徐锡涛
- 作品数：23 被引量：73H指数：5
- 供职机构：上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会重点实验室专项资金项目中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 表没食子儿茶素没食子酸酯诱导人肝癌细胞HepG2凋亡与TGF—β1-Smad通路激活有关被引量：10
- 2009年
- 目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对人肝癌细胞HepG2细胞周期和凋亡的影响及其机制。方法四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测EGCG对HepG2细胞增殖的影响，流式细胞术检测EGCG对HepG2细胞周期的影响以及细胞凋亡情况，逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）和萤光素酶报告基因系统检测验证HepG2细胞中TGF—β1-Smad通路的完整性，实时聚合酶链反应（realtime PCR）检测EGCG对HepG2细胞中Sfnad2、Smad3、Smad4和Smad7 mRNA表达的影响。结果高浓度EGCG干预时，HepG2细胞的增殖能力随着EGCG浓度和作用时间的增加而下降，呈明显的时效和量效关系，作用72h，HepG2细胞的IC50为111．76μmoL／L。随EGCG剂量增大，HepG2细胞中G0／G1期细胞的比例逐渐增高，80、120和160μmoL/L EGCG处理组分别为44．9％、54．8％和91．3％；相反，S期细胞比例逐渐降低，80、120和160μmoL/L EGCG处理组依次为38．5％、29．2％和3．0％。随着EGCG剂量增大，HepG2细胞的早期凋亡增加，80、120和160μmol／L EGCG处理组的早期凋亡率分别为1．82％、4．22％和6．83％；晚期凋亡也随之增加，80、120和160μmol／L EGCG处理组的晚期凋亡率分别为7．92％、24．19％和27．92％。HepG2细胞中TGF—β1-Smad通路是完整的。EGCG对HepG2细胞中Smad2、Smad3和Smad4 mRNA的表达无明显影响，但下调Smad7 mRNA的表达。结论EGCG能诱导人肝癌细胞HepG2的凋亡，其机制可能涉及TGF—β1-Smad通路的激活。
- 童锦禄聂芳冉志华潘常青徐锡涛朱明明萧树东
- 关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯HEPG2细胞凋亡
- 英夫利西单抗治疗克罗恩病肛瘘停药后复发的影响因素分析
- 2021年
- 背景:英夫利西单抗(IFX)治疗克罗恩病(CD)合并活动性肛瘘获得缓解后,部分停药患者会在数周至数年内复发。目的:探讨IFX治疗CD肛瘘停药后复发情况和可能的影响因素。方法:回顾性收集2013年6月-2019年5月在上海仁济医院应用IFX治疗CD肛瘘、获得影像学部分或完全缓解后停药病例的临床资料,提取人口学、临床和影像学特征以及治疗和复发信息,采用Kaplan-Meier曲线分析肛瘘复发和肠道复发情况,采用Cox比例风险模型筛选复发影响因素。结果:共56例IFX治疗CD肛瘘后停药的患者纳入研究,停药时肛瘘影像学完全缓解26例,部分缓解30例。中位随访时间为20.5个月,21例(37.5%)患者肛瘘复发。停药后12、24、60个月肛瘘累积复发率分别为29.0%、33.7%和42.8%,肠道累积复发率分别为21.7%、31.2%和56.4%。多因素分析显示,非狭窄非穿透型病变(HR=9.711,95%CI:1.210~77.939,P=0.032)、直肠累及(HR=3.034,95%CI:1.119~8.231,P=0.029)是IFX停药后CD肛瘘复发的独立危险因素,IFX使用次数多则为保护因素(HR=0.885,95%CI:0.792~0.990,P=0.032)。结论:CD肛瘘经IFX治疗获得缓解停药后复发率高,非狭窄非穿透型病变和直肠累及是肛瘘复发的危险因素,增加IFX使用次数可减少肛瘘复发。
