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孔鹏洲
作品数:
5
被引量:1
H指数:1
供职机构:
天津医科大学基础医学院天津市生命科学中心实验室
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发文基金:
天津市自然科学基金
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
汤华
天津医科大学基础医学院天津市生...
苏畅
天津医科大学基础医学院天津市生...
刘民
天津医科大学基础医学院天津市生...
王萌
天津医科大学基础医学院天津市生...
王菲菲
天津医科大学基础医学院天津市生...
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天津医科大学
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孔鹏洲
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健康世界
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2008
2篇
2007
共
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AGO2相互作用蛋白PSMC3、DFFA对RNAi功能的影响
目的: RNAi是生物体内基因转录后水平调节的重要方式。外源性的dsRNA、siRNA和内源性的miRNA均可以做作为RNAi的触发器,可以对同源靶RNA诱导产生强大且特异性的剪切或抑制表达作用。RISC作为RNAi的...
孔鹏洲
关键词:
酵母双杂交系统
文献传递
树突状细胞特异表面分子DC-SIGN的研究进展
被引量:1
2007年
DC-SIGN是一种特异表达于树突状细胞(DC)表面的Ⅱ型跨膜蛋白,在机体生理和病理免疫调节中发挥着重要作用,可以与ICAM-3结合,从而介导DC与T细胞的相互作用,其CRD区可以与HIV-1、HCV、结核杆菌等多种病原体表面糖蛋白结合,从而促进病原体感染。最近的研究表明DCSIGN与肿瘤免疫、免疫逃避也密切相关。
孔鹏洲
汤华
关键词:
DC-SIGN
HIV-1
分子机制
美丽鲜花的隐患
2008年
鲜花一直是美丽的象征,在看望病人时,送上一束美丽的鲜花,这早已成为一种时尚。可是,当人们带着这种美好的祝福去医院看望病人的时候,却往往会被医生、护士礼貌地拒之门外。人们百思不得其解,这背后究竟有着怎样的玄机呢?
孔鹏洲
关键词:
鲜花
健康
过敏
病菌传播
PIWIL4的克隆及其抗体制备和初步应用
2010年
目的制备兔抗人PIWIL4的多克隆抗体,鉴定其特异性,并应用该抗体检测内源性PIWIL4在人各细胞系中的表达差异及细胞定位。方法构建原核表达质粒pGEX-5X-1.PIWIL4,转化大肠杆菌BL21,PIWIL4蛋白经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。融合蛋白通过切胶纯化后免疫家兔制备抗体血清。以间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗体效价,Westernblot鉴定抗体特异性及检测PIWIL4在各细胞系中的表达差异,免疫荧光染色观察PIWIL4的细胞定位。结果成功构建原核表达质粒,表达并纯化PIWIL4蛋白。免疫大白兔后得到PIWIL4多克隆抗体,ELISA检测抗体效价为1:20000,Westernblot和免疫组化确定抗体具有高度特异性,并成功地应用该抗体检测到PIWIL4在人多种细胞系中的表达差异及细胞定位。结论PIWIL4蛋白及其多克隆抗体的成功制备,为进一步研究PIWIL4的生物学功能奠定了基础。
苏畅
浦永
孔鹏洲
王萌
刘民
汤华
关键词:
原核表达
抗体
肿瘤
纤维连接蛋白1的原核表达、纯化及抗体的制备
2010年
目的构建人纤维连接蛋白1(FN1)基因的原核表达载体,诱导其表达并纯化该蛋白,制备特异性抗体。方法利用RT—PCR方法扩增人FN1编码序列450bp的片段,包含FN1羧基端的150个氨基酸。构建原核表达质粒pRSETA2-FN1,转化大肠杆菌BL21(DE3),FN1蛋白经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。融合蛋白通过Ni^2+-NTA树脂亲和纯化后免疫兔制备抗体血清。蛋白质免疫印迹(Western blot)和免疫组化检测其特异性。结果成功构建重组质粒pRSETA2-FN1,限制性内切酶酶切鉴定及DNA测序均显示插入片段正确。SDS—PAGE凝胶显示表达的融合蛋白相对分子质量约为20000(FN1-His标签),与预期结果一致。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗体效价约为1:10000,Western blot显示可以特异性地检测出人血浆和肝癌细胞系HepG2全细胞裂解液中相对分子质量约250000的纤维连接蛋白。免疫组织化学可显示FN1在正常肺及肺癌组织中的特异性分布。结论成功地原核表达了FN1C-末端蛋白,并免疫获得了抗FN1特异性抗体。
王菲菲
苏畅
吴海东
王萌
孔鹏洲
刘民
李欣
汤华
关键词:
纤维连接蛋白
基因表达
抗体
癌症
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