郝建轶
- 作品数：4 被引量：14H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院油料作物研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 油菜高纯度线粒体DNA的高效提取及检测被引量：10
- 2008年
- 为了建立一种快速、有效的油菜线粒体DNA(mtDNA)提取方法,以30℃黑暗条件下培养的油菜黄化苗为材料,通过差速离心结合蔗糖缓冲液洗涤和垫衬,利用50-250g材料分离线粒体,经SDS裂解后抽提纯化,可从每10g黄化苗中得到1μg以上的mtDNA。所获得的mtDNA经琼脂糖凝胶电泳检测发现仅有一条大小在10kb以上的条带,没有明显的降解现象,完整性良好,适用于PCR等常用分子生物学实验。利用细胞核基因的特异性引物进行PCR检测,证实没有核基因组的污染。与密度梯度离心法提取mtDNA相比,该方法具有对设备要求低、提取效率高、纯度好等优点,是进行线粒体基因组及其控制的重要性状分子生物学研究的关键基础技术。
- 王巍敏李云昌胡琼程计华梅德圣郝建轶
- 关键词：油菜线粒体DNA
- 一种油菜雄性不育恢复基因分子标记的制备方法及应用
- 本发明公开了一种油菜雄性不育恢复基因分子标记的制备方法及应用，步骤是：A、根据PPR基因保守氨基酸位点设计兼并引物；B、用CTAB法抽取油菜细胞质雄性不育恢复系的叶片DNA，采用降落PCR扩增出特异的恢复基因候选片断；C...
- 胡琼李云昌郝建轶梅德圣付丽李英德徐育松
- 文献传递
- 油菜野芥细胞质雄性不育恢复基因候选片段的克隆被引量：4
- 2011年
- 根据植物细胞质雄性不育恢复基因编码的PPR(pentatricopeptide repeat)蛋白的特点,结合拟南芥PPR基因簇相似序列,扩增油菜野芥细胞质雄性不育(Nsa CMS)基因组DNA,筛选出一对简并引物,在Nsa不育系育性恢复后的可育材料和野芥亲本中可以同时扩增出符合预期的片段。片段长度为309bp,与萝卜CMS恢复基因核苷酸序列的一致性为69%,与拟南芥1号染色体臂上PPR基因簇核苷酸序列的一致性大于70%,与含波里马(Pol)CMS恢复基因的白菜型油菜相关序列一致性达85%。该片段编码的氨基酸序列含有两个相邻排列的PPR基序,可作为Nsa CMS育性恢复基因的候选片段。
- 郝建轶李云昌胡琼梅德圣李英德徐育松
- 关键词：甘蓝型油菜恢复基因基因克隆
- 一种油菜雄性不育恢复基因分子标记的制备方法及应用
- 本发明公开了一种油菜雄性不育恢复基因分子标记的制备方法及应用，步骤是：A、根据PPR基因保守氨基酸位点设计兼并引物；B、用CTAB法抽取油菜细胞质雄性不育恢复系的叶片DNA，采用降落PCR扩增出特异的恢复基因候选片断；C...
- 胡琼李云昌郝建轶梅德圣付丽李英德徐育松