- 徐锡涛陆君涛朱明明王天蓉戴张晗童锦禄冉志华
- 关键词：CROHN病英夫利西单抗停药复发
- 肿瘤干细胞学说与结直肠癌的形成和多药耐药
- 2010年
- 对化疗药物耐药是肿瘤化疗失败的主要原因，肿瘤干细胞理论为重新认识肿瘤化疗药物的耐药机制提供了新思路。近年，许多学者从结直肠肿瘤组织中分离出肿瘤干细胞，并提出肿瘤干细胞致瘤模型和耐药模型学说，很好地解释了药物治疗后肿瘤复发的最根本原因。本文就肿瘤干细胞与结直肠癌的形成和多药耐药作一综述，旨在为进一步研究肿瘤干细胞与结直肠癌的内在联系提供参考。
- 徐锡涛童锦禄汪铮冉志华
- 关键词：肿瘤干细胞结直肠肿瘤抗药性肿瘤
- 应用芯片技术筛查人结肠癌羟基喜树碱多药耐药相关微RNA的研究被引量：5
- 2008年
- 目的探讨新一类调控分子微RNA（miRNA）在人结肠癌羟基喜树碱多药耐药中的作用，为逆转肿瘤化学治疗的多药耐药性提供新的靶点。方法运用miRCURY^TMLNA ArrayV8．1版芯片检测人结肠癌细胞SW1116和人结肠癌羟基喜树碱多药耐药细胞SW1116，／HCPT的miRNA表达谱，筛选出具有表达差异的miRNA（2倍以上）。通过PiTcar，Targetscan，MIRanda等算法在线搜寻差异表达miRNA的靶基因。利用茎环特异miRNA引物反转录特异的miRNA，并采用荧光定量PCR法对个别差异表达的miRNA进行验证。结果用于芯片分析的总RNA的吸光度比值分别为1．93（SW1116）和1．94（SW1116／HCPT）。琼脂糖变性凝胶电泳进一步验证总RNA质量符合芯片要求。通过芯片检测后发现SW1116／HCPT相比SW1116表达下调的miRNA共有28条，表达上调的有36条。根据靶基因预测结果，我们选取其中2条表达下调hsa-miR-452，hsa-miR-373＊和1条表达上调hsa-miR-506进行荧光定量PCR验证，hsa-miR-452和hsa-miR-506的结果与芯片相符合，但hsa-miR-373＊表达量不足以由荧光定量PCR检测出。结论miRNA表达量的改变可能在人结肠癌羟基喜树碱多药耐药中起有关键作用。
- 童锦禄冉志华陈翔徐锡涛聂芳萧树东
- 关键词：结肠肿瘤微RNA多药耐药性
- 爬行脂肪组织在鉴别溃疡性结肠炎和克罗恩病中的应用被引量：8
- 2018年
- 背景:溃疡性结肠炎(UC)和克罗恩病(CD)的疾病表现有一定的相似性,但两者治疗方法和转归截然不同。目的:探讨能谱CTE定量分析爬行脂肪组织在鉴别UC和CD中的应用价值。方法:回顾性分析2014年3月—2015年3月行能谱CTE检查的40例CD和15例UC患者,在能谱CTE图像上对两组患者的5个肠段进行评估,测定肠段对应爬行脂肪组织的能谱曲线斜率(λ_(HU))和标准化水浓度(NWC)。同时测量内脏脂肪面积(VFA)、皮下脂肪面积(SFA),计算两者比值(MFI)。建立Logistic回归方程,以ROC曲线比较能谱CTE和内脏脂肪法鉴别UC和CD的敏感性和特异性。以Pearson相关系数分析λ_(HU)、NWC与临床活动性、CRP和内镜评分的相关性。结果:CD患者肠段λ_(HU)和NWC总体上随疾病严重程度的增加而升高,UC患者各肠段间则无明显差异。Logistic回归模型的ROC曲线显示,能谱CTE鉴别UC和CD的特异性优于内脏脂肪法(86.7%对73.3%)。Pearson相关性分析显示CD患者λ_(HU)和NWC与SES-CD评分呈正相关。结论:能谱CTE定量分析爬行脂肪组织在UC和CD的鉴别中具有一定的临床应用价值。
- 徐锡涛冯琦周易朱炯郑青冉志华
