刘晨曦 作品数:15 被引量:22 H指数:4 供职机构: 新疆农业大学农学院 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家自然科学基金 国际科技合作与交流专项项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
海岛棉GbHCT14基因启动子克隆及上游调控因子筛选 2023年 为探究GbHCT14基因CDS区及启动子序列在棉花纤维发育中的作用,通过中国农业科学院棉花研究所数据库检索到GbHCT14基因CDS区及上游非编码区-2000 bp片段序列,克隆CDS区及启动子,并检测启动子活性。构建cDNA文库,利用酵母单杂交技术筛选阳性克隆,获得候选转录因子,并进行生物信息学分析。结果表明:1)GbHCT14基因的CDS区全长1144 bp,其翻译产物为亲水性稳定蛋白,预测定位在叶绿体,没有信号肽以及跨膜结构域。2)GbHCT14基因启动子预测到5个MYB结合位点参与植物苯丙烷代谢途径的调节,1个TCA-element参与水杨酸调节,6个ABA响应元件。3)GbHCT14启动子能够驱动GUS蛋白表达,具有启动活性。4)酵母单杂交初步筛选出16个候选基因,包括Gbar_D01G020710、Gbar_A09G017360、Gbar_A09G009680、Gbar_A11G003660、Gbar_A12G004430、Gbar_D04G021210、GbM_D09G1212、GbM_A11G0186、GbM_A03G0171、GbM_A09G1247、GbM_D10G0411、GbM_D10G1024、GbM_D02G1379、GbM_A11G1190、GbM_D12G0471和genome_Gbar-ZJU_D08。利用生物信息学分析预测表明,上述候选基因参与棉花纤维细胞壁的伸长、泛素化反应、细胞分裂、花发育以及果实成熟的过程,其中GbM_A09G1247与WAK2为相似基因,WAK2功能蛋白与果胶结合后促进细胞壁的伸长,而HCT家族基因则是影响果胶合成的关键因素之一。5)GbHCT14和WAK2基因在棉花开花后25 d内高表达,两者在棉花纤维发育调控存在相关性。综上,GbHCT14基因CDS区及启动子序列为首次获得,GbHCT14基因启动子具有启动活性,并且筛选到与裂合酶、转移酶、植物激素、质子泵和功能蛋白相关的16个上游调控的候选转录因子。 朱雨婷 杨文俊 王超越 刘晨曦 陈全家 郑凯关键词:海岛棉 启动子 转录因子 Sirt1RNA干扰表达载体的构建及Sirt1调控猪脂肪分解的机理研究 Sirt1是一种依赖于烟碱腺嘌呤二核苷酸的组蛋白脱乙酰酶,在动物的脂肪代谢中发挥着重要的作用。本研究在克隆猪 Sirt1(pSirt1)基因全长 cDNA 序列的基础上,通过猪前体脂肪细胞体外培养模型的建立,利用 RNA... 单体中 刘晨曦 伍婷 郭佳 汪以真关键词:SIRT1 过氧化物酶体增殖激活受体Γ 文献传递 肌肉生长抑制素(Myostatin)及其相关基因在绵羊肱二头肌发育中的表达分析 肌肉抑制素基因-Myostatin(MSTN),又称GDF-8,属TGF-β(transforming growth factor beta)超家族成员,是肌肉生长发育的负调节因子。对该基因表达的抑制可引起成肌细胞的过度... 刘晨曦关键词:肌肉生长抑制素 绵羊 文献传递 一种畜牧养殖用消毒装置 本实用新型公开了一种畜牧养殖用消毒装置,包括消毒罐,消毒罐的顶部贯穿并转动安装有转动辊,转动辊的外侧套设并固定设有主动齿轮,消毒罐的顶部环绕固定设有环形滑座,环形滑座的正上方设置有消毒泵,消毒泵的输出端固定设有雾化喷头,... 徐新明 田可川 狄江 石刚 哈尼克孜·吐拉甫 刘晨曦 付雪峰 吴伟伟 田月珍 牛志刚 唐森 毕兰舒文献传递 牛性控IVF胚胎和体内胚胎生长发育差异侯选基因 2009年 移植牛性控IVF胚胎易产生大胎综合征(LOS),严重影响胎儿个体生长发育。本试验对性控体外授精(IVF)胚胎移植效果进行了研究,并以性控IVF胚胎和人工授精(AI)胎儿骨骼肌为实验材料,选择与胎儿生长发育密切相关的基因:类胰岛素生长因子1(Insulin like factor 1,IGF1)、印记基因类胰岛素生长因子2(Insulin like factor 2,IGF2)、肌肉生长抑制素(Myostatin)和肌浆蛋白重链2a(Myosin heavy chain 2 a,MHC2a)为侯选基因,探讨其在性控IVF胚胎和AI胚胎中的表达差异。结果表明:母犊率为96.5%(335/347),LOS发生率为11.01%(12/103),性控IVF胚胎玻璃化冷冻移植妊娠率为34.61%(344/994),明显高于常规冷冻法移植妊娠率29.18%(218/747)(P<0.05)。