公共文化服务平台

油菜高纯度线粒体DNA的高效提取及检测被引量：10: 2008年; 为了建立一种快速、有效的油菜线粒体DNA(mtDNA)提取方法,以30℃黑暗条件下培养的油菜黄化苗为材料,通过差速离心结合蔗糖缓冲液洗涤和垫衬,利用50-250g材料分离线粒体,经SDS裂解后抽提纯化,可从每10g黄化苗中得到1μg以上的mtDNA。所获得的mtDNA经琼脂糖凝胶电泳检测发现仅有一条大小在10kb以上的条带,没有明显的降解现象,完整性良好,适用于PCR等常用分子生物学实验。利用细胞核基因的特异性引物进行PCR检测,证实没有核基因组的污染。与密度梯度离心法提取mtDNA相比,该方法具有对设备要求低、提取效率高、纯度好等优点,是进行线粒体基因组及其控制的重要性状分子生物学研究的关键基础技术。; 王巍敏李云昌胡琼程计华梅德圣郝建轶; 关键词：油菜线粒体DNA

基于海甘蓝RNA-Seq序列开发EST-SSR分子标记被引量：7: 2014年; 利用油料作物海甘蓝(十字花科)发育时期种子的RNA-Seq测序数据组装获得186 778条cDNA重叠群(Contigs)序列,通过MISA和Primer 3程序设计了6 639个EST-SSR分子标记。在这些标记中,除了单核苷酸重复(45%)外,三核苷酸重复的SSR是最常见的碱基重复类型(29%),其次是双核苷酸型(10%)、五核苷酸型(7%)、六核苷酸型(5%)和四核苷酸型(2%)型。采用电子定位的方法将1 206个EST-SSR标记定位到近缘种白菜(Brassica napa)的基因组上。依据引物在白菜基因组中的分布,挑选了20条EST-SSR引物在海甘蓝中进行PCR验证,其结果显示所有引物均能够扩增出符合预期大小的PCR片段。这些新开发的EST-SSR引物可以作为功能标记应用于海甘蓝的分类鉴定、遗传图谱构建、种质资源鉴定以及分子标记辅助育种工作中。; 戚维聪程计华黄邦全李坦林峰; 关键词：海甘蓝分子标记

油菜野芥NSa细胞质雄性不育系的特异性分子鉴定被引量：10: 2008年; 常规细胞质类型鉴定方法花费时间长、工作量大、鉴定效率低、应用性较差。基于基因组重复序列的PCR技术(rep-PCR)在重复序列丰富的线粒体和原核生物的基因组鉴定中效果较好,本研究对8份油菜资源的细胞质进行分子鉴定,结果表明rep-PCR可以明确区分甘蓝型油菜中常见的6种雄性不育细胞质。同时对甘蓝型油菜和野芥(Sinapis arvensis)体细胞杂交创建的、育性较为稳定的NSa野芥雄性不育胞质进行了分子特异性鉴定,获得了2条NSa不育胞质的特征DNA条带。但波里马和萝卜质不育细胞质的特异性引物在NSa中不能扩增出特异性片段,说明NSa不属于这2种细胞质类型。本研究结果为该不育胞质系统的利用和知识产权保护提供了理论依据和技术支撑。; 程计华李云昌胡琼梅德圣李英德徐育松王巍敏; 关键词：油菜

几种农作物细胞质雄性不育恢复基因的定位和分子标记研究进展被引量：17: 2006年; 利用杂种优势提高作物产量时,生产杂交种的主要授粉控制系统是细胞质雄性不育及其恢复系统。在杂交品种的选育过程中,优良恢复系选育至关重要。为了高效并准确地鉴定选择恢复材料,同时更深入地研究恢复基因的作用机理,近年来植物细胞质雄性不育恢复基因分子标记研究受到了广泛重视。本文综述了主要农作物水稻、油菜、小麦、棉花和玉米等细胞质雄性不育类型恢复基因的定位和分子标记研究进展,并讨论了恢复基因的精确定位和分子标记鉴定在基因克隆和分子标记辅助选择育种中的意义和应用前景。; 程计华李云昌梅德圣胡琼; 关键词：细胞质雄性不育系恢复基因基因定位分子标记辅助选择杂种优势

