CD107a及NKG2D受体表达(PSK诱导为实验组,同时设不加药物及无细胞的空白对照孔为对照组)。通过CCK-8法检测对红白血病细胞株K562细胞的杀伤活性:取质量浓度25μg/m L PSK诱导48 h后NK细胞,调整细胞浓度至1×10~9/L作为效应细胞;调整红白血病肿瘤细胞株K562细胞浓度至5×10~7/L,按效靶比为5∶1、10∶1、20∶1、40∶1、80∶1的比例混合培养于96孔板内,同时设单独效应细胞孔、单独靶细胞孔(实验组)和空白孔(对照组)。结果培养10 d后NK细胞纯度达到78.70%左右。经PSK诱导48 h后,NK细胞的增殖及功能具有一定浓度依赖性,PSK质量浓度在25μg/m L对NK细胞的增殖率(51.62%±3.20%)最为明显(P<0.01),之后逐渐下降。在质量浓度0~100μg/m L可以促进NK细胞的生长和增加NK细胞表面穿孔素、颗粒酶B、CD107a和NKG2D受体表达,以及增强对红白血病细胞株K562细胞的杀伤活性;尤其是当PSK质量浓度为25μg/m L时,颗粒酶B、穿孔素、NKG2D和CD107a表达为55.42%±2.34%、70.49%±1.87%、83.45%±1.77%和85.00%±2.02%,显著高于对照组(25.83%±1.31%、40.79%±1.59%、70.66%±2.39%和72.79%±2.31%)(P<0.01)。在效靶比80∶1时,实验组杀伤活性为57.63%±3.42%,高于对照组(24.78%±2.47%)(P<0.01)。结论 PSK在一定质量浓度下能促进NK细胞的生长,且增强NK细胞的杀伤功能。 孙飞 陶正中 周忠海 吕小婷 陈娜云 陈玲 姚仁南关键词:云芝多糖 NK细胞 细胞增殖 杀伤功能