- 关键词：CROHN病结肠炎溃疡性
- 阿达木单抗对克罗恩病的疗效和安全性评估被引量：2
- 2011年
- 背景:国外一系列随机对照试验(RCT)比较了阿达木单抗和安慰剂治疗成人中重度克罗恩病(CD)的疗效和安全性,但目前尚无统一结论。目的:对阿达木单抗治疗成人CD的疗效和安全性行荟萃分析。方法:联机检索PubMed、EMBASE和Cochrane Library,纳入比较阿达木单抗与安慰剂治疗成人中重度CD的RCT和相关文献,应用RevMan4.2软件行荟萃分析。结果:共4篇文献纳入本荟萃分析。阿达木单抗对成人CD的诱导缓解率(OR=2.98,95%CI:1.78～4.99,P<0.0001)和维持缓解率(OR=4.79,95%CI:2.96～7.73,P<0.00001)均明显高于安慰剂组,差异有统计学意义:诱导治疗的整体不良反应发生率低于安慰剂组,差异有统计学意义(OR=0.60,95%CI:0.42～0.87,P=0.007);维持治疗的整体不良反应发生率与安慰剂组相比无明显差异(OR=1.09,95%CI:0.72～1.65,P=0.68),严重不良反应发生率低于安慰剂组,差异有统计学意义(OR=0.51,95%CI:0.33～0.80,P=0.003)。结论:阿达木单抗治疗成人CD有效且安全性较高,可作为英夫利昔单抗治疗无效或不耐受者的选择,但仍需进一步行大样本临床试验加以验证。
- 黄美兰冉志华徐锡涛童锦禄萧树东
- 关键词：阿达木单抗CROHN病肿瘤坏死因子Α随机对照试验META分析
- 克罗恩病CNTNAP3基因拷贝数变异及其意义
- 2017年
- 背景:DNA拷贝数变异是人类疾病的重要致病因素,可能参与了炎症性肠病(IBD)的发病机制和病理过程。目的:探讨CNTNAP3基因在克罗恩病(CD)中的拷贝数变异情况及其意义。方法:纳入2009年7月—2010年12月上海交通大学医学院附属仁济医院收治的活动期CD患者101例,同期80例健康体检者作为正常对照。采集CD患者外周血或肠黏膜标本,以比较基因组杂交芯片(a CGH,n=8)和荧光定量PCR(n=93)筛选、验证CNTNAP3基因拷贝数变异,ELISA法(n=55)检测CNTNAP3编码蛋白表达。结果:a CGH检测显示初发CD患者染色体9p13区域(含CNTNAP3基因)存在大片段拷贝数扩增;荧光定量PCR验证并确认CD组外周血CNTNAP3基因拷贝数显著高于正常对照组,非激素治疗组差异更为明显(208 616.4±126 984.7和233 453.3±113 520.8对161 750.2±53 940.3,P<0.05和P<0.01)。在各项CD临床参数中,仅吸烟史与CNTNAP3基因拷贝数扩增显著相关(P<0.05),但拷贝数明显扩增者的血浆CNTNAP3水平与正常对照组无明显差异(P>0.05),与简化CD内镜评分无相关性(P>0.05)。结论:CNTNAP3基因拷贝数扩增可能参与了中国CD人群的发病,激素治疗和吸烟可能是影响该基因拷贝数变异的因素;血浆CNTNAP3水平不能用于区分CD患者与健康人。本研究结论有待进一步验证。
- 黄美兰乔宇琪沈骏蔡晨雯徐锡涛陈胜良冉志华
- 关键词：炎症性肠病CROHN病比较基因组学
- Ufd1基因沉默逆转SW1116/HCPT细胞株对羟基喜树碱耐药的研究被引量：2
- 2011年
- 背景:泛素融合降解1样蛋白(Ufd1)在蛋白质逆向转运中发挥一定作用。前期研究发现羟基喜树碱(HCPT)耐药人结肠癌细胞株SW1116/HCPT Ufd1表达增高。目的:探讨Ufd1基因沉默在逆转SW1 116/HCPT细胞株对HCPT耐药性中的作用。方法:干扰组SW1116/HCPT细胞转染Ufd1特异性siRNA以沉默Ufd1基因,对照组转染非特异性siRNA。体外药物敏感性试验检测细胞对HCPT的敏感性,流式细胞术检测细胞周期,比色法测定caspase-3活性,蛋白质印迹法检测p-JNK、p53表达情况和细胞内泛素化蛋白贮留情况。结果:干扰组SW1116/HCPT细胞对HCPT的敏感性显著高于对照组(P<0.05)。经HCPT作用,干扰组和对照组细胞均出现S期阻滞、caspase-3活性增高和p-JNK、p53、泛素表达增加,干扰组更为明显。结论:以RNA干扰技术沉默Ufd1基因可逆转SW1116/HCPT细胞株对HCPT的耐药性,推测该作用可能与活化JNK信号通路、上调p53表达以及致细胞内泛素化蛋白贮留而破坏细胞内蛋白代谢的协调性有关。