油菜NSa雄性不育细胞质的分子鉴定及恢复系筛选: 本文为了进一步鉴别并明确油菜NSa雄性不育细胞质育种应用价值，试图从分子水平上鉴定NSa细胞质的特异性，并通过广泛筛选，鉴定恢复系，获得了以下几个方面的研究进展： 1.利用特异引物扩增的结果表明NSa不育胞质与...; 程计华; 关键词：油菜 NSA 细胞质雄性不育原生质体融合; 文献传递

植物细胞质雄性不育基因的鉴定及育性调控机理: 2008年; 细胞质雄性不育(cytoplasmic male sterility,CMS)是作物杂交种生产的主要授粉控制系统,研究细胞质雄性不育分子基础及调控机理对利用杂种优势提高作物产量具有重要的指导意义。本文从植物的线粒体基因与细胞质雄性不育的关系着手,列举了植物CMS基因的鉴定情况,重点介绍了研究较多的矮牵牛、玉米、水稻和油菜细胞质雄性不育基因的鉴定进展及其对不育性状的调控。同时根据恢复基因与不育基因的相互作用情况阐述了育性恢复的可能机理,并对植物CMS分子机理的研究前景进行了展望。; 王巍敏李云昌胡琼梅德圣程计华; 关键词：植物雄性不育线粒体基因恢复基因

新型膜萃取——气相色谱法测定油菜叶片菌核病侵染过程中茉莉酸甲酯含量的变化: 建立了新型膜萃取——气相色谱法测定油菜叶片中诱导抗性的信号分子茉莉酸甲酯的分析方法，该方法具有操作简单，分析周期短，只需少最有机溶剂，对环境污染小等特点。该方法在MJA浓度为1～1000ng/mL的范围内有较好的线性关系...; 魏芳程计华刘胜毅黄军艳董绪燕陈洪; 关键词：膜萃取茉莉酸甲酯油菜菌核病诱导抗病性; 文献传递

分子标记在油菜杂种优势利用中的研究进展被引量：22: 2008年; 杂种优势是一种普遍存在的生物学现象,是提高作物产量的重要途径,因而受到越来越广泛的重视。分子标记是近年兴起的一种新型的生物技术,国内外已利用RFLP、RAPD、AFLP、SSR、ISSR和SRAP等多种分子标记技术对油菜的杂种优势进行了广泛的研究,取得了很多有价值的研究成果。本文综述了分子标记在油菜授粉控制系统中关键基因标记、亲本遗传多样性分析、杂种优势群划分、杂种纯度鉴定和杂种优势预测中的研究进展。通过对不同作物间的比较,探讨了分子标记在油菜杂种优势利用中的研究深度,并对分子标记在油菜杂种优势预测中应注意的问题进行了讨论。; 谭祖猛李云昌胡琼梅德圣程计华; 关键词：杂种优势分子标记油菜纯度鉴定

油菜角果内乙烯合成与裂角性相互关系的研究: 油菜角果抗裂性的提高有利于降低采收过程中籽粒的散落损失，是特别适合油菜机械收获的优良特性。已有研究表明，植物角果内乙烯的生物合成与角果开裂存在一定的相互关系，本研究分别以一个角果抗裂株系7359和一个易裂株系7661为材...; 程计华魏芳陈军旗董绪燕李云昌胡琼陈洪李光明; 关键词：油菜乙烯; 文献传递

油菜异源细胞质雄性不育系选育的方法: 本发明公开了一种油菜异源细胞质雄性不育系选育的方法，其步骤是：首先是叶肉原生质体的分离；第二是原生质体的纯化；第三是原生质体融合前处理；第四是原生质体融合；第五是原生质体培养；第六是杂种鉴定和繁殖；第七是连续回交替换甘蓝...; 胡琼李云昌梅德圣李英德徐育松方小平刘胜毅程计华; 文献传递

渝B2-20050021-1　渝公网安备 50019002500403号　违法和不良信息举报中心　互联网出版许可证　新出网证(渝)字10号

程计华