性控IVF胚胎胎儿初生体质量和胸围明显高于AI胎儿(P<0.01)。在胎儿发育的不同时期,IGF1、IGF2、肌肉生长抑制素和MHC2a基因,在性控IVF胚胎和AI胚胎有明显差异,此差异可能是产生LOS的机制之一。 王世锋 刘晨曦 郑新宝 孙杰敏 陈静波 刘明军关键词:印记基因 定量PCR siRNA真核表达载体构建及对细胞MSTN基因抑制的研究 2008年 肌肉生长抑制素是肌肉生长的负调控因子。本研究为了得到有效抑制绵羊MSTN基因的siRNA分子,设计8对siRNA寡聚核苷酸引物,经退火与pSilencerTM4.1-CMV neo连接构建siRNA真核表达载体,转染C2C12细胞后,利用RT-PCR及real time PCR检测干扰效果。结果显示,8条siRNA分子中有3条对MSTN基因有显著的抑制作用,其中psi-mstn-717和psi-mstn-986分子对MSTN mRNA抑制效率分别达到61%和53%。本研究证实载体表达siRNA能有效抑制细胞MSTN mRNA的表达,下一步筛选的siRNA将用于体内实验。 马晓林 刘晨曦 牛志刚 唐森 罗淑萍 刘磊 刘明军关键词:肌肉生长抑制素基因 小干扰RNA C2C12细胞 绵羊MSTN基因启动子区SNPs分析 被引量:5 2012年 采用测序和PCR-RFLP的方法,分析了MSTN基因启动子区在7个品种绵羊中的单核苷酸多态性,结果表明:存在2个SNP位点(-959T/C,-784G/A),表现为6种基因型(TT、TC、CC、GG、GA、AA),在-959T/C位点中,国外肉用绵羊品种陶赛特、德国肉用美利奴及我区的巴士拜羊,TT为优势基因型,地方品种绵羊巴音布鲁克羊、多浪羊和阿勒泰羊在该位点中CC为优势基因型,经χ2检验,其群体的基因频率和基因型频率均处于Hardy-Weinberg平衡状态,群体遗传多态性分析表明,这6个绵羊品种中群体的多态信息含量(PIC)均处于0.25~0.50之间,为中度多态,特克赛尔羊在该位点未发生突变。在-784G/A位点中,除陶赛特与特克赛尔羊在该位点未发生突变,其他5个品种绵羊优势等位基因均为G等位基因。经χ2检验后,其群体的基因频率和基因型频率均处于Hardy-Weinberg平衡状态,群体遗传多态性分析表明,多浪羊、巴士拜羊和巴音布鲁克羊的群体多态信息含量(PIC)均处于0.25~0.50之间,为中度多态,而阿勒泰羊和德国肉用美利奴的群体多态信息含量(PIC)小于0.25,为低度多态。 贺三刚 陈芯 刘晨曦 刘国松 刘明军关键词:绵羊 MSTN 启动子 PCR-RFLP 绵羊IGF1基因慢病毒表达载体的构建及其促肌细胞生长作用研究 被引量:5 2014年 【目的】克隆绵羊IGF1基因CDS区,构建绵羊IGF1基因慢病毒表达载体,分析IGF1基因在绵羊成肌细胞增殖过程中的作用。【方法】提取绵羊肝组织总RNA,通过RT-PCR方法获得IGF1全长CDS序列,经测序鉴定后与慢病毒载体pLEX-mcs连接,构建pLEX-IGF-1慢病毒重组表达质粒,并在293T细胞中进行病毒包装和生产。分离培养绵羊原代成肌细胞,并用重组慢病毒使其感染,建立稳定转染pLEX-IGF-1的绵羊成肌细胞系。通过绘制细胞生长曲线,分析过表达IGF1对绵羊成肌细胞生长的影响;采用流式细胞仪检测细胞周期变化。【结果】克隆获得长518 bp的IGF1 CDS区序列。成功构建了pLEX-IGF-1载体,其可在绵羊细胞系中进行稳定表达。通过Western blotting检测显示,IGF1在293T细胞以及绵羊原代成肌细胞中获得表达,细胞生长曲线显示,稳定表达IGF1的成肌细胞比对照细胞生长速度显著加快(第1天差异显著(P<0.05),第2~6天差异极显著(P<0.01));细胞周期测定结果显示,稳定表达IGF1的成肌细胞比对照细胞较早进入S期,且在S期的细胞数目比对照细胞多29.35%。【结论】绵羊IGF1能够有效促进绵羊成肌细胞的生长。 安静 张雪梅 刘晨曦 刘明军关键词:慢病毒表达载体 细胞生长曲线 一种畜牧养殖水处理集成设备 本实用新型公开了一种畜牧养殖水处理集成设备,包括饲养池,所述饲养池中间位置处固定有隔板,所述隔板下端设置有收集槽,所述饲养池内壁右端开设有活动仓,所述活动仓内通过转轴连接有丝杆,所述丝杆前端连接有驱动电机,所述丝杆外壁套... 徐新明 田可川 狄江 石刚 哈尼克孜·吐拉甫 刘晨曦 付雪峰 吴伟伟 田月珍 牛志刚 唐森 毕兰舒文献传递 转Noggin基因生产促毛囊生长细毛羊的研究 毛囊的性状和皮肤组织结构决定了羊毛的品质和产量。本研究目的是获得转noggin基因的细毛羊,观察其对细毛羊毛囊生长的影响,进而培育出促进毛囊生长的转基因细毛羊品系。 贺三刚 张雪梅 张宁 刘晨曦 汪立芹 陈童 黄俊成 李文蓉 刘明军