王巍敏 作品数:4 被引量:20 H指数:2 供职机构: 中国农业科学院油料作物研究所农业部油料作物生物学重点开放实验室 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 湖北省科技攻关计划 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
油菜野芥NSa细胞质雄性不育系的特异性分子鉴定 被引量:10 2008年 常规细胞质类型鉴定方法花费时间长、工作量大、鉴定效率低、应用性较差。基于基因组重复序列的PCR技术(rep-PCR)在重复序列丰富的线粒体和原核生物的基因组鉴定中效果较好,本研究对8份油菜资源的细胞质进行分子鉴定,结果表明rep-PCR可以明确区分甘蓝型油菜中常见的6种雄性不育细胞质。同时对甘蓝型油菜和野芥(Sinapis arvensis)体细胞杂交创建的、育性较为稳定的NSa野芥雄性不育胞质进行了分子特异性鉴定,获得了2条NSa不育胞质的特征DNA条带。但波里马和萝卜质不育细胞质的特异性引物在NSa中不能扩增出特异性片段,说明NSa不属于这2种细胞质类型。本研究结果为该不育胞质系统的利用和知识产权保护提供了理论依据和技术支撑。 程计华 李云昌 胡琼 梅德圣 李英德 徐育松 王巍敏关键词:油菜 植物细胞质雄性不育基因的鉴定及育性调控机理 2008年 细胞质雄性不育(cytoplasmic male sterility,CMS)是作物杂交种生产的主要授粉控制系统,研究细胞质雄性不育分子基础及调控机理对利用杂种优势提高作物产量具有重要的指导意义。本文从植物的线粒体基因与细胞质雄性不育的关系着手,列举了植物CMS基因的鉴定情况,重点介绍了研究较多的矮牵牛、玉米、水稻和油菜细胞质雄性不育基因的鉴定进展及其对不育性状的调控。同时根据恢复基因与不育基因的相互作用情况阐述了育性恢复的可能机理,并对植物CMS分子机理的研究前景进行了展望。 王巍敏 李云昌 胡琼 梅德圣 程计华关键词:植物雄性不育 线粒体基因 恢复基因 甘蓝型油菜NSa雄性不育细胞质的分子鉴定 植物细胞质雄性不育是指植株的雄性生殖系统不能正常发育产生有功能的花粉,而其雌性生殖系统生长完全正常的一种母性遗传现象。细胞质雄性不育(CMS)是油菜杂交种生产中最有利用价值的授粉控制系统。但使用单一的细胞质类型在生产中势... 王巍敏关键词:油菜 甘蓝型油菜 雄性不育 细胞质 分子鉴定 文献传递 油菜高纯度线粒体DNA的高效提取及检测 被引量:10 2008年 为了建立一种快速、有效的油菜线粒体DNA(mtDNA)提取方法,以30℃黑暗条件下培养的油菜黄化苗为材料,通过差速离心结合蔗糖缓冲液洗涤和垫衬,利用50-250g材料分离线粒体,经SDS裂解后抽提纯化,可从每10g黄化苗中得到1μg以上的mtDNA。所获得的mtDNA经琼脂糖凝胶电泳检测发现仅有一条大小在10kb以上的条带,没有明显的降解现象,完整性良好,适用于PCR等常用分子生物学实验。利用细胞核基因的特异性引物进行PCR检测,证实没有核基因组的污染。与密度梯度离心法提取mtDNA相比,该方法具有对设备要求低、提取效率高、纯度好等优点,是进行线粒体基因组及其控制的重要性状分子生物学研究的关键基础技术。 王巍敏 李云昌 胡琼 程计华 梅德圣 郝建轶关键词:油菜 线粒体DNA