- 陈翔聂芳冉志华童锦禄朱明明徐锡涛萧树东
- 关键词：结直肠肿瘤羟基喜树碱多药耐药相关蛋白质类
- miR-506在人结肠癌羟基喜树碱多药耐药中的功能研究被引量：2
- 2010年
- 目的探讨miR-506在人结肠癌羟基喜树碱多药耐药中的潜在作用。方法首先通过PCR从基因组DNA中克隆出包含miR-506前体的片段,将其连接至miRNA表达载体pMIF-cGFP-Zeo中,测序进行验证。将构建成功的pMIF-miR-506转染至低表达miR-506的亲本细胞SW1116中,加入含G418的选择性培养基进行选择性培养。运用RT-PCR验证稳定转染pMIF-miR-506的SW1116细胞株中的miR-506的表达情况,MTT法检测稳定转染pMIF-miR-506的SW1116细胞株和亲本细胞SW1116对羟基喜树碱的敏感性差异,Annexin V/PI检测各自对羟基喜树碱的凋亡情况。结果测序结果表明hsa-miR-506的前体序列被成功地构建至miRNA表达载体pMIF-cGFP-Zeo中。TaqMan荧光定量PCR技术检测发现,相比亲本细胞SW1116,稳定表达绿色荧光的SW1116细胞克隆中miR-506的含量显著升高,约为33.7±8.3倍。细胞增殖试验表明稳定转染pMIF-miR-506的SW1116细胞株的IC50为(280±13)μg/L,而对照组SW1116的IC50为(152±12)μg/L。同时还发现在相同浓度的羟基喜树碱作用下,亲本细胞SW1116较稳定转染pMIF-miR-506的SW1116细胞株的凋亡细胞比率增高(150μg/L:7.8%±1.7%vs5.4%±1.2%;300μg/L:33.6%±3.9%vs18.2%±4.7%)。结论成功地构建了过表达miR-506的载体pMIF-miR-506;过表达miR-506能够增加SW1116对羟基喜树碱的抵抗性。
- 童锦禄徐锡涛朱明明陈翔聂芳冉志华萧树东
- 关键词：结肠癌耐药性细胞凋亡羟基喜树碱
- 微核糖核酸506在人结肠癌细胞中的靶基因预测和鉴定被引量：1
- 2010年
- 目的预测并验证微核糖核酸506（miR506）的真实靶基因。方法通过多个生物信息学软件对miR-506可能调控的靶基因进行预测，结合其生物学功能和前期基因芯片结果，确定候选靶基因。根据miR-506结合候选靶基因的3’UTR位点，构建相应的报告基因载体及突变体。将所构建的报告基因载体或突变体、β-半乳糖苷酶对照报告酶载体和miR506前体共转染至SW1116细胞中，24h后检测荧光报告酶变化。结果过氧化物酶体增殖物激活受体（PPAR）a和维甲酸受体（RXR）a皆为has-miR506的可能靶基因，miR-506作用于PPARa基因3’UTR区可能存在3个位点，RXRα基因3’UTR区可能存在2个位点。针对于PPARα基因的三组报告基因载体中，位点79307936组变化最为明显[（2．68±0．55）倍]，位点3547—3553组和位点8335—8341组的荧光报告酶表达变化为其突变体的（1．43±0．22）倍和（1．34±0．20）倍。针对于RXRα基因的两组报告基因载体的荧光报告酶变化则并不显著。结论PPARa为miR-606的真实靶基因，而RXRa非miR-506的靶基因。
- 冉志华童锦禄聂芳朱明明徐锡涛陈翔萧树东
- 关键词：结肠肿瘤过氧化物酶体增殖物激活受体Α维甲酸受体Α
